Способ получения маннита

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ОВС 12 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТОРСКОМУ СВИ56,195; кл.1 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(72) И.В.Стахеев и В,В.Щерба 1) Институт микробиолоБелорусской ССР,(54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИЪННИТАпутем культивирования его продуцента на питательной среде, содержащей углеводы в качестве источника:углерода, дрожжевой экстракт и необходимые минеральные соли, с последующим концентрированием и кристаллизацией целевого продукта, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения выхода маннита и сокрашения времени ферментации, в,качествепродуцента используют штамм Реп 1 сП,1 ыщ йесивЬепз БИМГ.Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу получения маннита, используемого в пищевой, медицинской и химической промышленностях, парфюмерии, а также при получении поверхностно-активных веществ, олиф, смол и лаков.Известен способ получения маннита путем культивирования дрожжей рода Тогц 1 орв 1 в на средах, содержащих глю. козу или мальтозу, или глицерин, ми- О неральные соли, дрожжевой экстракт при 28-30 оС, концентрирования под вакуумом и кристаллизации 1.Йедостатками способа являются длительность процесса ферментации и использование дорогостоящей средыНаиболее близким к изобретению техническим решением является способ получения маннита, заключающийся в выращивании гриба вида Аврегд 111 цв сапц 1 дцв на питательной среде, содержащейуглеводы, например глюкозу в качестве источника .углерода, дрожжевой экстракт и минеральные соли, кон" центрировании и кристаллизации маннита 2 .Наиболее существенными недостатками известного способа являются невысокий выход маннита до 50, длительность ведения ферментации (8- 13 сут), а также использование дорого стоящспо компонента среды. - глюкозы в качестве источника углерода.Целью изобретения является повышение выхода маннита и сокращение вре" мени ферментации. 35Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения маннита, предусматривающему культивирование его продуцента на питательной среде, содержащей углеводы в качест ве источника углерода, дрожжевой экстракт и необходимые минеральные соли, с последующим концентрированием и кристаллизацией целевого продукта, в качестве продуцента используют штамм Реп 1 с 1111 цщ цесцюЬепв 45 Б ИМГ38 .Штамм гриба Реп 1 с 1111 цв йесщпЬепв БИМГполучен путем многократных пересевов родительской формы Реп 1 с 11- 1 ыщ с 1 есцаЬепв и отбор наиболее про" 50 дуктивных колоний по манниту. Штамм депонирован в музее культур п 15 омышленных микроорганизмов института "ВНИИ- Генетика", коллекционный номер ,ЦМПМ Е 175. Штамм хранится в музее 55 .культур Института микробиологии АН Белорусской ССР при 4-5 С на сус".ло-агаре. Штамм гриба Реп 1 с 1111 цщ десцвЬепв ;БИМГимеет следующую характерис тику.Морфологические признаки, Конидиеносцы 50-10 х 2-2,5 мкм гладкие или мелко-шероховатые, часто образуются в краевой зоне от столоновидных . 65.гиф вдоль субстрата. Стеригмы в компактных пучках по 12-15, 7-9 хх 2-2,5 мкм. Конидии эллиптическиедо шаровидных,. 2-2,5 мкм иногда до3 мкм, в массе зеленоватые, в рыхлыхколонках до 100 мкм длины, частоотпадающие в культуре.Культуральные признаки. Сусло-агарсемисуточная колония диаметром 3 смбархатистая, светло-серовато-зеленовато-белая. Воздушный мицелий болееразвит в центре колонии и имеет хлопковидную структуру. На обратной стороне колонии неокрашенные с окружающим бесцветным агаром. Образованиеспор начинается на 4 сут роста.Плотная среда Чапека - семисуточная колония диаметром 2,8 см. Колонии бархатистые, зеленовато-белые,Растут ограничено. Воздушный мицелийразвит в центре колонии. Колонии собратной стороны окрашены в светло- .вато-желтый цвет с окружающим бесцветным агаром. Конидиеносная зонав центре колонии зеленоватая. Образование спор происходит на 7 сут.