Способ диагностики острого затяжного и хронического активного гепатитов

934300 ОП ИСАНИ Е ИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскикСоциалистическихРеспублик(23) Приоритет -51)М Клз60 Х 1/28 А 61 8 10/00 Гееуллретееавй кемлтет СССР ле делам лзееретеллл н еткрытнй(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО ЗАТЯЖНОГ И ХРОНИЧЕСКОГО АКТИВНОГО ГЕПАТИТОВИзобретение относится к медицине и касается диагностики гепатитов.Известен способ диагностики острого затяжного и хронического активного гепатитов по клинико-биохимическим и морфологическим признакам 1.Однако дифференциальная диагностика затруднена из-за сходности клинико-биохимических и морфологических признаков указанных вариантов гепатитов.Цель изобретения - повышение точности дифференциальной диагностики острого затяжного и хронического активного гепатитов.Поставленная цель .достигается тем, что при осуществлении способа диагностики острого затяжного и хронического активного гепатитов, во взвесь лимфоцитов периферической крови вводят липопротеин, далее инкубируют при 36 - 38 С в течение 28 - 30 мин, промывают и повторно инкубируют с эритроцитами барана при 4 - 9 С в течение 58 - 62 мин и по числу розеткообразующих Т-лимфоцитов диагностируют формы гепатитов, при этом при увеличении на 10 - 15% розеткообразующих Т-лимфоцитов диагностируют острый затяжной гепатит, а при увеличении на 16 - 34% - хронический активный гепатит.Берут два образца венозной гепаринизированной крови из расчета 0,1 мл гепарина в концентрации 20 ед/мл крови и центрифу гируют в градиенте фиколл-верографина втечение 40 мин. Выделенные лимфоциты отмывают трижды фосфатным буфером рН ,2 и готовят рабочую концентрацию 2 Х Х 10/мл. Приготавливают 0,5% взвесь бараньих эритроцитов и подсчитывают количество розеткообразующих- Т-лимфоцитов на 200 клеток. За розеткообразующую клетку считают лимфоциты, фиксирующие по 3 эритроцита. Выделяют лимфоциты и готовят их рабочую концентрацию 2 Х 106/мл, 15 берут 0,1 мл эрит. взвеси, смешивают с0,1 мл лимфоцитов в концентрации 2 Х Х 10/мл. Для опыта лимфоциты предварительно инкубируют при 37 С в течение 30 мин с печеночным липопротеидом в концентрации 0,605 мг/мл. Для контроля берут лимфоциты и фосфатный буфер.Рабочую смесь, состоящую из эритроцитов, лимфоцитов, антигена (липопротеида) и без него инкубируют 5 мин в термостате.Центрифугируют 5 мин и оставляют в холо 934300дильнике при +4 С в течение 1 ч. Через 1 ч С помощью предлагаемого способа диагротируют осадок, добавляют 0,05 мл О,бю/ю-но ностики также установлен диагноз: хроничесго раствора глютаральдегида и выдержива- кий активный гепатит, так как показатель поют 5 мин при комнатной температуре, отмы- вышения числа Т-лимфоцитов крови при инвают трижды фосфатным буфером, из осад- кубации липопротеином равен 19 ю/ю. Правилька готовят мазок на стекле, его фиксируют 5 ный диагноз подтверждается последующими окрашивают по Романовкому-Гимза. наблюдением за больной в течение 1 г.При повышении лимфоцитов от 10 до Пример 5. Больная Р. перенесла тяжелую15/ю в опыте над контролем ставят диагноз: форму острого гепатита, Получала преднизозатяжной гепатит; при увеличении этих кле- лон. В течение года два обостроения процесток от 16 до 34 ю/ю ставят диагноз: хроничес са с повышением содержания билирубина икий активный гепатит. активности АЛАТ,Пример 1. Больной Т. Через 11 месяцев после острого гепатитаТ-лимфоциты (То) = 1079 клеток жалобы на слабость; содержание билирубиТ-лимфоциты контроля (Тк) = 946 клеток на 1,5 мгю/ю, активность АЛАТ 0,47 ммоль,а) 1079 - 946 = 133 гепатомегалия 1 см, а содержание гаммаглоб) 946 - 100 15 булина сыворотки крови увеличено до 31,7 ю/ю.133 - Х На основании клинико-биохимических исв) -Йфо- = 14/ следований, в частности, нарастания содерРазность. числа клеток в опыте и конт- жания ю -глобулина и наличия по морфо 71 ороле равна 133; в процентном отношении по- гическим данным выставлен диагноз: хроказатель опыта повышен по сравнению с кон нический активный гепатит (ХАГ ), Однакотролем на 14 ю/ю, на основании чего выставлен с помощью нового способа дифференциальдиагноз: затяжной гепатит. ной диагностики установлен затяжной гепаПример 2. Больной С, тит, так как показатель реакции 12 ю/ю.Т-лимфоциты контроля (Тк) = 938 клеток Дальнейшими клиническими наблюдениТ-лимфоциты.опыта (То) = 1092 клеток ями на протяжении 1 г. подтверждены праа) 1092 - 938 = 154 25 вильность диагноза (затяжной гепатит), такб) 938 - 100 как больная выздоровела.154 - Х Предлагаемый способ применен на 40в) 1606 16 ю958больных.Разность числа клеток в опыте и контро- Предлагаемым способом правильный дифле равна 154; в процентном отношении пока- ференцированный диагноз поставлен в 37затель опыта повышен по сравнению с конт- из 40 случаев (90 - 94/ю), а известным спо 30юролем на 16 ю/ю, на основании чего выставлен собом правильный диагноз поставлен тольдиагноз хронический активный гепатит. ко в 60 - 65 ю/ю случаев.Пример 3. Больной К.Т-лимфоциты опыта (То) = 828 клетокТ-лимфоциты контроля (Тк) = 617 клеток формула изобретенияа) 828 - 617 = 211б) 617 - 100 Способ диагностики острого затяжного211 - Х и хронического активного гепатитов, отлив) 61 = 34 ю/ю чаюи 4 ийся тем, что, с целью повышения точРазность числа клеток в опыте и контроле ности дифференциальной диагностики, воравна 211; в процентном отношении показа взвесь лимфоцитов периферической кровитель опыта повышен по сравнению с контро- вводят липопротеин, далее инкубируют прилем на 34%, на основании чего выставлен 36 - 38 С в течение 28 - 30 мин, промываютдиагноз: хронический активный гепатит. и повторно инкубируют с эритроцитами бараПример 4. Больная 3. на при 4 - 9 С в течение 58 - 62 мин, и поПоступила с дагнозом: обострение хрони числу розеткообразующих Т-лимфоцитов дического гепатита. На основании клинико-био- агностируют формы гепатитов, при этом прихимических данных (слабость, гепатомега- увеличении на 10 - 15 ю/ю розеткообразующихлия, гипертрансаминаземия 1,5 ммоль, содер- Т-лимфоцитов диагностируют острый затяжжание билирубина 1,5 мг/ю) диагноз колеб- ной гепатит, а при увеличении на 16 - 34/юлется между затяжной и хронической форма- хронический активный гепатит.ми вирусного гепатита. Морфологическим Источники информации,изучением биопсии печени выявлен лобуляр- принятые во внимание при экспертизеный гепатит, который встречается при хрони. Блюгер А, ф, Вирусный гепатит. Рига,ческой активной форме. Медицина, 1977, с. 277 - 280,Составитель С. МалютинаРедактор Н. Кешеля Техред А. Бойкас Корректор В. БутагаЗаказ 3915/36 Тираж 887 ПодписноеВНИ И ПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4