Способ определения продигиозана

СОЮЗ СОВЕТСКИХсоцИАлистическихРЕСПУБЛИК 19) (И) 1)4 А 61 К 31 КОМИТЕТ СССРНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОСУДАРСТВЕКНЫ ПО ДЕЛАМ ИЗОБР АНИЕ ИЗОБРЕТЕ 44а Л на инс я врачеи и Всовательский Б о Л,И., Э.Т. Ант 10-413. ва 54) 57) ПОСОБ ОПРЕ зобретение ель изобрет ительности ртный раст не. Ц чувст ст анд АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Центральный ордетут усовершенствованисоюзный научно-исслединститут фармации(56) Щедрина Л.Е., БРастунова Г.А., Щерббиотики. 1984, т. 29 ЕЛЕНИЯ ПРОДИГИОЗАНА относится к медициния - увеличение способа. Готовят ор. 0,01 г порошка продигиозана помещают в мерную колбувместимостью 50 мл, растворяют в40 мл нагретого до 90 С 0,97-ногораствора хлорида натрия. После охлаждения раствора его объем доводят темже растворителем до метки. В пробирку вносят 0,2 мл 0,037-ного раствора1 И.-триптофана, 1,3 мл приготовленного раствора и 5 мл концентрированнойсерной кислоты. Затем готовят исследуемый раствор. В пробирку вносят0,037 ПТ,-триптофана, 1,3 мл 0,027,-ного раствора продигиозана и 5 мл концентрированной серной кислоты, Приготовленные растворы встряхивают, нагревают в течение 5 мин. После охлаждения растворов проводят количественное определение продигиозана на спектрофотометре при 1 , = 320 нм. 2 ил.1 12731Изобретение относится к фармации,а именно к способам количественногоопределения бактериальных липополисахаридов, применяемых в медицине вкачестве лекарственных препаратов.Цель изобретения - увеличениечувствительности способа путем предварительной обработки раствора продигиозана триптофаном в присутствииконцентрированной серной кислоты при Онагревании,Способ осуществляется следующимобразом.Определение содержания продигиозана начинают с пригс говления 0,037-ного водного раствора Ш-триптофана.С этой целью 0,015 г порошка И,-триптофана (точная навеска) вводят в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 40 мл нагретой до 90 С дистиллированной воде, после охлажденияраствора до комнатной температурыего объем доводят тем же растворителем до метки.Затем приготавливают стандартный 25и исследуемый растворы. Приготовление стандартного раствора: 0,01 гпорошка продигиозана (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 40 мл нагретого до 90 С 0,97-ного растворанатрия хлорида, после охлаждения раствора до комнатной температуры егообъем доводят тем же растворителемдо метки. Далее в пробирку вносят 350,2 мл 0,037-ного раствора БЕ-триптофана, 1,3 мл приготовленного раствора и 5 мл концентрированной серной кислоты. Приготовление испьггуемого раствора: в пробирку вводят 400,2 мл 0,037-ного раствора 1 Ц -триптофана, 1,3 мл испытуемого 0,02 Е-ного раствора продигиозана и 5 мл концентрированной серной кислоты. Всерастворы готовят в пяти повторностях. 45Приготовленные растворы встряхивают,нагревают на кипящей водяной бане втечение не менее 5 мин, по охлаждении растворов до комнатной температуры проводят количественное определение продигиозана на спектрофотометре СФпри, 320 нм в кюветахс толщиной рабочего слоя 1 см. Раствором сравнения служит раствор, содержащий 0,2 мл 0,037-ного раствора 55Ж-триптофана, 1,3 мл 0,97-ного раствора натрия хлорида и 5 мл концентриоованной серной кислоты, 10 2Содержание препарата рассчитывают по формуле П,ссл. 4 1 О 5 стсодержание препарата,г/мл;оптическая плотность исгде Х В иссл следуемого раствора;Р - оптическая плотностьстандартного раствора;4 10- содержание продигиозанав 1 мл стандартного раствора;5 - разведение исследуемогораствора.Содержание продигиозана в исследуемых 0,027-ных растворах составляет 1,899.10- 2075.10 " г/мл, что соответствует 0,019-0,0217.Результаты количественного спектрофотометрического определения продигиозана в 0,027-ных растворах: Взято г/мл2.10 2.10 2.10 2.10 2.10 Получено, г/мл2,075.101,975.101,901. 1 О1,899. 101,955.10 Предлагаемый способ характеризуется большей (в 5 раз) чувствительностью в сравнении с известным, так как количественное определение продигиозана проводится по компоненту молекулы продигиозана - комплексу полисахарида и липида А, ответственному за терапевтический эффект препарата, в отличие отизвестного способа, согласно которому определение проводят по нуклеиновой кислоте, не связанной с лечебным действием. Способ позволяет сократить расход препарата, необходимого для проведения анализа, в 5 раз.Построение калибровочной кривой.В ряд пробирок добавляют по 0,2 мл 0,037.-ного рас.твора 31.-триптофана, по 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 мл приготовленного раствора продигиозана, соответственно по 1,2; 1,1; 1,0; 0,9;0,8 мл 0,97.-ного раствора натрия хлорида. Во все пробирки добавляют по 5 мл концентрированной серной кислоты. Все пробирки встряхивают и нагревают на кипящей водяной бане в течение не менее 5 мин. После охлаждения растворов до комнатной температуры