Способ определения чувствительности микрофлоры кишечника к антибактериальным препаратам

, СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК,(19) (11) 4 С 12 1/ ЗОБРЕТ СА рациональнойель изобретенияособа за счет го влияния ратов на всю киущность.способабезбактериальльно вводят 0,2- льного, суспенХенкса. При ственный и колирофлоры кишечя исследуемого ий больного, За 0 ч после зараания антибактеДалее делают по ни 19 ика мыше(57) Изобрской микро ОПРЕ ЛОРЫ РЕПАР о внению стельность х од мик и отбираю них для л лог ени ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(71) 2-й Московский государственный медицинский институт им.Н.И,Пирогова(56) Авторское свидетельство СССРБ 951786, кл. А 61 В 10/ОО, 1980,Навашин С,М., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М.: Мед.1982, с, 495.Справочник по микробиологическими вирусологическим методам исследовая/Под ред. М.О. Биргера, М,: Мед,82, с. 180-216 ЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЪКИШЕЧНИКА К АНТИБАК АТАМотносится к медицини и может быть использовано для выбора антибиотикотерапии. Ц повышение точности сп выявления одновременн тибактериальных препа шечную микрофлору. С сводится к тцму, что ным мышам интрагастра 0,3 мл испражнений бо дированных в растворе этом анализируют каче чественный состав мик ника мышей до введени материала и испражнен тем вводят через 20-3 жения различные сочет риальных препаратов. севы содержимого кише чают качественный и к состав микрофлоры.По тава микрофлоры по ср ным определяют чувств рофлоры к препаратам более эффективные из91 219,3, 19,5, 19,6 г, находящимся в гнотобиологическам изоляторе, вводят по 0,2 мл супернатанта разведенных 1:5 испражнений больного М. (основной диагноз: хрониосепсис). Через 20 ч первой мыши интрагастрально начинают вводить гентамицин 10 мг/кг+ + нистатин 100 мг/кг; второй - зритромицин 10 мг/кг + полимиксин100 мг/кг + нистатин; третьей - цефамезин 100 мг/кг + невиграмон 100 мг/кг + нистатин 100 мг/кг, Антибиотики вводят животным однократно в день, в течение 2 сут. Микрофлору испражнений животных исследуют перед контаминацией декантантом испражнений больного перед назначением антибиотиков и на следующий день после отмены антибиотиков, Количественный и качественный состав микро- Флоры испражнений больного исследуют в день контаминации кишечника безбактериальных животных реципиентов путем посева различных разведений исследуемого материала на соответствующие селективные питательные среды,Результаты опытов показывают, чта условно патогенная микрофлора кишечника М-ва наиболее чувствительна к цефамезину + невиграмону, которые в то же время подавляют рост молочно- кислых представителей нормальной микрофлоры менее значительно по сравнению с другими, использовавшимися в опыте антибиотиками. 30 50Через 10, 20 и 30 ч после контаминации безбактериальных мышей микрофлорой испражнений больного у каждого животного исследуют состав микрофлоры и сопоставляют с количественным и качественным составам микрафлоры больного,П р и м е р 2. Трем безбактериальны мышам линии СВА с массой тела,13411Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к лабораторным способам определения чувствительности всей микрофлоры кишеч 5ника к антибактериальным препаратам.Пель изобретения - повышение точности способа за счет выявления одновременного влияния антибактериальных препаратов на всю кишечную микрофлору,Способ иллюстрируется следующимипримерами.П р и м е р 1. Три здоровых мышилинии СВА с массой тела 18,5; 19,0 15и 18,8 г, находясь в обычных условиях, в течение 3 дней получают интрагастрально амикацин 500 мг/кг, ам иокс 300 тыс. ед/кг и нистатин300 тыс.ед/кг. Корм и воду животныеполучают стерильные, На 3 день наружные покровы мышей обрабатывают 0,57 ным раствором хлоргексидина, послечего животных вводят в стерильный нгнотобиологический изолятор. 