Способ получения ферментного препарата мацерирующего действия
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК С 12 1 ч 91 НОМИТЕТ СССРЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ГОСУДАРСТВЕНН ПО ДЕЛАМ ИЗОБ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН К АВТОРСК СВИДЕТЕЛЬСТВ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРАТА МАЦЕРИРУ 1 О В(72) А. Г. Лобанок, Н. Я. Борисевич, Г.В. Жук и Б-Э. А. Маламене (71) Институт микробиологии АН Белорусской ССР(56) Авторское свидетельство СССР622838, кл. С 12 М 9/00, 1977.2. Бравова Г. Б., Калунянц К. А.,Самойлова М. В. Получение технических и очищенных ферментных препаратов из концентратов глубинной культуры с 1 оз 1 ги 11- шп ресИпо 1 егвеп 1 апе. - Микробиологическая промышленность, 1980, вып. 4, с. 12.(54) (57) СПОСОБМЕНТНОГО ПРЕПАР 80115433 ЩЕГО ДЕ ЯСТВИЯ, заключающийся в выращивании микроорганизма-продуцента на жидкой питательной среде, отделении биомассы, концентрировании культуральной жидкости, добавлении к концентрату наполнителя и высушивании его в вакууме, отличающийся тем, что, с целью снижения потерь пектинтрансэлиминазной активности ферментного препарата и упрощения технологического процесса его получения, к культуральной жидкости после отделения биомассы добавляют хлористый кальций в качестве стабилизатора в количестве 0,0008 - 0,001%, культуральную жидкость концентрируют в 30 - 50 раз, а в качестве наполнителя при сушке концентрата используют смесь измельченного свекловичного жома и древесных опилок в соотношении 1:1 из расчета 500 г на 1 л концентрата культуральной жидкости.Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способам получения ферментных препаратов, мацерирующих лубоволокнистые растения, и может быть использовано в промышленности первичной обработки льносоломы и в сельской хозяйстве.Известен способ получения пектолитического ферментного препарата, обладающего способностью мацерировать стебли льносоломы, заключающийся в культивировании продуцента на жидкой питательной среде, отделении биомассы центрифугированием и концентрировании культуральной жидкости на вакуум-выпарной установке в 1 О - 12 раз. Препарат получают путем осаждения из концентрата этиловым спиртом и высушиванием осадка до порошкообразного состояния при комнатной температуре в воздушной среде 1. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Недостатком способа является использование большого количества (четырехкратный объем по отношению к концентрату) этилового спирта, что требует специальных мер по обеспечению пожаро- и взрывобезопасности и ведет к усложнению технологи-. ческого процесса. Кроме того, в результате измельчения высушенного препарата в окружающую среду выделяется пожаро-и взрывоопасная пыль биологического происхождения.Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получения ферментного препарата, заключающийся в культивировании продуцента на жидкой питательной среде, отделении биомассы, вакуум-выпаривании культуральной жидкости в 7,5 - 10,0 раз, добавлении к концентрату в качестве стабилизатора пектолитических ферментов СаС 1(0,1%) и в качестве наполнителя хлористого натрия (100 О/о к сухим веществам) и высушивании концентрата на распылительной сушилке 12,Недостатком известного способа являются большие потери ферментативной активности во время концентрирования культу- ральной жидкости и сушки полученного концентрата.В частности, при концентрировании культуральной жидкости на установке типа Центритерм в 6 - 7 раз потери пектинтрансэлиминазной активности составляют 17,5/о от исходной активности культуральной жидкости, а при концентрировании в 10 раз - 51,4 О/о. При распылительной сушке 10/о-ного концентрата, полу,ченного при концентрировании культуральной жидкости в 6 - 7 раз, потери пектинтрансэлиминазной активности составляют 13"/о от исходной активности концентрата. Общие потери пектинтрансэлиминазной активности при получении ферментного препарата 30,5/о.Кроме того, при концентрированиикультуральной жидкости лишь в 6 - 7 раз приходится высушивать большие объемыконцентрата, что снижает экономику процесса, а также ведет к образованию большого количества запыленных газовых выбросовЦелью изобретения является снижение потерь пектинтрансэлиминазной активности получаемого ферментного препарата, а также упрощение технологического процесса его получения.Поставленная цель достигается тем, чтопри способе получения ферментного препарата мацерирующего действия, заключающемся в выращивании микроорганизма-продуцента на жидкой питательной среде, отделении биомассы, концентрировании культуральной жидкости, добавлении к концентрату наполнителя и высушивании его в вакууме, к культуральной жидкости после отделения биомассы добавляют хлористый кальций в качестве стабилизатора в количестве 0,0008 в ,001/о, культуральную жидкость концентрируют в 30 - 50 раз, а в качестве наполнителя при сушке концентрата используют смесь измельченного свекловичного жома и древесных опилок в соотношении 1:1 из расчета 500 г на 1 л. концентрата культуральной жидкости,После отделения биомассы к культуральной жидкости добавляют в качестве стабилизатора пектинтрансэлиминазы (ПТЭ) хлористый кальций (0,0008 - 0,001/о), что позволяет концентрировать культуральную жидкость в более высокой степени с небольшими потерями пектинтрансэлиминазной активности. В свою очередь, значительное уменьшение объема концентрата при сохранении на 96 - 98 О/О пектинтрансэлиминазной активности позволяет после смешивания его с соответствующим наполнителем высушить препарат в вакууме при комнатной температуре.