Способ выделения простагландинсинтетазы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1097672
Авторы: Варфоломеев, Демина, Евстигнеева, Мевх, Мягкова, Якушева
Текст
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам выделения простагландинсинтетазы - фермента, используемого для промышленно го синтеза простагландионов. 5Известен способ выделения простагландинсинтетазы из везикулярныхжелез 1 барана путем гомогенизации желез в растворе, отделения ферментсодержащего экстракта, фильтрования отжира и осаждения лимонной кислотойпри рН 4,8-5,0 с последующим отделением осадка фермента 1. 1 3,Однако полученные таким образомпрепараты простагландинсинетазы вусловиях Ферментативного синтезапростагландинов имеют довольно высокую неспецифическую окислительнуюспособность, что приводит к образованию побочных продуктов окисления 20субстрата и не позволяет получатьпростагландины с высоким выходом.Известен способ вьщеления простагландинсинтетазы из везикулярныхжелез барана путем гомогенизации желез в буферном растворе, отделенииФерментсодержащего экстракта, фильтровании от жира и осаждения ферментаиз Фильтрата высокоскоростным центрифугированием ( 105000-130000 в тече- ЗОние 60-90 мин) 1. 2 ,Этот способ позволяет получатьфермент более высокого качества, выход простагландина Е, до 677,Недостатком способа является необходимость использования мощныхвысокоскоростных центрифуг, что делает способ дорогостоящим и низкопроиэводительным, а следовательно практически не пригодным для синтеза 40простагландинов в промышленных условияхЦель изобретения - упрощение процесса.Указанная цель достигается тем, 45что согласно способу выделения нростагландинсинтетазы из везикулярнь 1 хжелез барана путем гомогенизации желез в буферном растворе, отделенияФерментсодержащего экстракта, фильтрования от жира и осаждения Ферментаиз фильтрата осаждение фермента осуществляют с помощью смеси солейхлористого кальция и хлористого магния в концентрации каждая 5-10 мМ,Полученный осадок обычно отделяютцентрифугированием и суспендируютв буфере, используемом для синтезапростагландинов.Полученные описываемым способомпрепараты простагландинсинтетаэыхарактеризуются высоким содержаниембелка, определяемого по Лоури, иудельной оксигеназной активностью,определяемой полярографически по поглощению кислорода в реакционнойсмеси с использованием в качествесубстрата арахидоновой кислоты.П р и м е р 1. Исходное сырье(200 мл 50 мМ трис-НС 1) и центрифугируют при 10000-13000 15 мин. Ксупернатанту, тщательно Фильтрованному череэ 3-4 слоя марли от жира,прибавлящт при 4 С 1 л раствора хлористого кальция (8 мМ) и хлористогомагния (5 мМ). Смесь перемешиваюто30 мин при 4 С. Выпадающий за этовремя осадок микросом отделяют центрифугированием при 10000- 13000Осадок суспендируют 680 мл трис-НС 1буфера. Содержание белка (по Лоури)2 г,Полученный препарат имеет удельную активность 0,24 мкмоль арахидоновой кислоты/мг белка в мин, т.е.его удельная активность сравнима спрепаратами микросом, получаемымиспособом дифференциального центрифугирования, а выход по белку в 1,52 раза выше.Сравнительная характеристика препаратов простагландинсинтетазы, полученных известными и предлагаемымспособами из везикулярных желез барана ( в расчете на 100 г исходныхжелез), представлены в таблице. Таким образом, предлагаемый способ вляется более простым, более технологичным и обеспечивает получение целевого продукта с высокой активностью.1097672 Удельная активность, мкмоль арахидоновой к-ты/мг белка в мин Способ получения простагландинсинтетазы Общая активность Белок в препарате, г 480 0,24 2,0 Осаждение солями Дифференциальноецентрифугирование 0,3-0,4 370-500 330 0,74 Прототип 40 2,3 0,017 Цитратный Заказ 4152/24 Тираж 522 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-Э 5, Раушская наб., д. 4/5Подписное Филиал ППП "Патентф, г. Уагород, ул. Проектная, 4 Составитель О. СкородумоваРедактор Л. Веселовская Техред И.Асталош Корректор А. Тяско
СмотретьЗаявка
3498465, 23.07.1982
МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА, ОРДЕНА ОКТЯБРЬСКОЙ РЕВОЛЮЦИИ И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. М. В. ЛОМОНОСОВА, МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ИНСТИТУТ ТОНКОЙ ХИМИЧЕСКОЙ ТЕХНОЛОГИИ ИМ. М. В. ЛОМОНОСОВА
ЯКУШЕВА ЛЮДМИЛА АЛЕКСЕЕВНА, МЯГКОВА ГАЛИНА ИВАНОВНА, ДЕМИНА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА, ЕВСТИГНЕЕВА РИМА ПОРФИРЬЕВНА, МЕВХ АЛЕВТИНА ТРОФИМОВНА, ВАРФОЛОМЕЕВ СЕРГЕЙ ДМИТРИЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: C12N 9/00
Метки: выделения, простагландинсинтетазы
Опубликовано: 15.06.1984
Код ссылки
<a href="https://patents.su/3-1097672-sposob-vydeleniya-prostaglandinsintetazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения простагландинсинтетазы</a>
Способ выделения металлического железа из порошкообразного железосодержащего продукта
Номер патента: 1321683
Опубликовано: 07.07.1987
Авторы: Иванова, Мачульский, Хоменко
МПК: C01G 49/00
Метки: выделения, железа, железосодержащего, металлического, порошкообразного, продукта
...пробкой с двумя стеклянными трубками, одна из которых опущена в раствор для продувки его углекислым газом, Вторая стеклянная трубка представляет собой клапан Бунзена. После этого в течение 1 мин 30 продувают колбу углекислым газом и нагревают на электрической плитке при 60-100 С до растворения 3-4 мин, все время пропуская углекислый газ. После охлаждения содержимое колбы количественно переносят в мерную колбу емкостью 250 мл и доводят до метки дистиллированной водой, предварительно обескислороженной,Отбирают аликвоту 50 мл, добавляют 0 10 мл серной кислоты (1:2), три капли фенилантраниловой кислоты и титруют 0,1 н раствором бихромата калия из микробюретки на 10 мл. Можно заканчивать определение йодометрически, ком плексонометрически....