25Гнотобиологический изолятор стерилизуют аэрозолями 14 -ного раство -ра перуксусной кислоты в течение60 мин, После введения в изолятормыши получают еще в течение двухдней антибиотики в тех же дозах,стерильный корм и питье,Через 24 ч после отмены антибактериальных препаратов безбактериальным мышам интрагастрально вводят декантат испражнений больного Г. с диагнозом: гранулирующая рана голени;первой мыши 0,1 мл, второй мыши0,2 мл и третьей мыши 0,3 мл. Декантат испражнений получают следующим образом. Навеску испражнений го 40могенизируют в стерильной фарфоровойступке, добавив в нее стерильный раствор Хенкса в соотношении 1:5. Гомогенат переносят в стерильную пробирку, которую в. свою очередь помещаютв сосуд со льдом. Через 5 мин послеэтого надосадок переносят в, другуюпробирку и используют его для контаминации безбактериальных мышей,П р и м е р 3. Трем бактериальным мышам линии СВА с массой тела 19,6, 19,9 и 20,0 г, находящимся в гнотобиологическом изоляторе, однократно интрагастральна вводят по 0,3 мл декантата разведенных стерильным физиологическим раствором 1;5 испражнений больного К-го (диагноз; рубцовый стеноз пищевода). Через 30 ч первой мыши интрагастрально вводят пилимиксин 100 мг/кг + эритромицин 1.0 мг/кг + нистатин 100 мг/кг; второй мыши - невиграмон 00 мг/кг + цефамизин 100 мг/кг + нистатин 100 мг/кг; третьей мыши - невиграмон 100 мг/кг + + гентамицин 10 мг/кг + нистатин 100 г/кг, Антибиотики вводят однократно в день на протяжении 7 дней. Изучают качественный и количественный состав микрофлоры больного перед контаминацией мышей, а также микрофлоры мышей перед контаминацией их кишечника, перед началом введения антибиаСоставитель Г, СмирноваТехред Л.Сердюкова Корректор С. Шекмар Редактор Н, Киштулинец Заказ 4400/30 Тираж 499 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, роектная, 4 313тиков и на следующий день после ихотмены,Результаты опыта показывают, чтоаэробная условно патогенная микрофлора кишечника больного Ка-ского наиболее чувствительна к антибиотиковомукоктейлю, состоящему из полимиксина,эритромицина, нистатина. Кроме того,этот антибиотиковый коктейль по сравнению с другими использовавшимисяантибактериальными препаратами взначительно меньшей степени подавляетрост и размножение в кишечнике молочнокислых бактерий,П р и м е р 4. Больной В., 3 летс хрониосепсисом, в течение 2 лет лечился по поводу стафилококковой инфекции различными антибактериальнымипрепаратами: ампициллин, гентамицин,оксациллин, фузидин, линкомицин, Несмотря на это, у больного отмечалисьпериодические подъемы температуры,дисфункция кищчника, пиурия. Ребенок не набирал в весе. При обследовании на дисбактериоз в кишечнике6количество лактобактерий составляло (10, а бифидобактерий - ( 10 микробных тел на 1 г исследуемого материала. В кишечнике доминировали стафилококки. Произведен подбор антибактериальных препаратов для СД на животных. Наиболее эффективным по данным опыта является сочетание ристомицина и нистатина. У больного в результате СД ристомицином в течение5 дней удалось добиться снижения содержания стафилококка в кишечникеl 41191более чем в 10 4 раз. Количестволактобактерий, наоборот, повысилосьдо 10 кл/г, бифидобактерий - до510 кл/г. Рецидива заболевания в последующие 6 мес не было.Использование способа позволяетболее точно подбирать антибиотики дляиндивидуального лечения больных детей. Формула изобретения Способ определения чувствительности микрофлоры кишечника к антибакте-"риальным.препаратам, включающий определение исходного состава микрофлорыисследуемого материала,контактирование его с антибактериальными препаратами, инкубирование посевов и учетрезультатов, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения точностиспособа за счет выявления одновременного влияния антибактериальных препа 2 б ратов на всю кишечную микрофлору, исследуемый материал, представляющийдекантат испражнений в растворе Хэнкса, в количестве 0,2 - 0,3 мл однократно интрагастрально вводят безбактериальным мышам, через 20-30 ч вводят антибактериальные препараты, затем высевают содержимое кишечника животных, после инкубирования посевовисследуют качественный и количественный состав микрофлоры и по его изме- ЗБ нению по сравнению с исходным определяют чувствительность микрофлоры кантибактериальным препаратам.