При засеве на плотную питательнуюсреду рост появляется на 2 сут,а к 6-7 цню колонии становятся бархатистыми с обильным спорообраэованием, В жидкой питательной средерост появляется через 1 сут и к3-5 сут накапливается большое количество грибкой биомассы, состоящейиз плотных пеллет, а содержание маннита в культуральной жидкости достигает 13-15 г/л среды.Меласса-агар-семисуточная колониядиаметром 3,5 см. Колонии бархатистые, зеленовато-белые, в центрефзеленые. Воздушный мицелий сильноразвит по всей поверхности колонии,вследствие чего она имеет хлопковидную структуру. На седьмые суткинаблюдается слабое спорообразование.Биохимические признаки. Желатинуразжижает очень медленно, поверхностно. Молоко пептонизирует, восстанавливает нитраты, крахмал гидролизует.Отношение к источникам углерода:ассимилирует рамноэу, арабинозу, ксилоэу, фруктоэу, манноэу, глюкозу,сахарову, мальтозу, глицерин, дульцит. Слабо растет на галактозе ипрактически не утилизирует лактозу.В качестве источника углерода используют мелассу - отход производства сахара, или сахарозу, или глюкозу. П р и м е р 1. Посевной материал выращивают на качалке при 27-ЗООС со скоростью перемешивания 200 качаний /мин в течение 2 сут в 300 мл колбах Эрленмейера, содержащий 50 мл среды следующего состава, г/л: ЯаМ 02; КНРО 4 1, МАМБО+7 Н 20 0,5; НС 1 0,5; РеБО, 0,01 р дрожжевой эксМ- ракт 5, глюкоза 30. РН среды 6,0.Полученный ииокулюм в количестве1033543 Составитель И.ЛаринаТехредО Цеце Корректор Г. Решетник Редактор Н,Джуган Заказ 5561/27 Тираж 523 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП фПатевтфг. Ужгород, ул. Проектная, 4 10 об. переносят в стерильную среду.аого же состава и .подращивают двое суток. Основную среду состава,. г/л: МаИО 3 2; КНРО 41, Мд 507 Н 20 0,5; рант 17,5, глюкоза 30, рН 5,0, засевают приготовленным 4-х суточным инокулюмом в количестве 10 об Культивирование осуществляют на качалке в 300 мл колбах Эрленмейерасодержащих 50 мл среды при 27-30 С и ско рости перемешивания 200 качаний/мин. Спустя 96-120 ч мицелий гриба отделяют Фильтрованием. Фильтрат. деионизируют на ионообменных смолах, концентрируют под вакуумом для получе ния 25-30 раствора маннита и оставляют кристаллизоваться на холоду. Выпавшие кристаллы отделяют.фильтрованием или центрифугирбванием. Выход составляет 48-50 от использован ного источника углерода.П р и м е р 2. Основную стерильную среду, содержащую г/л: МаХОэ 2; КНРО 4 1; МДЯО 4 7 Н 20 0,5, КС 1. 100 РеЯО 0,01; дрожжевой экстракт 12,5; глюкоза 30 рН 5,0 засевают приготовленным 4-х суточным посевным материалом в количестве 10 об Культивирование осуществляют на качалке со скоростью перемешивания 200 качаний/мин при 27-30 фС в течение 4-6 сут в 300 мл колбах Эрленмейера., содержащих по 100 мл среды. Выход маннита составляет 57,5 от использованного источника углерода. П р и м е р 3. Готовят среду сос-. тава аналогично примеру 1, но вместо глюкозы вносят 30 г/л сахароэы. ,Условия культивирования и извлечения маннита те же. Выход маннита сОставляет 54,5 от использованного источника углерода.П р и м е р 4. Условия культивирования и состав среды аналогичны примеру 2, но вместо глюкозы используют 30 г/л сахарозы. Выход маннита составляет 57"от использованного источника углерода.П р и м е р 5. Условия культиви" рования и состав среды аналогичны примеру 1, но вместо глюкозы добавляют 50 г/л мелассы. Выход маннита составляет 48,0 от использованного источника углерода.П р.и м е р. б. Состав среды и условия культивирования аналогичны примеру 2, но вместо глюкозы добавляют 50 г/л мелассы. Выход маннита составляет 64,0 от использованного источника углерода. Использование предлагаемого способа обеспечивает повышение выхода маннита до 64,0 от использованного источника углерода против 50 по извест-, ному сокращение сроков культивирования до 4-5 сут против 8-13 ч по известному, применение дешевой питательной среды (отхода сахарной промышленности - мелассы ).