Способ получения биотина

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН ДПС 12 Р 1/О ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССОРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ЗОБРЕТЕН СКОМУ С ТВ(71) Московский ордена Ленина, ордена Октябрьской Революции и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет юк, М.В.Ломоносова(56) 1.Авторское свидетельство СССР .Ю 420668, кл. С 12 .Б 1/20, 1972.2, 1 мдЬагв В. ТосЬ 1 Ыига Т. ОкаСв К. ВФи 61 евоп Ь 1 овупЬевьв Раг 1 Б. Сопчегв 1 оп оГ йевФ 1 оЬоС 1 п 1 оЬ 1 о 11 п Ъу чвгоив К 1 пйв оГ а 1 сгоог 8 ап 1 ввв.- "Айг 1 си 1 ига 1 аиа Вхо 1 о 81 са 1 СЬеш 1 вгук 1966 4 р 385 вЬ аьЯ ОПИСАНИ(54) (57) СПОСОБ ПОЛуЧЕНИН БИОТИНА, предусматривающий культивирование гриба вида ВЬгорив йе 1 вшаг на питательной среде, содеркащей глюкозу, пептон, однозамещенный фосфат калия и водопроводную воду, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличения выхода бнотина и удешевления процесса его получения, из вида НЬ 1- горив 6 е 1 еавг используют,штама ВКМГ, при этом культивирование ведут на питательной среде следующего состава, мас.Ф:Глюкоза 4,00-5,00Пептон 6,00-7,50Однозамещенный фосфаткалия О, 03-0, 05Водопроводная вода ОставьноеИзобретение относится к микробиологической промышленности, а .именнок способу получения биотина.Известен способ получения биотинапутем культивирования штамма ас 11 повусев 1 ачепйоГивепв 1586 в течение 7 сут при 28"С с последующимопределением биотина в культуральнойжидкости 1 .Известен также способ получениябиотина, предусматриваюищй культивирование гриба вида Вп 1 корпв йе 1 ешагна питательной среде, содержащей,глюкозу, пептон, однозамещенныйфосфат калия и роду. Используютштамм Впокорив йе 1 еваг Н, которыйвыращивают 5 сут на питательной среде, содержащей на 1 л водопроводной воды 10 г глюкозы, 10 г пептона,10 г гидролизата каэеина, 0,5 г однозамещенного фосфата калия, 0,5 гдвузамещенного фоефата калия,0,5 г хлорида калия, 0,5 г сульфата магния, 0,2 г цистина, 0,2 г метионина, 0,2 г таурина, 50 мг дестиобиотина, Количество биотина в культуральной жидкости 250 мкг/л ( 2 ).Недостатками известного способаявляются низкий выход биотина и высокая стоимость процесса его получения, связанная с использованиемдля приготовления питательной среды ЗОбольших количеств дорогостоящихкомпонентов.Цель изобретения - увеличениевыхода биотина и удешевление процесса его получения.Указанная цель достигается тем,что согласно способу получения биотина, предусматривающему культивирование гриба вида Вйкорпв йе 1 ежаг напитательной среде, содержащей глюкозу, пептон, одноэамещенный фосфаткалия и водопроводную воду, иэ вида БЬ 1 корпв де 1 ешаг используютштамм ВКМР, при этом культивирование ведут на питательной среде 45следующего состава, мас,%:Глюкоза 4,00-5,00Пептон 6,00-7,50Одноэамещенныйфосфат калия 0,03-0,05 50Водопроводнаявода ОстальноеШтамм Бп 1 орив 1 е 1 еваг хранитсяво Всесоюзной коллекции микроорганизмов и имеет следующую характеристику,Риэоиды коротко и слабо раэветвлены, немногочислены, Столоны слабо выражены. Стилоспорангиеносцы прямые и извилистые 10-20 мкм в диаметре, 60 простые, иногда с раздвоенным, тройчато-неправильно-мутойчатым вэдутием в месте ответвленйя, буроватые. Апофиза блюдцевидная. Стилоспорангии до 250-300 мкм в диаметре. Колонка 65 чаще ширококоническая или приплюсну= то-шаровидная 50-120- (150) 50-";.".0- в (140) мкм, Спорангиоспоры (6)-8-12- -(14)" 6,5-8 мкм, часто неправилЬной формы до 30 мкм длины или в диаметре. Спорангиоспоры более или менее хорошо исчерчены и сильно угловатые (,особенно при старении культуры ). Термотолерантные, выдерживают температуру 42-43 С.Штамм растет на богатых средах. В качестве источника углерода используют глюкозу, сахароэу, глицерин, Требует сред, богатых аминным азотом (пептон, гидролиэат казеина),В качестве источника азота может также испольэоватьаспарагин. На нитратах и амонийных солях растет плохо, К витаминам и ростовым факторам нетребователен. Для получения биотина штамм Бп 1 - 2 орив йе 1 ещаг ВКМБвыращивают на питательной среде, содержащей глюкозу, пептон и одноэамещенныйофосфат при 30 С в течение 3 сут.П р и м е р 1, Гриб Впькорив се 1 ещаг ВКМРвыращивают на скошенном сусло-агаре 5 сут. Полу-. ченным споровым материалом засевают колбы емкостью 750 мл, содержащие 50 мл среды следующего состава, мас.Ъ:(рН среды 5,0):Глюкоза 4,00Пептон 6,00КН РО 4 0,03Вода водопроводнаяОстальноеКолбы с посевом помещают на качалку и культивируют при 220 об/мини 30 С в течение 3 сут, после чегомицелий отделяют фильтрованием нодвакуумом и определяют количество биотина в культуральной жидкости известным микробилогическим методомс 1 ассооас 111 ивр 1 ап 1 аглж в качестве тест-культуры. Культуральнаяжидкость содержит 510 мкг/л биотина.П р и м е р 2. Споровым материалом, полученным как в примере 1,засевают колбы объемом 750 мп, содержащие 50 мл среды следующего состава, мас.Ъ (рН среды 5,0,:Глюкоза 5,00Пептон 7,50КН 2 РО, 0,05Вода водопроводная ОстальноеКультивирование проводят на качалке при 220 об/мин и 30 С в течение 3 сут. Культуральную жидкостьотделяют фильтрованием под вауумоми определяют в ней количество биотина микробиологическим способом. Культуральная жидкость содержит600 мкг/л биотина,Таким образом, предлагаемый способ получения биотина позволяет более% Заказ 7864/28 Тираж 523 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная, 4 чем в 2 раза увеличить выход биотина, удешевить процесс его получения за счет использования более дешевой малокомпонентной среды, при этомтакже значительно сократить времякультивирования.