Способ количественного определения цистеина

". -аналиХимия",тическои хи 1979, с. 31 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ПИСАНИЕ ИЗОБР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(7 1) Запорожский медицинский институт(56) 1. Сиггиа С., Ханна Дис.Г, Количественный органический анализ поюв 11функциональным группам. М., Химия1983, с. 540-541.2. Коренман И,М. Фотометрическийанализ. Методы определения органических соединений. М., "Химия", 1975,с, 291 (прототип).3. Лурье Ю.10, Справочник помии. Изд. 5-е. М.,2(54) (57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТЕИНА путем обработки анализируемой пробы цветореагентом с последующим фотометрированием-полученного раствора о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения чувСтвительности и сокращения длительностиопределения, в качестве цветореагента используют раствор Й в хл,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в среде универсальногобуферного раствора с рН 9,0.Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения цистеина1-амино-меркаптопропионовой кислоты, применяемого в медицинской практике 5 для задержки развития катаракты и просветления хрусталика глаза.Известен способ количественногоопределения цистеина потенциометрическим титрованием с серебряно-сульфидным электродом в 0,1 М растворегидроксида натрия И .Недостатком способа является низкая чувствительность (12 мкг),Наиболее близким к изобретению по 15технической сущности и достигаемомурезультату является способ количественного определения цистеина, заключающийся в обработке анализируемойпробы 0,5 мл 0,02 И раствора тетрахлорпалладата аммония в 1 н, хлористоводородной кислоте с последующимизмерением (через 1 ч) величины оптической плотности при 350 нм 2,Недостатками способа являются относительно невысокая чувствительность(2.,33 мкг/мл) и большая продолжительность анализа (более 1 ч).Целью изобретения является повышение чувствительности и сокращение Зодлительности определения,Поставленная цель достигается тем,что согласно способу количественногоопределения цистеина путем обработкианализируемой пробы раствором 0-хлор 35-1,4-бензохинонимина в изопропаноле всреде универсального буферного раствора с рН 9,0 и последующим фотометрпрованием полученного раствора, вкачестве цветореагента раствора И-хлор,4-бензохинонимина в изопропаноле и обработку ведут в средеуниверсального буферного раствора срн 9,0,Универсальный буферный растворописан в 3 .П р и м е р. Количественное опре"еление цистеина в субстанции. Навеску цистеина в пределах 0,015-0,025 грастворяют в воде в мерной колбе 50вместимостью 200 мл и доводят до мет-ки тем же растворителем. 2 мл полученного раствора помещают в мернуюколбу вместимостью 25 мл, прибавляют3 мл О, 1 Е-ного раствора Ю-хлор,4" 55-бензохинонимина в изопропаноле идоводят до метки универсальным буфер"ным раствором с рН 9,0. Параллельнопроводят опыт со стандартным раство. ром цистеина и контролем. Через 15 мин измеряют оптическую плотность анализируемых растворов на фоне контроля при помощи спектрофотометра при 423 нм в кюветах с толщиной слоя 1 см.Расчет количественного содержания цистеина проводят по формуле0 2500 СоС о = угде Р - оптическая плотность анализируемого раствора,9 - оптическая плотность станодартного спектрофотометрируемого раствораС - концентрация стандартногоспектрофотометрируемогораствора (0,0008 г в 100 мл);р - навеска, г1 - толщина слоя, см.Результаты количественного определения цистеина в субстанции приведены в табл.1. Таблица 1 Навеска,г Найдено,7 Метрологичес-:кие характе- ристики 0,0187 х=99,49 98,97 8=0,4313Б=0,0043 99,02 99,49 0,0220 0,0188 0,0200 0,0214 99,64100, 10 0,0209 99,70 Сравнительная характеристика предлагаемого способа и известного приведены в табл.2. Таблица 2 Характеризуемыпоказатель Способ звест- Предлагае- ый Чувствительность, мкг/мл 2,33 0,71 Продолжительность анализа, мин 601168834 Составитель С.ХованскаяРедактор А.Шандор Техред Д.Микещ Корректор М.Самборская Заказ 4608/37 Тираж 897 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д.45 Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 Как видно из табл.2, величина чувствительности данного способа выше, чем у известного более чем в 3 раза. По технике выполнения данный способ требует в 4 раза меньших временных затрат на проведение анализа,