Способ определения степени вирулентности холерных вибрионов

(и) 79505 Союз Советских Социалистических Республик(45) Дата опубликовани сания 30.01(71) Заявите венный научномный институт(54) СПОСОБ ОПРЕДЕ ИРУЛЕНТНОСТИ ХОЛЕ ИЯ СТЕПЕНИХ ВИБРИОНОВ Изобретение относится к мелицянской мииробиолопии, а,имено к лабораторным опособам определения вирулентности. холерных эибрионоз,.Известен апюсоб определения спепени :вирулентноспи холерных аибрионав путем заражения лабораторного животного взвесью холерных вибрионов с последующвм исследованием жидкости, выделившейся в кишечяик жввютнюго (11.Одна 1 ко извеспный способ не обеспечивает высокой точности определевия степени норулентности холерных вибрионов.Цель изобретения - повышение точностн способа,ем, что способ опреулентности хюлеувых ют путем заражевия ного взвесью холер. Ю едующим иоследоваиашейся в иитпечник и определяют .наликонценпрации 0,01 - вьгсокую вврулент акции 0,6 - 5,0% и вытность холерных виют следующим обра 30 ом Цель достигается тделенвя степени виу.вибрионов осуществлялабораторного живоюных вибрионов,с послвием жидкости, выделживопногов жидкостчие белка и л,ри его0,5% евалифвцируккгвость, а при концентрше - слабую внрулен,бр ионов.Способ осуществля Кролиие-сосунков 10 - 12-дневного возраста заражают лабо втугем липоратомии в тонкий кишечник тремя дозами 10 з, 10 в, 10 мк. кл. холерных вибрионов (на жаждую доз 1 у тто 2 животных), либо .культуру вибр,ионов вводят с помощью зонда в желудок после предварительной нейтрализации желудо юного сока 3% 1 раствором соды. Всех попибших или забритых через 48 часов животных вскрывают и воследуют по общепринятой методике. Содержимое кишечника отсасываютизмеряют его объем и апределяют количество белка (ао методу Лоури или Эрисман,а). На основании многочисленных экспериментов ао овределению белка в,содержимом кишечника кроликовсосунков после;зараокения различными,штаммами холерных,вибрионов установлено, что содержаоеие белка колеблется в швроиих пределах: 0,01 гг% - 5 г% н выше. Вирулентные (холерогенные) штаммы холерных вибрионов вызывают выход жидкости в кишечник с малым содвржани 1 ем белка 0,01 г% - 0,5 т%, штаммы со свижечнай вирулентностью - с большим содержанием белка - 1,0,г% - 4 г%, Такам образомв основу оценки степени холерюгенности (вирулентноспи) холерных вибриюнов положен объективный метод количественного определения белка в жидкос.ти, По патофизиологическому механизму вирулентные штаммы вызывают выход жидкости без потери белка - гиперсекрецию иишечной жидкости, слабовирулевтные п 1 р,и- водят к выходу жидкости,в полость кищечника с болыпим содержанием белка - "праносудацию, штаммавибрионаЭль Тор Объем жидкости по 4-балльной системе. Среднееиз пяти проб Порядковыйкролика Количество белка в г % 1,112 Как видно из таблицы, колнчесгво белка в жидкости, вышедшей,в полость иишечвика у кроликов-сосунков, зараженных щтаммами вибрионоэ Эль Тор со снижениой вирулентностью, аочпи иа два иорядка выше, чем при заражении внрулент)ными.Сиособ обеспечивает высокую точность оценки степеки вирулентности штаммов,формула изобретения Способ определения степени вирулентности холерных вибрионов путем зараже,ния лабораторного животного взвесью хо. Составитель С, Малютина Техред А. Камышникова Корректор С, Файн Редактор Е, Хейфиц Заказ 24/39 Изд,102 Тираж 504 ПодписноеНПО Поиск Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Тип, Харьк. фил. пред. Патент 1. 2. 6. 7. 8. 9. 10.0,0174 0,0375 0,025 0,0438 0,0292 1,333 0,936 1,417 1,312 0,563 В таблице приведены данные, характеризующие содержание белка и объем выи 1 едшей в полость кивечника,жи 1 дкости в. результате зараиення кроликов-.сосунив вибрионами Эль Тор - вирулентным штам. мом Ри ытам 1 мом со сниженной вирулентностью Р. 4 4 4 4 4 4 4 3 3 4 лерных вибрионов с последующим исследо ванием жидкости, выделившейся в кншеч 10 ник животного, отлич а ющий ся тем,.чго, с целью повышения точностями способа, в жидкости оаределяют наличие белка и при его концентрации 0,01 г% 0,5 г%квалифицируют высокую вирулентность, а ври 15 концентрации 0,6 - .5,0 г% и выше - слабую вирулентность холерных вибрионов. Источник информации, принятый воннимание дри экапертиве:20 1. Руководство по мккробиологнчеоюй"диаиностике инфекционных болезней:. Под.ред. К, И. Матвеева. М., 1973, с. 180,