Способ диагностики кишечной инфекции

1843953 ьоа Соаетскик Социалистических Реслублик,Ч Кз А 61 В 10/О Государственный комите СССР ла делам изобретений и открытийШЕЧНО 11 ри мердвух больныратифа В. Сфекалий в О,мерно 1: 1)ной банефугируют 3О-антигена пределяют изсобами По известному способу из надосадка каждой пробы фекалий готовят ряд последовательных разведений (от 1: 1 до 1: 64) в объеме 0,25 мл в 0,85%-ном растворе МаС, Затем во все разведения вносят в объеме 0,25 мл раствор неадсорбированной паратифозной В сыворотки в разведении, содержащем две минимальные агглютинирующие дозы в отношении эритроцитарного О-диагностикума группы В. Минимальную агглютинирующую дозу сыворотки определяют путем предварительного титрования посредством реакции пассивной гемагглютинации, После 30 мин экспозиции во все лунки ряда вносят по 0,25 мл коммерческого эритроцитарного О-диагностикума группы В, Результаты учитывают через 1,5 -2,0 ч.По предлагаемому способу с каждой ;О пробой фекалий сначала проводят реакцию Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в серологических исследованиях, направ. ленных на обнаружение антигенов в раз. л ичном м атер иале.Известен способ диагностики кишечной инфекции путем проведения с пробой фекалий реакции нейтрализации антител с эритроцитарным диагностикумом с последующим диагносцированием наличия заболевания по положительному результату 111.Однако регистрируемые при этом отрицательные результаты реакции могут быть ложными из-за присутствия в исследуемом материале агентов, непосредствен но агглютинирующих эритроциты (лектины и др.). Кроме того, этот способ не гарантирует полной индикации антигенов во всех исследуемых пробах, содержащих искомыи антиген, и, следовательно, точность диагностики оказывается недостаточной.Цель изобретения - повышение точности способа.Зта цель достигается тем, что с пробой фекалий предварительно ставят реакцию прямой гемагглютинации, затем при наличии положительного результата пробу истощают фиксированными эритроцитами и реакцию нейтрализации проводят с истощенной пробой. 1, Исследуют пробы фекаций х с клиническим диагнозом пауспензию исследуемой пробы 85%-ном растворе МаС 1 (припрогревают в кипящеи водя.15 - 20 мин и центримин при 3000 об/мин. Наличие аратифозных В бактерий опвестным и предлагаемым спо.843953 Составитель С. МалютинаРедактор М. Сгрельникова Техрсд И, Заболотнова Корректор В, Нам Заказ 4469 Изд,418 Тираж 694 ВНИИПИ 1 осударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж.35, Раушская наб., д. 4/5Г 1 одппсиос Загорская типография Уирполиграфиздата Мособлисполкома 3прямой гемагглютинации, Для этого из каждой пробы фекалий готовят по одному ряду разведений (от 1: 1 до 1: 4) в объеме 0,5 мл в 0,85 о/о-ном растворе ХаС 1. Во все разведения вносят по 0,25 мл 0,75%. ной взвеси формалинизированных эритроцитов. Результат прямой гемагглютинации учитывают через 1,5 ч, С первой пробой фекалий результат - отрицательныи, со второй - положительный. На этом основании осуществляют истощение второй пробы фекалий формалинизированными эритроцитами. Для этого к осадку от 1,0 мл 10 о/о-ной взвеси фоРмалинизиРованных эРитроцитов прибавляют 1,0 мл цельного экстракта фекалий, смесь встряхивают и оставляют ца 1 ч при комнатной тсмперату. рс, Затем пробу центрифугцруют 3 мин прц 3000 об/мцц и цадосадочную жидкость исслсдуот по известному способу.У первого больного, у которого проба прямой гсмагггпотццацци с фекалиями отрицательная, О-ацтцгсн выявлен обоими способамц. У второго больного проба прямой гсмагглютццации с фекалиями - по. ложцтсльцая, что свидетельствует о наличии в фекалиях агента или агентов, непосредственно агглютинируюгццх эритроццтов. В пробе фекалий известным способом О-ацгцгсн цс обнаружен, а предлагаемым способом выявлен в титре 1: 8. При наличии в фекалиях больного агентов, непосредственно агглютинирующих эритроццты, лабораторный диагноз инфекции можсг быть поставлен только при использовании предлагаемого способа.П р и м е р 2. Исследованию ца содержание О- и Н-антигенов паратифозных В бактерий посредством известного и предлагаемого способов подвергнуты пробы фекалий 209 переболевших паратифом В ц находящихся с ними в контакте людей. Для проведения реакции нейтрализации антител применен коммерческий эритроцитарный сальмонсллезный О-диагцостикум группы В, приготовленный эритроцигарцый НЬ-дцагностикум и коммерческая цсадсорбированная паратифозная В-сыворотка. Известный и предлагаемый способы осуществляют аналогично примеру 1,При известном способе постановки рсакции нейтрализации антител с 209 пробами фекалий получены отрицательные результаты. Г 1 о предлагаемому способу пробы испытаны в реакции прямой гемагглютинации.29 проб (13,9 й 2,4%) дали прямую гемагглютицацию в разведениях не ниже 1; 4.5 Следовательно, данные пробы фекалий(13,9%) содержат агент (агенты), вызывающий прямую агглютинацию эритроцитов.Все пробы фекалий подвергают истощению. Б 10 из 29 полученных цадсадков 10 экстрактов истощенных фекалий в реакциинейтрализации ацтитсл обнаружены О- н 11-антигсцы паратифозцых В бактерий.11 рсдлагаемый способ в проведенномобследовании позволяет дополнительно 15 выявить специфические антигецы в 5%проб фекалий с отрицательным по известному способу результатом.11 редлагаемый способ обеспечивает более точную диагностику кишечных инфек ццй. Обнаруженные с помощью предлагаемого способа всех людей, в выделениях которых имеются ацтигены того или иного возбудителя, особенно важно для правильной экстренной и ретроспективной диагно 5 стцки заболеваний и проведения необходимого объема противоэпидемцчсских мероприятий,30 Формула изобретения Способ диагностики кишечной инспекциипутем проведения с пробой фекалий реакции нейтрализации антител с эритроцитар. цым диагностикумом с последующим диагносццрованием наличия заболевания по положительному результату, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точ.ности, с пробой фекалий предварительно 40 ставят реакцию прямой гсмагглютицации,затем при наличии положительного результата .пробу истощают фиксированными эритроцитами и реакцию нейтрализации проводят с истощенной пробой.45 Источники информации,принятые во внимание при экспертизе50 1. Леви М, И. и др. Реакция пассивной гемагглютинации и реакция нейтрализации антител при некоторых инфекциях. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммуцобиологии, 1962, Мо 1 О, с, 40 - 44.