Способ определения количества биологически полноценных спермиев в замороженной дозе спермы

= - 1 ООА, 5 активных сп П де иев количествозе, млн;концентрацтивной спеактивностьоттаяннойкислого нат я спермиев в 1 млмы, млрд/мл;пермиев в дозе сперприсутствии лимория, баллы. наГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ИСАНИЕ ИЗО(56) Методические рекомендации по селекции и воспроизводству крупного рогатогоскота. - Киев, 1980, разд. 32, с. 185 в 1.(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА БИОЛОГИЧЕСКИ ПОЛНОЦЕННЫХ СПЕРМИЕВ В ЗАМОРОЖЕННОЙДОЗЕ СПЕРМЫ, предусматривающий оттаивание дозы спермы в присутствии лимоннокислого натрия, оценку активности спермиев в баллах с последующим расчетом количества биологически полноценных спер ев, отличающийся тем, что, с целью по шения точности определения, дополнител оттаивают дозу замороженной спермы в тивном состоянии, определение конце рации спермиев осуществляют в оттаян дополнительной дозе, а расчет биологич ки полноценных спермиев осуществляют формуле1232247 где П -100 Таблица 1 Количест- Отношево образ-.ние к цов спер-.общему мы+ количеству образцов, Е 110110 пп 3,6+О, 15 3, 7+О, 19 3, 3+О, 17 7,1 - 9,6 9, 7-12, 212, 3-14,6 36,7 18 12,3 30,6 3 15 Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, а именно к способам оценки качества замороженной спермы.Цель изобретения - повышение точности определения.Способ осуществляется следующим образом.Подготавливают водяную баню с температурой воды 40 - 42 С. В чистый стерильный пенициллиновый флакон наливают 1 мл 2,8 - 3,0%-ного раствора лимоннокислого натрия. Флакон с раствором помещают в водяную баню на 2 - 3 мин с таким расчетом, чтобы раствор во флаконе нагрелся до 40 - 42 С, Во флакон переносят гранулу замороженной спермы объемом 0,2 мл, оттаивают ее по общепринятому способу.Оценивают активность (А) спермиев под микроскопом, выявляя процент активных спермиев. Берут вторую гранулу этой же партии спермы и оттаивают при комнатной температуре в пенициллиновом флаконе без лимоннокислого натрия. В грануле спермы, оттаянной без лимоннокислого натрия, определяют концентрацию (С) спермиев, Количество активных спермиев с прямолинейно- поступательным движением в дозе (грануле) для осеменения коров определяют по фор- муле П = - 100 А,количество активных спермиев в дозе (грануле) для осеменения коровы, млн;концентрация спермиев в 1 мл разбавленной спермы, млрд/мл;активность спермиев в грануле оттаянной спермы, баллы;постоянное число, поскольку из 1 мл разбавленной спермы приготавливают 5 гранул замороженной спермы объемом по 0,02 мл (1:0,2= 5);постоянное число, необходимое для выражения значения П в миллионах. Предлагаемым способом проводили определение количества биологически активныхспермиев в замороженной дозе спермы дляосеменения коров в отделе воспроизводствас/х животных,Полученные экспериментальные данныепредставлены в табл. 1.Как видно из табл. 1, из 49 образцовисследованных доз спермы, предназначеннойк использованию для осеменения коров и те 10 лок в производственных условиях, установлены значительные отклонения по количеству активных спермиев в дозе. Судя порезультатам оценки спермы известным способом (активность) определения пригодностиспермы, все исследованные образцы можно применять для осеменения самок. Однакопо количеству активных спермиев в гранулетолько 63,3% образцов спермы отвечают требованиям, предъявляемым действующей инструкцией,В табл. 2 представлены сравнительныеданные по определению количества биологически полноценных спермиев в замороженной дозе спермы предлагаемым и известным способами (в миллионах),Как видно из табл. 2, известный спо 25 соб в среднем показал количество активных спермиев в дозе замороженной спермы14,79 млн, предлагаемый - 21,20 млн. Таким образом, известный способ занижает количество активных спермиев в дозе в среднем на 30,3%, т.е. он является недостоверным. Причиной этому является тот факт, что в известном способе не учиты.вается степень разбавления спермы при ее оттаивании в 2,9%-ном растворе лимонно- кислого натрия,35 При этом в среднем на один анализ(табл. 2) известным способом уходит 7,16 мин, предлагаемым - 1,31 мин, т.е. в 5,5 раза затрачивается меньше времени. Кро ме того, при подсчете известный способ насчитывает 8 математических операций, предлагаемый - 4. Количество Средняяактивных активностьспермиев спермиев,в дозе, баллымлн1232247 Продолжение табл. 1 ОтношеСредняяактивность Количествоактивных У 9 Количестпп во образспермиевв дозе,млн цов спермы спермиев,баллы 14,9-17,4 17,5-20,0 3,4+0,18 3,1+0,17 14,3 6,1 Всего использовано 49 образцов спермы,Таблица 2 Предлагаемый способ Известный способ ОбраВремя на Количество математиКоличество активных спермиев в зец одно определение,мин озе,млн озе,1,70 15,0,16 Составитель Т. ПолТехред И. ВересТираж 660И Государственного комитделам изобретений и оп косква, Ж - 35, РаушскаяПатент, г. Ужгород, ул едактор Е. Папп аказ 2492/5 ВНИИПКоличество активных спермиев в Время на одно определение,мин ние кобщемуколичеству образцов, 7 ческих операций для одного под- счета янскаяКорректор Т.Подписноеета СССРрытийна 6., д. 4/5Проектная, 4 Количествоматематических операций дляодного подсчета