Способ аналитического определения сульфата бария в активной массе отрицательного электрода свинцового аккумулятора
Номер патента: 74358
Опубликовано: 01.01.1949
Автор: Вильямович
МПК: H01M 10/06, H01M 4/57, H01M 4/62
Метки: аккумулятора, активной, аналитического, бария, массе, отрицательного, свинцового, сульфата, электрода
...ото татков фильтра. Фильтр промываот горячей водой до исчезновенияреакции на свободную кислоту.Фильтрат ц прсмывнуО гкцдксстьсобирают в мерную,колбу на 500 лл.Теплый раствор нейтралцзуот аммцаксм до появления легкой, не исцезаощей при взбадтывангщ, мути,Затем к жидкости добавляют 50 .чл124-ного раствора бромистого калия и 10 юг раствора гидсооцсиаммония удельного веса 0,92, Раствор с осадком перемешцваот,охлаждаот под краном водой дсво 249,.дя 1 до метки и снова перемешивают, После отстаивания в течение 15 - 20 мин. прозрачную жидкость сливают через плотный сухой фильтр (лучше двойной) в сухой стака к При соолюдении указанных условий свинец отделяется полностьюУбедившись в полноте отделения свинца (реакция,с Н 25) 250 мл про....
Способ выделения металлического железа из восстановленных материалов
Номер патента: 472281
Опубликовано: 30.05.1975
Авторы: Казак, Федоров, Французова
МПК: G01N 1/38, G01N 31/00
Метки: восстановленных, выделения, железа, металлического
...процесс при нагревании и сокра щает растворение до 30 мин, При растворении металлического железа в растворе образуется двухвалентное железо, которое определяют непосредственно титрованием КзСг 20 т с индикатором.П р и м е р. Для выделения металлического железа готовят 10%-ный раствор хлорного железа, рН которого составляет 5,25. Более кислый раствор нейтрализуют свежеосажденным, промытым декантацией г е (ОН) а. Нейтрализацию 10/о-ного раствора 1 еС 1 з проводят добавлением 5 - 6 г 1 е(ОН)а на 1 л раствора и настаиванием его в течение 4 - 5 суток.0,5 г восстановленного материала помещают в сухую коническую колбу на 250 мл, добавляют 10 г хлористого калия и приливают 50 мл приготовленного раствора хлорного железа, Колбу закрывают пробкой с...
Способ выделения нуклеиновых кислот из активного ила
Номер патента: 548614
Опубликовано: 28.02.1977
Авторы: Долобовская, Щетинин
МПК: C07H 21/00
Метки: активного, выделения, ила, кислот, нуклеиновых
...0,5 1,0 2,0 3,0 4,0 8,0 3 6 12 18 24 48 0,665 0,920 0,997 1,483 1,483 1,636 0,639 0,639 0,972 1,100 1,100 0,920 пнями. Сточные воды, образующиеся при получении нуклеиновых кислот из активного ила предлагаемым способом, могут быть легко очищены биологическим способом или после соответствующей обработки использованы как удобрения для сельского хозяйства,Использование мочевины в качестве экстрагирующего раствора облегчает дальнейшую депротеинизацию раствора нуклеиновых кислот, так как многие белки в концентрированных растворах мочсвины денатурируют, а комплексы нуклеиновых кислот диссоциируют.Пример.Суспензию активного ила центрифугируют (3 тыс. Об/мин., в течение 2 - 3 мин), надосадочную жидкость сливают, осадок охлаждают Как видно из...
Способ получения окиси железа для изготовления активной массы отрицательного электрода щелочных аккумуляторов
Номер патента: 76397
Опубликовано: 01.01.1949
Автор: Грибов
МПК: C21B 15/00, H01M 10/28, H01M 4/26
Метки: аккумуляторов, активной, железа, массы, окиси, отрицательного, щелочных, электрода
...средств связи за321 (357137) Опубликовано 31 августа 1949 годаПредмет изобретения Редактор Э. М. Левина Зтв. редактор М. М, Акишии 219 Особенность предлагаемого способа получения окиси железа для изготовления активной массы отрицательного электрода щелочных аккумуляторов заключается в том, что окись железа получают обработкой углекислого железа, осаждаемого содой из растворов солей железа.За основу способа взята реакция: РеЯО, + Ха,СО, = РеСО,+Ба,80.Исходное сырье - сульфат железа - обрабатывают содой, и окись железа получается уже путем прс,калки образовавшегося углекислого железа при температуре выше 400 С. Полученную окись железа восстанавливают в водороде при температуре 450 - 600 С. Способ получения окиси железа для...
Предыдущий патент: Способ получения культуры клеток эпидермиса человека
Следующий патент: Способ получения глюкоамилазы и белкового корма
Случайный патент: Способ грохочения и устройство для его осуществления