Пример 1. На водопроводной воде готовят питательную среду следующего состава,/,: К,НРО 0,7; КНРО 4 0,2; (ХН ,),Ю 0,1; МфО 0,02, экстракт свекловичного жома в количестве, соответствующем 0,5 О/О пектиновых веществ; рН среды 7,2 - 7,4. Среду стерилизуют при 0,75 атм в течение 30 мин, охлаждают до 25 - 28 С и засевают суточной культурой бактерий ЕгМп 1 а саго 1 очога МЛ - 1 в количестве 1 О/О. Продуцент выращивают в литровых колбах Эрленмейера с 250 мл среды на качалке (160 - 180 об/мин) в течение 17 - 19 ч при 28 - 30 С. После окончания процесса выращивания культуральную жидкость центрифугируют 30 мин при 5 - 6 тыс.об/мин для отделения биомассы. За ге, в культуральной жидкости1154330 Составитель Е. Воробьева Техред И. Верес Корректор М. Максимишинец Тираж 525 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП сПатент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Редактор О. Юрковецкая Заказ 2633/24 определяют пектинтрансэлиминазную активность спектрофотометрически, по изменению поглощения при А,дв 235 нм реакционной смеси следующего состава:0,2/ю полипектата натрия, 1,6 10 4МСаСЕа, 0,1 мл раствора фермента всоответствующем разведении, 0,05 Мтрис-НС и буфер рН 8,5 до 3 мл. За единицу активности пектинтрансэлиминазы принято количество фермента, вызывающее изменение абсорбции данной реакционнойсмеси на 0,1 за 10 мин при 30 С,Пектинтрансэлиминазную активностьв сухом препарате определяют методом.Для определения активности используют1 /ю-ный раствор препарата в дистиллированной воде.Активность пектинтрансэлиминазы вкультуральной жидкости составляет 720 ед/мл.В культуральную жидкость добавляютхлористый кальций в количестве 0,0008 ю/юи концентрируют на роторной вакуум-выпарной установке ИРпри 39-40 Св 30, 40, 45, 50 раз. При концентрированиикультуральной жидкости в 30 раз потерипектинтрансэлиминазной активности составляют 2 ю/ю,в 40 раз - 2 ю/ю, в 45 раз - 2,5 ю/ю,в 50 раз - 3/юПо 100 мл полученных концентратовсмешивают с наполнителем из расчета500 г на 1 л. В качестве наполнителя используют смесь измельченного свекловичного жома и древесных. опилок в соотношении 1:1. Смесь высушивают в вакуумномшкафу при комнатной температуре (22 -25 С) до влажности 8 - 10 ю/юПри высушивании культуральной жидкости, сконцентрированной в 30 раз, потери пектинтрансэлиминазной активностисоставляют 10 ю/ю, в 40 раз - 9 ю/ю, в 45 раз -9 ю/ю, в 50 раз - 12% Для оценки мацерирующей способности препарата 100 г льносоломы заливают 1 л водопроводнои воды и добавляют 0,8 - 140 ферментного препарата, полученного предлагаемым способом. В контрольном варианте мочку льносоломы проводят в регенерированной мочильной жидкости,Время вымочки льносоломы в контрольных вариантах 20 - 22 ч, а в вариантах с ферментным препаратом 12 - 14 ч.Пример 2. Питательную среду засевают продуцентом маце рирующих ферментов Рзеидогпопаз зр. В культуральную жидкость вносят хлористый кальций в количестве 0,001 ю/ю. Активность пектинтрансэлиминазы в культуральной жидкости 860 ед/мл.Высушивают по 250 мл концентратов. Остальное так же, как в примере 1.При концентрировании культуральной жидкости в 30 раз потери пектинтрансэлиминаз ной активности составляют 2 ю/ю, в 40 раз - 3,5% в 45 раз - 3,5/ю, в 50 раз - 4/ю.При высушивании культуральной жидкости, сконцентрированной в 30 раз, потери пектинтрансэлиминазной активности составляют 11 ю/ в 40 раз - 9 ю/ю, в 45 раз - 12%, в 50 раз - 15 /ю. При высушивании концентратов без внесения наполнителя активность ПТЭ сохраняется лишь на 49 - 52 ю/ю.Предлагаемый способ позволяет сохранить в сухом ферме нтном препарате 81 - 89 ю/ю пектинтрансэлиминазной активности исходной культуральной жидкости. Для получения ферментного препарата не требуется применение распылительной сушилки, органических растворителей этанола, ацетона и др.), не требуется измельчение препарата, а следовательно, в меньшей степени загрязняется окружающая среда и снижается пожаро- и взрывоопасность.Таким образом, предлагаемый способ позволяет снизить потери пектинтрансэлиминазной активности и упростить технологический процесс получения ферментного препарата.
СмотретьЗаявка
3512730, 09.11.1982
ИНСТИТУТ МИКРОБИОЛОГИИ АН БССР
ЛОБАНОК АНАТОЛИЙ ГЕОРГИЕВИЧ, БОРИСЕВИЧ НИКОЛАЙ ЯРОСЛАВОВИЧ, ЖУК ГАЛИНА ВИКТОРОВНА, МАЛАМЕНЕ БИРУТЕ-ЭЛЯНА АНТАНОВНА
МПК / Метки
МПК: C12N 9/14
Метки: действия, мацерирующего, препарата, ферментного
Опубликовано: 07.05.1985
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-1154330-sposob-polucheniya-fermentnogo-preparata-maceriruyushhego-dejjstviya.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения ферментного препарата мацерирующего действия</a>
Предыдущий патент: Способ получения фосфорибулокиназы
Следующий патент: Контейнер для засолки шкур
Случайный патент: Устройство для рентгеноторакометрий ". j. -; , . " на мд