Способ количественного определения иммуноглобулинов в сыворотке крови человека

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН 9) (И) А 1 С 01 И 33/5 РЕТЕ ЕЛЬСТВУ Р 48ударственный меи Е,Г.Цайе) ологические мес.41-42. Ь ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ ОПИСАНИЕН ДВтоЕСКОМУ С 8 И 3942295/28-1430, 07.8530,12.87.Бюл.Киргизский гоский институтЕ,В.Бененсон612. 015 (088.МанчиниИммуМир, 1979;(54) СПОСОБ КОЛИЧЕ СТВЕ ННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В СЫВОРОТКЕКРОВИ ЧЕЛОВЕКА(57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - ускорениеспособа. Моноспецифическую антисыворотку и исследуемый образец вносятв реакционную систему с сернокислымкадмием и подвергают спектрофотометрии. Затем определяют величину зкстинции преципитата. Время проведенияреакции сокращается до 1 ч. 2 ил.1363075 Изобретение относится к медицине,а именно к иммунологии.Целью изобретения является ускорение способа.Цель достигается проведением иммунопреципитации в жидкой фазе вприсутствииО,ОЗЗЕ-ного сернокислогокадмия.Способ осуществляется следующимобразом,Реакцию преципитации проводят вобъеме 0,5 мп физиологического раствора, содержащего 0,0337. сернокислого кадмия. Исследуемый образецвносят в реакционную систему в объеме 0,005 мп (при исследовании сыворотки или плазмы крови их следуетразвести в 2-2,5 раза, спинномозговую жидкость, перитониальные и другие экссудаты исследуют неразведенными). Сухую моноспецифическую антисыворотку против определяемого иммуноглобулина растворяют в 0,5 мп дистиллированной воды и вносят н реакционную систему в объеме 0,02 мп.Готовят следующие контроли: 0,5 мп0,0337.-ного раствора сернокислогокадмия (Е); 0,5 мл 0,0337-ного раствора сернокислого кадмия и 0,005 млисследуемого образца (Е ), 0,5 мп0,0337.-ного раствора сернокислогокадмия и 0,02 мл антисыворотки (Е ),Все пробы и контроли несколькораз встряхивают, выдерживают 1 ч прикомнатной температуре и спектрофотометрируют в кювете с длиной оптического хода 0,6 см при длине волны340 мкм,Величину экстинции преципитата,характеризующего содержание иммуноглобулина в исследуемом образце(Е ), определяют следующим образом.Экстинция опыта Еь складывается изэкстинции растворителя Е экстинции исследуемого образца (Е- Е,),экстинции антисыворотки (Я - Е ) иэкстинции образовавшегося преципитага Е, или Е, = Е + Е - Е + Е + Е, .1 уотсюда Е х = Ео - Е Г Еа+ Е/ 5 10 15 20 25 30 40 Данные, полученные способом Ман 5055 В жидкой преципитирующей системе с избытком антител и при их постоянном количестве величина образующегося преципитата линейно зависит от содержания антигена в системе и может быть описана уравнением уах + + Ь (см)Таким образом, количественную оценку результатов определения иммуноглобулийов турбидиметрическим способом проводят как в условных единицах оптической плотности (экстинции 1, так и в метрических единицах, при этом предварительно находят с помощью эталонных образцов иммуноглобулинов значения коэффициентов линейной функции а и Ь.Сравнительные измерения концентрации иммуноглобулинов в эталонных сыворотках способом Манчини и предлагаемым способом дали следующие результаты (фиг. 1-2).Были использованы эталонные сыворотки, содержащие, мг/мл: А 1,7;. М 1,3; 1 21,76, серия 9, контроль 2545, производства ЦНИИ вакцин и сывороток им И.И.Мечникова;А 1,51;М 1,10; 1 8,82, серия 2, контроль У 1782, производства Горьковского НИИЭМ.Каждую эталонную сыворотку разводили в 2 и 4 раза физиологическим раствором таким образом, что для построения графика использовалось от 4 до 6 точек. Параллельно ставили реакцию радиальной иммунодиффузии по Манчини с использованием тех же эталонных сывороток.Величины, полученные предлагаемым способом, хорошо укладываются в линейную зависимость с небольшими отклонениями от ожидаемых значений: для А отклонения от заданных эталоном составили 1,3-7,97, для М - на . 3,87., для .1 - на 5,77. чини, отклоняются от эталонных болеезначительно: для А - на 5,9- 12,57.,для М - на 5,8-257., для 1 - на 2,683, 77 Время проведения реакции 1 ч вместо 48 ч.формула изобретения Способ количественного определения иммуноглобулинов в сыворотке крови человека путем постановки реак- ции преципитации с моноспецифическими антисыворотками против иммуноглобулинов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения способа, реакцию иммунопреципитации проводят в жидкой фазе в присутствии0,0337-ного сернокислого кадмия., д. 4/ я, 4 Ужгород, ул, Про оизводственно-полиграфическое предприяти сроо,о НИИПИ Государственного по делам изобретений 3035, Москва, Ж, Р Подписное митета СССР открытий ская наб.