Способ моделирования гипобиоза у теплокровных животных

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине, а именно к экспериментальной физиологии и может быть использовано для получения длительно пролонгкруемых со стояний сниженной жизнедеятельности гипобиоза), в значительной степени приближающихся к естественному гипобиозу гетеротермных организмов,Известны способы получения состоя Р ний глубокого гипобиоэа с использованием нейроплегических веществ (аминазин, пипольфен, промедол в дозах 7:5:1 мл/кг массы соответственно с применением гипоксической (1 О)15 или гйпоксическо-гиперкапнической 110-12 . 02 и 12-13% СО) газовых сред 111.Наиболее близким к предлагаемому является комбинированный способ, за в 20 ключающийся в том, что рауседил (0,4-0,8 мг/кг массы), за сутки до начала опыта; за 15-20 мин до начала охлаждения - дроперицол 0,4 мг/кг), охлаждение ведется при 3-5 С в усло виях гипоксической или гипоксическо-гиперкапнической газовой среды, что дает возможность охладить животное до 20-24 оС в течение 4-5 ч и перевести его на режим пролонгирования, затем в течение 1,5-2 ч газовый состав нормализуют и поднимают окружаюущю температуру до 18-20 С, В указанных условиях удается поддерживать состояние только ггубокого гипобиоза не более 30-40 ч2 ).Однако описанные способы моцелирования гипобиоза приводят к вымыванию серотонина из энтерохромофинных клеток желудка и кишечника, что вле чет за собой десквамацию покрывающего эпителия, изъявлению слизистой и 1 тек подслизистого слоя, и в некото ых случаях могут приводить к гибели животного. Цель изобретения - сокращение сро- ков введения в гипобиоз и удлинение периоца поддержания гипобиоза.Поставленная цель достигается тем,50 что согласно способу моделированиягипобиоза у теплокровных животных путем введения рауседила и последующей иммобилизацией животного, дополнительно. вводят 5-окситриптофан в дозах 75-125 мг/веса и лоддержи 55 вают температуру окружающей среды на 3-8 С ниже температуры тца животоного. Способ осуществляют следующим образом,Животным (крысам, кроликам, хомякам в активный период жизнедеятельности:весна-лето) внутримышечно вводятрауседил из расчета 0,4-0,8 мг/кгмассы, Затем вводят 5-НТР в дозе 75125 мг/кг массы внутрибрюшинно, непосредственно после премедикации животных иммобилизируют и оставляют прикомнатной температуре. В этом случаепроисходит постепенное равномерноеснижение температуры тела и к 15-20 чЮтеплообмен стабилизируется на необходимом уровне. Этот способ обычноиспользуется при получении поверхностного гипобиоза или гипобиозасредней глубины (35-3 б, 26-34 С со.ответственно.Дпя получения гипобиоза с болеенизкими температурами или при необходимости быстро снизить температуру тела после премедикации рауседилом животных оставляют при комнатной температуре на 15-20 ч без фиксации,при свободном доступе к пище и воде.За этот период истощение КА резервов достигает необхоцимого уровня и,хотя температура тела снижается ие.о,значительно 11,0-1,5 С, организмуже приобретает свойства пойкилотермности. После чего животным вводят5-НТР в тех же дозах, иммобилизируютих и помещают в герметическую термоокамеру при температуре среды 15-5 Сили сохраняют комнатную температуру 120 С),В любом случае через 2-3 ч температура тела снижается до заданногоуровня и животных переводят на режим пролонгирования, в котором тем,пературу среды восстанавливаютдо необходимого уровнй 1 температурасреды 20 С, а умеренную иммобилизаО 1цию сохраняют в течение 1"2 сут дляисключения произвольных движений животного. Таким образом поддерживаютгипобиоз в течение 3-5 сут 1 а в отГдельных случаях у кроликов до 9/ .