Способ совместного получения инсулина и панкреатина

ОП ИС Е АНИИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз СоветскихСоциапистицескихРеспубпик(23) Приоритет А 61 К 3 рствеииый коСССРлам изобретеи открытий митст Госуд,37(088.8) 5,0379. Бюл убликовано етень9 0 5,0 3,7 9 та опубликования о писа 2) Авторы изобретен Иностранцы нер, Вильхельм Шра и Фридрих Кизер(ФРГ) Ин ая фирм т АГиХанс Каргл онард Х остраннХехс71) Заявитель 4) СПОСОБ СОВМЕСТНОГО ПОЛУЧЕНИЯ ИНСУЛИНА И ПАНКРЕАТИНА Г 2 Способ осуществляют следующим образом,Свежую или консервированную путем быстрого замораживания поджелудочную железу свиньи размельчают и суспендируют в смеси, например, из 24 о 5. воды и 76 об. ацетона, к которой в случае необходимости добавляют нейтральные соли, а также соли многоос-1новных кислот. Для экстракции и последующего отделения нерастворимых составных частей желез поддерживают концентрацию ацетона в жидкой фазе между 40 и 80 об., чтобы было возможным растворение инсулина из ткани желез и для предотвращения активации проферментов благодаря автоматическим процессам в исходной смеси. луо 10 0 2 Содержа пензии сос добавляют в форме во доводят до 5 тительно 5. экстракции Затем твер центрифуги Твердое 0 вать много-20, К этой смес ция, лучше всеговора, Суспензию рН 5,7, предпочремешивают. Время т 0,5-1,5 часа.ва отделяют путем ожно экстрагироако для хорошего ение относится к фармацевомышленности и касается биологически активныхве тической прполученияществ.Известен способ совместного по чения инсулина и панкреатина вз и джелудочной железы свиньи путем экстракции органическим растворителем с последующим центрифугированием и выделением из экстракта инсулина и из осадка-панкреатина 11 .Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода и высокой активности препаратов.Целью изобретения является повышение выхода и активности препаратов. Эта цель достигается тем, что экстракцию исходного сырья осуществляют при рН 5-7 40-80-ным ацетоном в присутствии нейтральных солей, в полученном после центрифугирования осадке устанавливают рН более 5,6 и отделяют примеси экстракцией 60-70- ным ацетоном,кроме того, экстракцию инсулина из исходного сырья осуществляют ацетоном при его содержании 50- 60,ние тверд авляет 1 оль каль дного рас значения 4-5 т 6, п составля ые вещест ования,вещество ратно, од651656 Формула изобретения Составитель Г,СмирноваТехред Л. Алферова Корректор д,КравченкоРедактор О.Иванова Заказ 833/55 Тираж 671 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб.,д, 4/5 филиал ППП "Патент, г.ужгород, ул,Проектная, 4 качества панкреатина число экстракциидолжно быть незначительным.Осветленные экстракты объединяюти устанавливают рН 7-8, предпочтительно 7,3-7,7, благодаря добавке щелочныхрастворов, Для, этого применяют слабоаммиачную воду, раствор едкого натраили водный раствор гидролизующейся сощелочной реакцией соли, например динатрийгидрофосфат. Коагулирующую инертнуюпротеиновую фракцию отделяют путемцентрифугирования, Прозрачный экстрактснова подкисляют, освобождают в вакууме от ацетона, обезжиривают, концентрат осаждают поваренной солью иполученный осадок известным способомперерабатывают в инсулин,Выделенное после отделения содержащего инсулин экстракта твердое вещество составляет исходный материалдля панкреатина. Для сохранения ферментативной активности в нем устанавливают рН 6-7 путем добавки растворабуферной соли или смеси образующихбуфер солей и затем известным способом перерабатывают в панкреатин,П р и м е р 1. 50 кг быстрозамороженной поджелудочной железы свиньи"размельчают с помощью волчка для мясаи суспендируют в заранее приготовленной смеси из 120 л ацетона и 50 л воды при 15 С, 30Путем добавки водного растворахлористого кальция (100 г хлористогокальция в 150 мл воды) устанавливаютзначение рН 5,6. Перемешивают 30 минпри 15 С, смешивают с 45 л ацетона иозатем отделяют твердое вещество центрифугированием.Прозрачная фаза содержит инсулин,твердое вещество перерабатывают в панкреатин.40Твердое вещество растворяют с 40 лводного раствора Иа 2 НРО,который устанавливает значение рН 6,0-6,5, и путем вакуумной перегонки при 25 оС доводят до содержания ацетона 15. Остаток после дистилляции выдерживают45до 3-х часов при 25 С, затем растворяют с 250 л ацетона и подогреваютдо 30 С,Твердое вещество отделяют от прозрачной фазы путем центрифугирования, 50Твердое вещество еще раз экстрагируютпри 25 С в 150 л ацетона, который со- а держит 10 л воды, отделяют путем центрифугирования и для сохранения ферментативной активности высушивают ввакууме при 25-30 С.Выход: 9 кг панкреатина,Полученный после центрифугированияинсулиновый экстракт выпаривают ввакууме до удаления ацетона, Выделяющийся при этом жир отделяют, Изводного остатка после перегонки растворенный инсулин выделяют известнымспособом.Выход: 3 г инсулина с 25 1 Е/мгЕ инсулина (1 Е - международная единица).П р и м е р 2. Примененная дляэкстракции инсулина смесь. состоит из120 л ацетона и 50 л воды, в которыхрастворены 1 кг хлористого аммония и0,5 кг первичного фосфорнокислогонатрия.Другие исходные количества и условия выхода как в примере 1.Предлагаемый способ обеспечиваетвысокий выход с высокой активностьюпрепарата 1 Способ совместного полученияинсулина и панкреатина из поджелудочной железы свиньи путем экстракцииорганическим растворителем с последующим центрифугированием и выделениемиз экстракта инсулина и из осадкапанкреатина, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения .выходаи активности препаратов, экстракциюисходного сырья осуществляют прирН 5-7 40-80-ным ацетоном в присутствии нейтральных солей, в полученномпосле центрифугирования осадке устанавливают рН более 5,6 и отделяютпримеси экстракцией 60-70-ным ацетоном,2, Способ по п.1, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что экстракцию инсулина из исходного сырья осуществляютацетоном при его содержании 50-60.Источники информации, принятыево внимание при экспертизе1. Заявка ФРГ 92146275,кл, 30 И 2/04, 1973 р по которой принято положительное решение о выдачеавторского свидетельства.