Способ подбора пары донор-реципиентдля трансплантации почки

ОП КСАН ИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ и 833207 Союз СоветскикСоциавистмческикРеспублик 1) Дополнител 2) Заявлено 0 е к авт. свнд 1) М. Кл,з А 61 В 10/00(21) 2808715/28-13 явки-присоединени Гееударстееаай кемитет СССР юо делам эебретеккй и етермткй.(008.8) 30.05,81. Бюллетень2вания описания 06.06.81 публиков ата опуб 72) Авторы изобретен(7) Заявите ижский медицинский институт 54) СПОСОБ ПОДБОРА ПАРЫ ДОНОР-РЕЦИПИЕНТ ДЛЯ ТРАНСП.ЧАНТАЦИИ ГЮЧКИ1Изобретение относится к медицине,в частности касается способа подбора парыдонор-реципиент при аллотрансплантациипочек в клинике.Известен способ подбора пары донорреципиент для трансплантации почки, заключающийся в том, что у реципиента непосредственно перед операцией производятзабор сыворотки, а у донора выделяют лимфоциты, проводят лимфоцитотоксическуюреакцию, и по отсутствии цитотоксическогоэффекта определяют совместимость донораи реципиента 11).Однако даже лри отрицательной лимфоцитотоксической пробе в 15% случаев отме=чается ускоренное или острое отторжение фтрансплантата в ранний послеоперационныйпериод.Цель изобретения - предупреждениераннего отторжения трансплантата,Указанная цель достигается тем, чтоспособ подбора лары донор-реципиент длятранспла нтации почки, осуществляют путемзабора сыворотки реципиента, проведением,с ней,лимфоцитотоксической реакции с по-следующим определением совместимости донора и реципиента по отсутствию цитотокси 2ческого эффекта, забор сыворотки проводят за 3 - 4 мес до операции с интервалом 20 в . 21 день и для проведения реакции используют ее в разведении 1: 8 - 1: 16.При этом сыворотки реципиента до проведения реакции хранят при минус 68" минус 70 С.Способ осуществляют следующим, образом.У реципиента в период подготовки к алло- трансплантации почти в течение 3 - 4 мес берут с интервалом 20 - 21 день 4 - 6 образцов венозной крови 5 мл. Отстаивают в течениеч при 37 С, центрифугнруют при 400 д в течение 10 мин, собирают сыворотку и инактивируют прогреванием лри 56 С в течение 30 мин. Образцы сыворотки :хранят при минус 68 - минус ОС. Лнмфоциты донора выделяют центрифугированием при 400 д в течение 30 мин, дважды отмывают в 2 - 3 мл среды 99 и к осадку добавляют раствор ХФйкса с таким расчетом, чтобы конечная концентрация лнмфоцитов составила 2 - 410 клеток в мл. Непосредственно перед операцией образцы сыворотки больного, собранные в течение предшествующих операций 3 - 4 мес размора 83320751 О15 один или несколько образцов сыворотки реципиента, собранных в течение 3 - 4 мес до операции дают положительный лимфоцитотоксическнй эффект с лимфоцитами конкретного донора, пересадка данного аллотрансплантата противопоказана.Проводились клинические наблюдения в течение 3 - 4 мес у 10 больных с хронической почечной недостаточностью. У всех больных предоперационный общепринятый лимфоцитотоксический тест был отрицательный, что указывало на реальную возможность осуществлейия трансплантации почек. У этой же группы больных был проведен. предлагаемый новый тест определения сов- . местимости пары донор-реципиент путем взятия нескольких проб за 3 - 4 мес до 30 операции; При том у двух из десятка обследованных больных была установлена несовместимость конкретной пары, несмотря на отрицательную стандартную пробу. У данных больных в конечном итоге вследствие неудовлетворительной функции пересаженной почки. аллотрансплантат был удален.