Стимулятор роста микроорганизмов

.80101012 СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК А 8 = ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ РЕТЕНИ ОПИСАНИЕ ЪУ(54) СТИМУЛЯТОР РОСТА МИКРООРГАНИЗМ(56) 1,Авторское свидетельство СССР йф 632202, кл. С 12 М 1/22 1976. М К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ10101 Изобретение относится к микроЬиологической промышленности, в частности к стимуляторам роста микроорганизмов,Известны стимуляторы роста микроорганизмов - сложные органическиесоединения, например хинонполикарбо"новые кислоты 111,Целью изобретения является повы о шение накопления Ьиомассы микроорганизмов при внесении в среду стимуля"4 тора роста.Цель достигается применением в качестве стимулятора роста 2,3-диоксибензоилсерина - энтерохелина.Энтерохелин относится к биологически активным веществам и известен, как специфический хелатор железа, синтезируемый энтеробактериями.Выделение энтерохелина проводят следующим образом, Культуральную жидкость подкисляют 12 н. НС 1 до рН 1, затем центрифугируют, супернатант переносят в делительную воронку и прибавляют половинный объем этилацетата. Смесь интенсивно встряхивают и отстаивают до полного разведения водного и этилацетатного слоев. Этилацетатные экстракты упаривают на роторном испарителе при 42 С. Сухой остаток растЗО воряют в небольшом объеме свежего аце. тата дважды промывают 0,1 н. НС 1 и повторно упаривают. Препарат энтерохелина высушивают при 60 С под вакуоумом в течение 24 ч. 3 Варианты опыта Накопление биомассы ед.оптплотности М+м 1,15 ф 0,030 Среда Ьез железа Се ОЙ 1115 У(20 мкМ) 120+00301,40+0,0151,58+0,0170,61+0,0150,70+0 0181,15 ф 0,0352,17+0,100 100 Энтерохелин 20 мкг/млЭнтерохелин 45 мкг/млСреда без железаКонтрольЭнтерохелин 20 мкг/млЭнтерохелин 45 мкг/мл 117 С. т.гор 1 са 5 100 310 Название микроорганизма 24 2Рабоций раствор энтерохелина готовят растворением одного моля выделенного соединения в 1-ным Ма 2 НРО и добавлением одного моля е 50, 7 НО. После образования энтерохелинового комплекса раствор фильтруют и вносят впитательную среду для культивирования вколичестве 10-100 мкг/мл.Посевной материал Сапд)да вы)115фт"-766 Сапд)да сгор 1 са 115 Р 1 сНаоЬпег 11 Е. со 11 0111, Е, со 11 (непатогенная), 5 Н)пе 11 а 5 оппе 1 выращиваютв МПБ в течение 20-24 ч и вносят в количестве 0013 по объему,Микроорганизмы культивируют вМПБ или синтетической среде следующего состава, г/л: МН,1 С 1 1,0; КН 2 РО+1,5; На НРО,1 3,0; Мц 501 0,1; глюкоза 5,0, микроэлементы, мг/л: НэВО0,056; СОБО, 5 НдО 0039; СоС 12 0,050;2 пБОд 7 Н 20 30; (МН+) Мо 0 4 Н 200,120, вода дистиллированная - до 1 л,Микроорганизмь 1 культивируют в ко -нических колбах (250 мл ) на качалкепри 200 об/мин или в пробирках, вкоторые наливают 5 мл среды, или аппарате для непрерывного культивирования с автоматическим поддержаниемнеобходимой температурь 1, непрерывнойподачей стерильного воздуха при заданных оборотах мешалки. Энтеробактерии культивируют при 37 С, дрожжиопри 28 С. Биомассу определяют наФЭК-М.Влияние энтерохелина на рост микроорганизмов показано в таблице,1010124 Продолжение таблИцы Накопление биомассы Наименование микроорганизма Варианты опыта ед.опт.плотностиИ м Среда без железа Р, оЬдег 1 100 КонтрольЭнтерохелин 20 мкг/млЭнтерохелин 45 мкг/млСреда без железаКонтрольЭнтерохелин 50 мкг/млСреда без железаКонтрольЭнтерохелин 50 мкг/млСреда без железаКонтроль 103 Е. со 11 0111 100 Е, со 11(непатогенная) 70 100 112 БЬ, зоппе 1 100 Энтерохелин 50 мкг/мл т с 5 мл синтетической среды. Пробирки помещают в аппарат для встряхивания и культивируют в течение 24 ч приа28 С. Накопление биомассы составляет 3104 по сравнению с контролембез добавления стимулятора),Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет увеличить накопление биомассы различных микроорганизмов на 10-2004 по сравнению с контролем. Составитель В. Голимбет Редактор Л. Веселовская Техред Ж.Кастелевич Корректор Н Шароши Заказ 2400/13 Тираж 521 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 11 ОД Москва, Ж- Рашская наб. д, 4 Д Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 43Микроорганизмы, усваивающие железо- связывающий комплекс, накапливают на .10-2003 биомассы больше, чем в контрольном варианте - среде без добавления энтерохелина.П р и м е р. Энтерохелин получают при культивировании Кебз 1 е 11 а рпедвоп 1 а 5 р. ДБС 1015 известным способом. Полученный стимулятор вносят в среду в количестве 45 .мкг/мл, Выращива 45 ют дрожжи С. йгор 1 са 11 з в пробирках 1,65+0,018 1,95+0,019 2,00+0,6024 2,20+0,020 1,050,040 1,40+0,070 1,60+0,050 1,10+0,040 1,60 т 0,020 1,80+0, 0401,20+0,060 1,30+0,040 1,70+0,070