Способ определения антител разных классов иммуноглобулинов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 801274689 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Киргизский государственный медицинский институт(56) Камфорин Л. Е. Иммуноферментныйметод. В кн.: Современные методы иммунологической диагностики вирусных инфекций.Обзорная информация ВНИИМИ. Сер.:Эпидемиология и инфекционные болезни.981,4, с. 30 - 36.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ РАЗ НЫХ КЛАССОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ(57) Изобретение относится к медицине и может бь 1 ть применено для количественного(5) 4 А 61 К 39/00) 01 (х 1 33 558 определения специфических антител, относящихся к разным классам иммуноглобулинов. Цель изобретения - упрощение способа путем инкубации сыворотки со специфическим антигеном с последующим определением концентрации иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в этой интактной сыворотке. Для этого исследуемую сыворотку крови делят на две пробы, одну из них инкубируют в лунках микрокамер для иммунологических реакций с высушенным на их стенках корпускулярным антигеном. Затем в пробах сыворотки определяют концентрацию иммуноглобулинов б, М, А методом радиальной иммунодиффузии. По разнице содержания иммуноглобулинов в интактной и смешанной с антигеном пробах судят о концентрации специфически антител разных классов в исследуемой сыворотке,1274689 формула изобретения А М Сз Составитель М. Васильев Техред И. Верес Корректор 1. Колб Тираж 660 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 1 3035, Москва, Ж - 35, Гаушская наб., д. 4/5 Филиал ПГ/П Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Редактор С. ПатрушеваЗаказ 6507/3 Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественного определения специфических антител, относящихся к разным классам иммуцоглобулинов.Цель изобретения - упрощение способа путем инкубации сыворотки со специфическим а 1 тигеном с последующим определением концентрации иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии в этой и интактной сыворотке.Способ осуществляется следующим образом.Исследуемую сыворотку крови делят на две пробы, одну из которых инкубируют в лунках микрокамер для иммунологических реакций с высушенным на ее стенках корпускулярным антигеном. Затем в обеих пробах сыворотки определяют концентрацию иммуноглобулинов Сз, М, А методом радиальной иммунодиффузии.По разнице содержания иммуноглобулицов в интактной и сме 1 панной с антигеном пробах судят о концентрации специфических антител разных классов в исследуемой сыворотке.Пример 1. Больная Г поступила в отделение туберкулеза 16.10.84 г.; кровь взята ца анализ 23.10.84 г,Сыворотку крови разделили на две части и развели изотоническим раствором хлористого натрия для определения количества иммуцоглобулинов А в соотношении 1:2; иммуцоглобулинов Сз 1:5; для определения иммуцоглобулинов М была взята неразведенная сыворотка. Затем поместили эту сыворотку в микрокамеры для иммунологических реакций, на стенках которых была пред - варительно высушена вакцина БЦЖ в разведении 1:8 при 56 С в течение 30 миц (опыт). Контрольную сыворотку инкубировали в камерах без БЦЖ. Сыворотку инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин, после чего поместили ее в лунки, проделанные в агаре, смеп 1 ацном со специфической антисывороткой против иммуноглобулинов классов А, М, Ст соответственно. Чашки Петри помещали во влажную камеру и инкубировали при 4 С в течение 24 ч, для определения иммуноглобулинов классов А и б; и 48 ч для определения иммуцоглобу. лицов класса М. Диаметр преципитата измеряли с помощью окуляр-микрометра /микроскоп МБС),Результаты измерения:Контроль4,32,84,5 По калибровочной кривой определялисодержание иммуноглобулинов, г/л:Контрольная проба А 19,2М 3,76 42,0Опытная проба А 17,6М 2,3Сз 37,5Результат реакции. Содержание антител в сыворотке крови данной больной равно, 10 г/л; А 1,6;М 1,4;64,5.Пример 2. Больной К. поступил в отделение туберкулеза 18 Л)7.85; кровь взята на анализ 18.07.85 г. Сыворотку крови разделили на две частии развели изотоническим раствором хлористого натрия в указанных соотношениях.Затем поместили эту сыворотку в микрокамеры для иммунологических реакций, на стенках которых была предварительно высушена стафилококковая вакцина в разведении 1:4 при 56 С в течение 30 мин (опыт). Дальнейший ход реакции гца.логичен описанному.Результаты измерения диаметра преципитата:Контроль Опыт25 А 4,1 2,8М 2,45 2,26 4,2 4,0По калибровочной кривой определяли содержание иммуноглобулиновКонтрольная проба, г/л: А 7,9; М 2,35;С 1 17,75.Опытная проба, г/л: А 7,5; М 1,58; 1 з 13,75.Результат реакции. Содержание противостафилококковых антител в сыворотке крови данного больного равно, г/л: А 0,4, М 0,77, Сз 4,0.35 Способ определения антител разныхклассов иммуноглобулицов путем добавления сыворотки, содержащей антитела, к соответствующему ацтигену с последующим инкубированием, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, перед добавлением сыворотку делят на две пробы, к од цой из которых добавляют соответствующийантиген, а после инкубации в обеих пробах определяют содержание иммуцоглобулинов классов 1 д, М и А в реакции радиальной иммуцодиффузии, сравнивают их концентрации и определяют антитела разных клас сов иммуцог.Обулинив в исследуемой сыворотке по разнице содержания иммуноглобулинов.