Способ дифференциальной диагностики затяжной и циклической форм вирусного гепатита

, 127 ГОСУДАРСТВЕННЫИ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ЕТЕНИЯ ПИСАНИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ етельство СССРВ 1 О/00, 07.06.82.(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЪДИАГНОСТИКИ ЗАТЯЖНОЙ И ЦИКЧЕСКОЙ ФОРМ ВИРУСНОГО ГЕПТА В(57) Изобретение оЦель изобретения НОЙ ЛИ АТИ тносится к меди- ранняя диагнос ице. ика.(56) Авторское сви234300, кл. А 6145цинский институт . М. Векслер, Р. Г. Чар(51) 4 А 61 К 39 00, 6 01 М,.33 49 И, 5 мл вецозцой крови больного вирусным гепатитом В на 5 - 15 день болезни в градиенте фиколлвериграфин выделяют мононуклеары. Готовят раствор свежих эритроцитов барана. Смешивают равные объемы мононуклеаров и эритроцитов барана, инкубируют в течение 25 - 35 мин. Затем подсчитывают число стабильных розеткообразуюгцих моноцуклеаров и при их отсутствии или при наличии 1 - 92 кл/мл диагностируют затяжную форму вирусного гепатита В, а при их содержании 153 - 464 кл/мл - циклическую форму. Если количество стабильных розеткообразуюгцих моцонуклеаров не входит ни в олин интервал, необходимо повторить это исследование.Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии, и касается диагностики ВГВ, а именно затяжной формы в острой стадии вирусного гепатита В (ВГВ).Целью изобретения является ранняя диагностика.Способ осуществляют следующим образом.Из 5 мл гепаринизированной венозной крови больного БГВ на 5 в 5 день болезни в градиенте фиколлверигряфин выделяют мооцуклеары. Готовят раствор свежих эритроцитов барана и смешивают равные об ьемы мононуклеаров и эритроцитов барана, пцкубируют при 36 - 38 С в течение 25 - 35 мин, затем подсчитывают число образовавшихся розеток, т, е. число стабильных розсткообразующих мононуклеаров и при их , гл гтвин цли наличии 1 - 92 кл/мл ставят диагноз затяжной формы ВГВ, а при их количестве 153 - -464 кл/мл ставят цикличеку(о форму ВГВ.ри,пер . Больной Г 1, на основании об;цспринятых клинико-эпидемиологических ц серологических обнаружен НВэА(т в сыворотке крови) данных был установлен диаг:(оз острого вирусного гепатита В на 6-ой день болезни, в этот день были сделаны исслдоцация сыворотки крови на выявление ссцспбилизяции лимфоцитов к,1 Г 1 Ч, она равнялась 10,5%, активность ЛлАТ была 3.9 д. Ни по спсибилизации лимфоцитов к Г 11 Ч, ни по активности ЛлАТ отдифферснцировать затяжную или циклическую форму нпредставлялось возможным, только по оному способу на 6-й день болезни в результате того, что Е-РОК стабильные отсутствовали в сыворотке крови, можно предположить, что будет затяжная форма. Это подтверждено спустя 8 недель, когда активность АлАТ не нормализовалась 4,8 ед.) и дальнейшее наблюдение за этим больным спустя 1 год), где в биоптате печени, а именно перппортальная инфильтрация, пссвдодолькк указывают ца наличие у этого больно(о ХЛГ с переходом в цирроз.ример 2. Больной В. ца основании об(цепринятых клинико-эпидемиологических и серологических НВвАд в сыворотке крови) данных установлен диагноз острого БГБ на 5-й день болезни, В этот же день сделаны исследования сыворотки крови на выявление сецсцбилизации к ЛПЧ лимфоцитов, оца равнялась 11%, активность АлАТ 11,0 ед. Г 1 о известным способам на 5-й день болезни отдпфференцировать затяжную от циклической формы ВГВ не представлялось возможным. По предлагаемому способу на 5-й день болезни в результате того, что количество Е-РОК стабильных 92 кл/мл предположи.(и о наличии затяжной формы ВГВ. Это подтверждено спустя 8 недель по активности ЛлЛТ, равной 6,45 ед. при норме 0,8 - -0,77), выздоровление у этого больного наступило спустя 10 недель от начала заболевания.5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 С целью отработки оптимального времени инкубации и температурного режима поставили несколько опылгов по определению количества Е-РОК стабильных. При 36 С со времени инкубации 35 мин Е-РОК стабильных 6% на 100 лимфоцитов больного, количество лимфоцитов у больного 1525 в 1 мл крови. Е-РОК стаб. в абсолютных числах 92 кл/мл.При 38"С и времени инкубации 25 мцн Е-РОК стабильных также 6%, т. е. их число не изменялось, в результате их было 92 кл/мл.При 40 С и времени инкубации 40 мин Е-.РОК стабильных не обнаружено, т. е. произошел распад розеток, таким образом при этом режиме этот метод не работает.