Способ определения витамина и в биологических материалах

,ЯО 134 6 А 1511 4 С 01 Н 3348РДЯъ 1 Г 1 Я ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ гяип;: с ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОРСИОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт комбикормовой промышленности(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА13 В БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛАХ, включающий экстракцию, осаждение витамина П раствором рейнеката аммония споследующим колориметрированием образующихся в процессе обработки ве ществ, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повьппения эффективностиспособа, экстракцию осуществляют1 н. раствором соляной кислоты, послеосаждения полученные кристаллы промывают 0,1 н, раствором соляной кислоты и растворяют в 50-707.-ном,растворе этанола, а колориметрированиюподвергают полученный раствор кристаллов,Изобретение относится к техникеколичественного определения содержания витамина И (метилметионинсульфония, Я-метилметионина МИБ) широко применяемого при контроле качества продукции и комбикормовой промьппленности.Цель изобретения - повышение эффективности способа,П р и м е р. Навеску премикса массой 2 г помещают в мерную колбу вместимостью 00 см приливают 60 смзводы и встряхивают на качалке 5 мин.Затем содержимое колбы доводят водойдо метки, перемешивают и фильтруют,Берут 5-10 см фильтрата в мернуюколбу вместимостью 25 см прибавляют 2,5 см З 1 и. раствора соляной кислоты и 5 см 27.-ного водного раствора рейнеката аммония, перемешивают иоставляют на 2 ч в холодильнике,После выпадения осадка раствор фильтруют на воронке Шотта У 2 в колбу Бунзена с помощью вакуум в насо. Кристаллы оставшиеся на фильтре, промывают три раза порциями по 5 см охлажденной 0,1 н, соляной кислотой.Колбу Бунзена меняют, осадок растворяют 707-ным раствором этиловогоспирта, приливая в три приема по5 см , каждый раз размешивая осторожно слой с осадком.Полученный фильтрат количественно переносят в мерную пробирку вместимостью 15 смЗ, доводят раствором этанола объем до метки, перемешивают и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 520 нм в кюветах с толщиной поглощающего свет слоя 1 О мм относительно 07-ного раствора этанола,Расчет содержания витамина У(х) проводят по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору с концентрацией витамина 1 мг/см пользуясь формулой Е Ч 10"х (кг/т) =,где К - масса витамина, найденнаяпо калибровочному графику,мг:Ч - объем водного экстракта,см;Ч, - объем фильтрата взятыйна анализ, смЭ,ш - масса навески премикса, г;1) - коэффициенты перевода миллиграмов в килограммы (числитель) и1 граммов в тонны (знаменатель).Полученные результаты испытанияпредлагаемого и известного способовопределения витаминаприведены втабл, 1 и 2 (введено витамина У впремиксы 30,0 кг/т),Анализ экспериментальных данныхпоказывает, что содержание витаминав премиксах, определяемое предлагаемым способом, при концентрации раст 25 вора рейнеката аммония, равной 2,02,57, составляет 29,2+0,6 - 30,0 - ф 0,57 кг/т, а при его концентрации1,0 - 57 составляет 5,5+0,5- 23,5 + 0,6 кг/т; при определенииЗО известным способом - 250110 кг/тс отклонениями в меньшую сторону до2,4 - 7,5 кг/т по отношению к введенному количеству (табл,1).Ввиду ограниченной растворимостирейнеката аммония в воде его концентрации более 2,57 не испытывались.Наиболее оптимальной концентрацией этилового спирта является 50-753при которой труднорастворимый комп 4 О лект дирейнеката витамина ) быстрорастворяется. В данном случае содержание витамина У равнялось 293 фО 3- 29,70,6 кг/т, а при концентрацииэтанола 40 и 967, количество витами 4 б на соответственно составило 264106и 259+04 кг/т, т,е, было занижен -ным (табл.2 ). По известному способуопределено витамина Ц на 167 меньше по сравнению с введенным,1 14 335 Ь 1 аблица Содержание витамина Б, кг/т, по способу предлагаемому при концентрации раствора рейнеката аммония, Еизвестному 2,0 2,2 1,5 2,5 16,9 21,4 30,4 29,1 31,6 27,6 15,1 25,1 31,1 30,2 28,2 22,5 16,2 23,2 29,0 29,2 30,6 14,3 23,7 28,7 29,5 29,1 26,7 24,0 14,9 29,4 29,2 28,0 234 Итого: 15,5+0,5 23,5 ф 0,6 29,510,4 30,0+0,5 29,210,6 25,011,0 Таблица 2 Содержание витамина У, кг/т, по способу предлагаемому при растворении осадка дирейнекатараствором этилового спирта, 7 известному 96 1 1 1 1 40 50 60 70 75 22,8 30,30,1 31,1 27,2 30,5 28,1 28,4 25,4 23,2 25,1 28,7 28,6 29,3 25,6 24,8 28,0 28,3 27,9 29,2 29,5 27,4 28,4 30,4 25,1 29,5 31,2 26,3 26,8 29,6 2 Я,5 25,9 31,4 28,2 26,1 Составитель И,ТарееваТехред М.Дидык Редактор В, Данко Корректор Л.Патай Заказ 4818/46 Тираж 776 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4 Итого: 26,4" 0,6 29,610,5 29,4+0,5 29,310,3 29,7+0,6 25,9+0,4 25,2+1,0