При необходимости в ходе эксперимента можно изменять температурный режим: повышать температуру тела, соответственно повышая температуру среды или устраняя иммобилизацию, илипереводить на более низкий температурный уровень, кратковременно понижая температуру среды.Восстановление жиэнедеятельнос"ти животных проводится повышением1091 Составитель О.МакаренкоРедактор А.Мотыль Техред Ж, Кастелевич Корректор О.Билак,Заказ 3086/48 Тираж 447 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул, Проектная. 4 температуры среды до уровня температуры тела, после чего животное поднимает свою температуру, восстанавливая температурный градиент. Пуи гипобизе средней глубины28-30 С пролонгируемом не более 2 сут, после прекращения иммобилизации животное согревается за 5-6 ч.Доза рауседила 0,1-0,35 мг/кг массы не вызывала у животных стойкого О гипотермического эффекта.П р и м е р 1. В опыт .взято 5 белых беспородных крыс 00 массой 2101 +16 г и температурой телаТ) 38 + + о0,2 С. В 17 ч животным введен рауооседил из расчета 0,4 мг 1 кг массы, после чего их оставили в клетке на ночь при температуре среды Тр) +21 С и свободном доступе к пище и воде. Воо9 ч следующего дня внутрибрюшинно 20 введен 5-НТР: 1-й крысе 75 мг/кг;2-й 100 мг/кг; 3-й 125 мг/кг, 4-й 50 мг/кг; 5-й 200 мг(кг массы; Жинотные Фиксированы к доскам с помощью металлических дужек, одеваемых 25 на шею и спину. Тр 20 С. Через 2 ч отомечалось максимальное снижение Тт у 1-й 35 2 С; 2-й 29,8 С; 3-й 25,0 С 1 4-й 22,5 С, 5-й 21 . Еще через 2 ч (через 4 ч после введения 5-НТР) Тт 30 стабилизировалась у 1-й на 37,0 С;2-й 30,2 С; 3-й 26,0 С; 4-й 23,0 С5-й 21,5 С.Однако 5 и 4 крысы погибли через 36 и 40 ч после введения 5-НТР со 35 ответственно, 3-я держала Тт стабильф но в течение 2 сут, но быпа слабой и медленно восстанавливалась при выведении из гипобиоза. Наилучшим вари. антом были дозы рауседила 0,4 и40 5-НТР 100 мг/кг веса, крыса находилась в состоянии гипобиоза в течение 3 сут и хорошо восстанавливала физиологические Функции.П р и м е р 2. 3 крысам с сред- ц ним весом 220+25 г и Тт 37,80,3 С введен рауседил из расчета 0,3 мг/кг массы, а через 16 ч 5 НТР в дозе: 213 46-й 75 мг/кг; 7-й 100 мг/кг; 8-й125 мг/кг по схеме, описанной в примере 1. Через 2 ч после иммобилизации 7 и 8 крыс Т упала до 19 и 18 Ссоответственно при Тр 17 С и стабио лизировалась на 20,8 С черезч. Однако крыса 7 погибла через 2 сут пролонгирования, 8 в ,через 40 ч. Оптимальными в этом сочетании оказались доза 0,8 и 75 мг/кг массы. Однако при длительном (более 2 сут) поддержании гипобиоза эта дозировка рауседила довольно часто 453 случаев) оказывала ульцирогенное действие.Аанализ проведенных исследований показал, что наиболее оптимальным сочетанием доз рауседила и 5-НТР являются дозы 0,4 и 00 мг/кг массы соответственно. При этом гипобиоз средней глубины (Тг 30 С ) достаток:о Фиксировать животных при Тс 19-20 С ао для глубокого гипобиоза (Т 20 С) на время охлаждения необходимо снижать Тср до 15-5 С с последующим восстановленнем до 17 С.О,Для быстрого введения в состояние гипобиоза и поддержания его не более 2 сут возможно использова-, ние доз 0,8 и 75 мг/кг или 0,4 и 125 мг/кг массы.Таким образом, предлагаемый способ моделирования гипобиоза у теплокровных животных позволяет переводить организм в состояние пойкилотермии, быстрее снижать Т до желаемого уровня, длительно поддерживать гипобиоз на заданном температурном уровне с помощью однократного введения рауседила и 5-НТР, иммобилизации и поддержания необходимого температурного градиента (3-8 С). Полученоное предлагаемым способом состояние сниженной жизнедеятельности по физи ологическим механизмам развития в значительной степени приближается к естественному гипобиозу гетеротермов.