При 30 С и времени инкубацип 20 миц Е-РОК стабильных 8%, а в абсолютных числах это 122 кл/мл.Таким образом, это уже не затяжная форма и анализы надо повторять до 15 дня болезни. Пониженцтемпературы и укорочение времени ведет к неспсцифическому увеличению субпопуляции лимфоцитов за счет общей популяции Т-клеток, которая сохраняет способнссть образовывать розетки при более низкой температуре.77 ример д. Больная К. ца осцовации общепринятых клинико-биохимических и си- логических 1 НВвЛд в сыворотккрови) данных установлен диагноз острогВ 13 на 8-й день болезни. Б этот же день сделаны исследования сыворогки крови на выявлсцис сенсибилизации к 1 Г 1 лимфоцитов, оня равнялась 3%, активность ЛлЛТ - 7.4 д. По известным способам на 5-й день болезни отдифференцировать затяжную ат циклич- ской формы БГБ не предст(вля;(ось возможным. По предлагаемому способу ца 8-й день болезни в рзультяте (ого, ч(х, количество Е-РОК стабильных 155 кл/мл ц прд- . полагают наличие циклической формы БГБ. Это подтверждено спустя 8 нсд 1 ь цо активности ЛлЛТ равной 0,8 д. (прц норме 0.8 0,47), выздоровление у этой больнои цяс.(упило на 8-й неделе забояваия.С целью отработки оптимального вре цч(и инкубациц и температурного р( жима (;оставили несколько опытов цо оцредслнцю Е-РОК стабильных. При 36 С ицкубации 35 мин. Е-РОК стабильных 4% ца 100 лимфоцитов, количество лимфоцитов вмл крови 3840. Е-РОК стаоильных в абсогпотцых числах 155 кл/млПри 38 С и времени ицкхбации 25 миц Е-РОК стабильных 4%, т. е. их числнизменялось, 55 кл,мл. 11 ри 40-С и врмеци инкубации 40 миц Е-РОК стабильных не обнаружено, т. с. (роизоц(ел распад розеток, таким образом, при этом режиме этот метод не работает. При 30 С и времени инкубацпц 20 мин Е-РОК стабильных 8%, что составило в абсолютных числах 307,2 кл/мл.Таким образом изменение режима тмпературы и инкубации ведет к неспецифичсскому распаду или увеличению, т. еля1274690 Фор,)гу га ггзг)оретени,г Составитель 11. БонарцевТсхред И. Берег Корректор 3. КолбТираж 660 11 одписносВНИИГИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 415филиал ППП Патент;. г. Ужгород, ул. Проектная, 4 1 зедактор С. ПатрушеваЗаказ 650713 ность и специфичность метода резко снижается.В процессе разработки способа диагностики затяжной формы ВГА на .5 - 15 день болезки выявлены специфические особенности.При разработке температуры инкубапци оказалось, что 36 - -38 С является оптимальной температурой, при которой наиболее четко различаются показатели стабильных Е-РОК при затяжной и циклической формах 1 ВГВ, При более низкой температуре их количество увеличивается за счет обшей субпопуляции Т-клеток и выявить интервал - различие между формами ВГВ не удается, а при более высокой температуре идет не- специфическое разрушение Е-РОК. 15При разработке времени ицкубацци оказалось, что 25 - 35 миц является о 1;ти;)альным сроком, при котором наиболее четко различаются показатели стабильных Е-РОК при затяжной и циклических формах ВГВ. При уменьшении времени инкубпни или увеличении эти различия нивелируются.Только при соблюдении времени ицкубации 2535 миц и температуры инкубпни 3638 С могут быть получены те интсрвлы количества термостабильных Е-РОК, т. с. цх 25 отсутствие или количество 1 - 92 кл/мл кроВи, которы). цозВОл 51 Ог ВыяВить затя жн 11) форму ВГВ уже на 5 - 15 день болезни, прц количестве стабильных Е-РОК 153 464 кл/мл можно констатировать циклическую форму ВГВ.Если количество стабильных Е-РОК не входит ни в один интервал, необходимо в течение 5- -15 дней болезни повторять это исследование и, если цх количество будет 53 - 464 кл/мл, то это циклическая форма, если она отсутствует цлц 1- - 92 к,)/мл затяжная форма острого вирусного гепатита В. Способ дифференциальной диагностики затяжной и циклической форм вирусного гепатита путем Опредс,)ения розеткОоб 1 з 11- зуюших лцмфоццтов больного при цнкубаПии цх с эритроцитами баран,1)тлггчагоииггея тсм, что, с цклью ранней диагностики, ца 1 -15 день болезни инкубрук)т лимфопиты с эритроп)ггамц барана пр 3638 С в течение 2535 миц. определяют число терм остаб ильи ы х розсткообразую)них клеток и при цх отсутсгвии цли при наличии 1- - 92 к;1/мл крс)ви,1 цагностнрук)т .11)т 51 жц 1 О форму вирусного гепатита В, а прц количестве 153 в 464 кл/мл - циклическую форму вирусного генг)гнт Б.