Способ идентификации бактерий рода сiтrовастеr

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик 11660263(61) Дополнительное к авт. свид-ву(22) Заявлено 070280 (21) 2881862/28-13с присоединением заявки Нов(23) Приоритет - .Опубликовано 2309.82. Бюллетень йо 35Дата опубликования описания 230982 51 М Кп з С 12 О 1/04 ГосударстеенныИ комитет СССР но делам нзобретеннИ н открытиИ53 УДК 576.8. .093.1(088.8) Заявите Ростовский-на-Дону научно-исследовательский и эпидемиологии, микробиологии и .гигиены 54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ БАКТЕРИИ Р 1 ТВОВАС тапьное вода . О рН среды 7,4-7,6Изобретение относится к медицине и может быть использовано при диагностике сепсиса.Известен способ идентификации бактерий рода С 1 йгоЬасйег путем посева исследуемого материала на элективную и дифференцирующую среды с последующим пересевом и инкубированием посевов на накопительной среде, а затем на среде, содержащей в качестве ферментируемого субстрата малоната натрия, и идентифицирующие исконьте бактерии по изменению окраски среды в присутствии ин дикатора 1.Однако известный способ длителен, так как предусматривает пересев на накопительные среды и культивирование на среде с малонатом натрия в те чение 18"24 ч (до 3 сут).Целью изобретения является ускоре ние способа.Поставленная цель достигается тем, что, согласно способу идентификации бактерий рода С(тгоЬас 1 ег, включающему посев исследуемого мате-, риала на элективную и дифференцирующую среды с последующим пересевом и инкубированием чистой культуры на питательной среде, содержащей фер-. ментируеьтай субстрат, и идентификацией бактерий по изменению окраски средй, культуру с элективной идифференцирующей сред непосредственно пересевают на среду, содержащую, г/л дистилированной воды:ПЬ-Феннл анин 2.3-2.5 и ХЗС 1 Ф8,0-8,5, и инкубируют при 40-45 Св течение 3,5-4 ч.Способ осуществляют следующимобразом.Материал от больного или из объектов .внешней среды засевают в питател 5ные среды для первичного выделения(среды Эндо, Плоскирева, Левина,висмут-сульфитная среда и среды обо"гащения), инкубируют 18-24 ч при37 С в термостате, затем часть колонии, подозрительной на С 1 сгоЬасЫгинокулируют одновременно в 2 рядалунок плексигласовой пластины (илибактериологические пробирки) с0,2 мп питательной среды, цредваоиательно автоклавированной при 112 Св течение 15 мин, состава, г/лЮ-Фенилаланин . 2,3-2,5Натрий хлористый 8,0-8,5Дистиллированная960263 Формула изобретения Составитель Г. СмирноваТехред М. Гергель Корректор Е.Рошко Редактор Л. Лукач Тираж 505 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж,Раушская наб., д. 4/5 Заказ 7149/31 Филиал ППЧ "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Для подщелачивания среды используют 0,1 н. ЯаОН. Инкубацию посевов исследуемых культур проводят в термостате при 40-45 С.Необходимость инокуляции колонии одновременно в 2 ряда лунок связана с тем, что инкубация представителей трибы Рго 1 ееае того же семейства при укаэанном режиме через 10-15 мин вызывает деэаминирование фенилаланина питательной среды. Внесение 10 в среду хлорного железа вызывает химическую реакцию и среда приобретает сине-зеленую окраску. По истечении 10-15 мин инкубаций в первый ряд лунок вносят по 1 капле . 15 раствора индикатора (10-ый водный раствор хлорного железа) Результаты учитывают в течение 1-2 с после внесения индикатора, При наличии в лунках представителей трибы Ргойееае питательная среда приобретает сине-зеленую или интенсивно зеленую. окраску.После учета результатов палетку (пробирки) инкубируют еще 3,5-4 ч в тех же условиях. Затем в лунки, в которых были получены отрицательные результаты на присутствие бактерий трибы Рго 1.ееае, вносят по 1 капле индикатора и учитывают результаты, При наличии в лунках (пробирках) культур С 1 ггоЬас 1 ег питательная среда приобретает цвет интенсивно сине-зеленый, изумрудноэеленый или светло-зеленый. Способ ,обеспечивает 100 положительных 35 реакций.Питательная среда на основе фенилаланина может быть приготовлена в малых объемах (10-100 мл) ех йевроге. Для этого соответствующие навес ки ингредиентов вносят в дистиллированную воду, предварительно подтитрованную 0,1 н. МаОН, и нагревают на пламени горелки до полного растворенияИспользуется среда после охлаждения.Использование изобретения позволяет ускорить способ идентификации бактерий рода С 1 ггоЬасйег (ЗО ч), дифференцировать эти микроорганизмы от других представителей семейства ЕпйегоЬасег 1 асеае, Рзецйоаопасеае и ИЬг 1 опасеае беэ дополнительных тестов, а также идентифицировать одновременно и представителей трибы Ргойееае. Способ идентификации бактерий рода С 1 сгоЬасйег путем посева исследуемого материала на элективную и диф"ференцирующую среды с последукщимпересевом и инкубированием чистой культуры на питательной среде,содержащей ферментируемый субстрат,и идентификацией бактерий по изменению окраски, среды, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью ускорения способа, культуру с элективной и дифференцирующей сред непосредственно пересевают на среду, содержащую, г/л дистилированной водыО 1.-фенилаланин 2,3-2,5 и МаС 1 8,08;5, и инкубируют при 40-45 С в течение 3,5-4 ч.4Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Методические рекомендации поидентификации бактерий рода цитробактер. М., МЗ.СССР, 1973, с. 4-9.