Способ культивирования бактерий

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧ ЕСКИРЕСПУБЛИК 06146 51)5 С 12 Ы 1 ЕНТНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ВЕДОМСТВО СССР ГОСПАТЕНТ СССР) САНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ЛЬСТЯ У АВТОРСКОМ ции, предусматривающий регулированиепенообразования эмульсией жировогопеногасителя, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения процесса, в качестве пеногасителя используют рыбий жир, предварительноомыленный щелочью на глубину 0,5-504,при этом эмульсию вводят в исходнуюпитательную среду в количестве, со-.держащем 0,025-0,251 жира от объемасреды, а затем в процессе культивирования в периоды усиления пенообразования порциями, содержащими 0, 000250,й жира от объема среды. ник В.Ю., зучение промывочимический СССР 969.НИЯ БАК- ри аэрамкм, которую ра спыляют над у ровне мкультуральной жидкости. Эмульгирование и распыление осуществляют с помощью пневмоакустического преобразователя-диспергатора, помещенного внутри ферментера. Размещение внутри ферментора пневмоакустического диспергатора, обусловленное малой агрегатив- - ъ ной устойчивостью водно-жировой эмуль- ,Д,сии, усложняет конструкцию аппарата;(" и его использование.Цель изобретения - упрощение процесса.1Указанная цавиачто в способерий на питателпредусматриваюнообразованияногасителя, ипеногасителя ипредварительноС) ирового петока вНаиболее ается при ыльныхтственно. ания баке.(54)(57) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВТЕРИй на питательной среде Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу культивирования бактерий с использованием жировых пеногасителей, и может быть использовано, например, при биосинтезе лизина.Известно использование жногасителя, а именно, соапссмеси с мыльными сбросами.активное пеногашение наблюдконцентрациях соапстока и мсбросов 0,5 и 1-1,5/ соотвеИзвестен способ культивировтерий на питательной среде при аэрации, предусматривающий регулировани пенообразования эмульсией жировогопеногасителя.По этому способу жир вводят в среду в виде стерильной водно-жировой эмульсии при соотношении компонентов 3:1 с размером частиц порядка 30-100 ель достигается тем, культивирования бактеьной среде при аэрации щем регулирование пеэмульсией жирового передложено в качестве спользовать рыбий жир, омыленный щелочью на10614643глубину 0,5-50 ь, при этом эмульсию через диспергатор, Получают 254-ную вводят в исходную питательную среду эмульсию рыбьего жира. в количестве, содержащем 0,025-0,253 В качестве посевного материажира от объема среды, а затем в про- о ла используют 24-часовую культуру . цессе культивирования.в периоды уси.- продуцента в количестве 5 мз, выраления пенообразования порциями, со- щенную на питательной среде с 4 Ф ме. держащими 0,00025-0,043 жира от объе- лассы, 73 кукурузного экстракта, 1 Ф ма среды, хлористого аммония.Способ осуществляют следующим об- и)ферментацию проводят в асептичесо разом. ких условиях при температуре 30-32 С,Бактерии выращивают при аэрации непрерывной аэрации и перемешивании на питательной среде, в которую до- сжатым воздухом в количестве 1 мз/мин бавлена стирильная жировая эмульсия, на 1 мз культуральной жидкости, при содержащая омыленный на глубину 0,5- 1 рН среды в пределах 7,2-7,5, давлении 503 рыбий жир. в аппарате 0,2-0,3 ати, регулированииЧастичное омыление жира проводят . пенообразования путем добавления.в гидроокисями натрия или калия при ферментер из колб стерильной стабили в течение 1,5 ч при соотношении .зированной эмульсии рыбьего жира пор" жира, щелочи и воды 18: 1; 36. . О ,циями по 0,5 л (д, 0013) в периоды резЖировую эмульсию вносят .в таком . кого усиления вспенивания. Процесс количестве, чтобы содержание жира в : биосинтеза ведут в течение 58.ч, По- питательной среде составляло 0,025- лучают 50 мз культуральной жидкости 0,254. В процессе культивирования с содержанием лизина 20,9 г/л.Выход эмульсию добавляют в периоды усиления 25 .биомассы 35 г/л.вспенивания порциями, содержащимиП р и м е р 2. Осуществляют био,00025-0,0 М жира от объема среды, синтез лизина с помощью культуры микП р и м е р 1. Осуществляют био- роорганизма Мдсгососсоз 1 цсащдсшп синтез лизина с помощью культуры мик- И 95 в ферментере емкостью 100 мз роорганизма ВгечЬаКсехилв вресев 30 при условиях, аналогичных описанным 22 1. в ферментере емкостью 100 мз.Вы- в примереращивание микроорганизма ведутв.50 мз В питательную среду до стерилизастерильной питательной среды, соаео- ции вводят 0,5 к объему стерилизожащей 10 т (20 к объему) свеклосахар- ванной водной эмульсии жира, пригоной мелассы, 1 мз (2 ь) кукурузноготовленной следующим образом. экстракта, 5,3 мз (10,63) ферментали- В реактор, снабженный мешалкой и эата БВК, 0,9 т (1,83) хлористого ам- нагревательной рубашкой, вводят мония, 55 кг (0,11 ь) двузамещенного2,01 мз рыбьего жира и 0,0023 мз М"ьфосфата аммония и 50 кг. (0,1 ь) стаби- ного водного раствора едкого натра. лизированной 253-ной водной эмульсии щ. Полученную смесь нагревают до 70-. 80 С рыбьего жира, которую готовят следую- и перемешивают в течение 1,5 ч, Общим образом. разуется смесь продуктов омыления ирыбьего жира с вязкостью, 30 мПа.с.В реактор, снабженный мешалкой и Степень омыления рыбьего жира состав- нагревательной рубашкой, загружают 4 ляет 0,53. К полученной смеси добав,6 мз рыбьего жира и 0,15 мз 404-но- , ляют 2 мз воды и пропускают образовавго водного раствора едкого натрия. шуюся смесь через диспергаторПолу- Полученную смесь нагревают до 80 С и чают 503-ную эмульсию рыбьего жира.перемешивают в течении 1,5 ч. Образуется смесь.:продуктов омыления и рыбьеО Ферментацию ведут как ука а от как указано в гожира с вязкостью 120 мПа. с. Глуби- примере 1, регулируя пенообразование на омыления.рыбьего жира составляет добавлением в ферментер по трубопро, К полученной смеси добавляют воду стерильной стабилизированной 3,25 мз воды и продолжают перемеши-,эмульсии порциями, содержащ м 0, вание в течение 1 ч при температуре рыбьего жира от объема среды. Проне менее 40 С. Для получения эмуль- должительность ферме тац 5О 55 мента ии 65 ч. Посии пеногасителя 0,1 мз полученной л. лучают 50 мз культуральной жидкости смеси добавляют к 1 мз -рыбьего жира, с содержанием лизина 31,8 .г/л. Выход смешивают с 3 мз воды и пропускают биомассы 40 г/л.51061 161 6Таким образом, описанный способ .рования бактерий по сравнению с изпозволяет упростить процесс культиви- вестным способом. Редактор Е,Гиринская Техред И.Иоргентал Корректор Л.Лукач Ф, Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101аюш,е ж ю Заказ 4572 ВНИИПИ Государственного 113035, ТиражПодписноекомитетапо изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5