Пример 1. У больной, оперированной о поводу терминальной стадии хронической почечкой недостаточности, сыворотка, полученная за 59 дней до операции. Предлагае о мый способ в реакции с клетками конкретного донора показал положительный лимфоцитотоксический эффект в разведении 1: 16. Данный эффект указывал а наличие в сыворотке реципиента высокого уровня предсуществующих антител за два месяца до 45 операции. В течение первых двух недель после трансплантации у больной развился криз отторжения, который удалось купи- . ровать.Клянико-лабораторные показатели в пер-: вые две недели после операции: уровень мочевины составил 158 мг/%, уровень креатинина крови 12,5 мг/а/а, днурез 515 мл; в первый месяц после операции данные концентрации мочевины равнялись 19,5 мг/%, креатинина крови 11,7 мг/%; диурез 1328 мл. 55Данные показатели указывают на неудовлетворительную функцию транспланформула изобретения 1. Способ подбора пары донор-реципиентдля трансплантации почки путем заборасыворотки реципиента, проведения с нейлимфоцитотоксической реакции с последующим определением совместимости донораи реципиента по отсутствию цитотоксического эффекта, отличающийся тем, что, сцелью предупреждения раннего отторжениятрансплантата, забор сыворотки проводятза 3 - 4 месяца до операции с интервалом20 - 21 день и для проведения реакциииспользуют ее в разведении 1: 8 - 1: 6.2. Способ по п. 1, отличающийся тем,что сыворотки реципиента до проведенияреакции хранят при температуре ( - 68) -( - 70 С) .Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Рог 1 ег К. А. ТЬе еНестз о апЪойезоп Ьцгпап гела аодгаИз. Тгапзрап 1. ргос.976, 8,2, р. 189 - 97.Тираж 687 Поди ясноеУжгород, ул. Проектная, 4 ВНИИПИ Заказ 3843/2филиал ЙЙП Патент, г живают и разводят 1: 8 до 1: 6, по 0,0 мл распределяют в лунки планшет Тсрасакн, к ним добавляют по 0,01 мл взвеси лнмфоцитов донора. Инкубнруют смесь 30 мин при 20 - 22 С к ней добавляют по 0,005 мл комплемента, полученного из пула 23 - 25 кроликов, и выдерживают 60 мин при комнатной,температуре, Для окрашивания поврежденных лимфоцитов добавляют по , 0001 мл трнпановой сини и иикубируют10 мин при 20 - 22 С. Результаты реакции оценивают по количеству мертвых лнмфоцитов. Если все образцы сыворотки дают отрицательный результат, то пара донорреципиент является совместимой и отторжения почки при ее трансплантации в ранний период не произойдет. В .случае, если тата. Впоследствии аллотрансплантат был удален.Пример 2. Аналогичное течение в посттрансплантационном периоде было у больного К-ва, оперированного по поводу терминальной стадии хронической почечной недостаточности. Образцы сывороток собраны за 3,5 мес до операции. В лимфоцитотоксической пробе с клетками конкретного донора два образца сыворотки, т. е. уа 2,5 мес и 1 мес до операции, имели положительный эффект в разведении 1: 8. В течение первых двух недель после операции у больного наблюдались кризы отторжения, Уровень мочевины в первые две недели после трансплантации составил 98 мг%, величина креатинина крови 12,5 мг/о, диурез 30 мл; в первый месяц после пересадки почки уровень мочевнны крови 246 мг /о, креатина крови 1.3 мг%, диурез 256 мл.Результаты клинико-лабораторных анализов указали на неудовлетворительную функцию пересаженной почки. Впоследствии аллотрансплантат был удален.У остальных восьми обследованных больных все образцы сывороток, собранные в течение 3 - 4 мес до операции пересадки почки, в лимфоцитотоксическом тесте с клетками конкретного донора (предлагаемый способ) не давали положительной реакции, что свидетельствовало о хорошей совместимости пары донор-реципиент и действительно впоследствии у этих восьми больных клинико-лабораторные показатели функции трансплантатов были достоверно лучше.Предлагаемый способ позволяет предотвратить отторжение аллотрансплантата и избежать летального исхода при пересадке почки благодаря достоверному подбору совместимости лары донор-реципиент.