Способ выявления условно-патогенных возбудителей кишечных инфекций

фте .ф ю Фафз,-,б"сх:ъ ю,А, у 11651 028 Союз Советсиык Сецыалыстычесиык Республик(51) М. Кл.С 12 К 1/04 Государствеияий комитет сссР по лелзм изобретений и открытий(Ь 4) СПОСОБ ВИЯВЛЕНИЯ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КИИЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ Изобретение относится к медицине,а именно к диагностике кишечных инфекций,Известен способ выявления услсвнопатогенных возбудителей кишечной ин 5фекции путем посева испражнений наплотные питательные среды с последующим отбором и пересевом выросших колоний,постановкой реакции агглютинациивыделенных аутоштаммов с сывороткоибольного и идентификацией возбудителя 1) .Однако известный способ не обеспечивает быстроты и высокой чувствительности.Целью изобретения является ускорение н повышение чувствительности способаа,Эта цель достигается тем, что отбирают пять различных по типу колоний, а реакцию агглютинации каждогоаутоштамма ставят с одной сывороткойбольного, взятой в разведении 1:50причем для идентификации берут агггютинирующиеся штаммы.25Способ осуществляют следующим образом.Первичный посев испражнений проводят на среды Плоскирева и Левина. Наследующий день отбирают 5-8 культур,отражающих все раэносбраэие выросших колоний, которые пересевают насреды Олькеницкого, нитратный агарСиммонса и мясо-пептонный бульон.В этот же или на следующий день ставят реакцию агглютинации всех выделенных культур в 1-ой сыворотке больного, разведенной 1:10 и 1:50. После отбора агглютинирующихсл аутоштаммов проводят их идентификациюпо ферментативной активности в антигенной структуре. Дополнительно проводят идентификацию культур, относящихся к трибе зшерихий по росту на средах Олькеницкого и Симмонса. Через 3-5 дней ставят развернутую реакцию агглютинации отобранных аутоштаммов в парных сыворотках больного, разведенных от 1:25 до 1:6400.Неагглютинирующиеся в 1-й сыворотке культуры изучают в реакции агглютинации со 2-ой сывороткой, разведенной 1:10. При положительных результатах проводят постановку развернутой реакции агглютинации и идентификацию культур.П р и и е р . В отделение кишечных инфекций поступил больной Г. При клиФормула изобретения Составитель С. МалютинаРеДактор Л. Курасова Техред И.Асталош Корректорй, Билак Тираж 527 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Заказ 736/27 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 43Вб 510ническом обЖедованйи установлен диагноз; острый гастроэнтероколит.В день поступления проведен посевкала на среды Плоскирева и Левина,взята кронь для получения сыворотки.При .изучении роста на чашечных средахтобрано 5 культур отражающих всеразнообразие колоний. Отобранные колонии пересевают на среды Олькеницкогои мясо-пептонный бульон.На следующие сутки диагностическими сыворотками исключена принадлежность выделенных чистых культурк облигатным патогенным видам. Скаждым живым бульонным аутоштаммомставят реакцию агглютинации н сыворотке больного, разведенной 1 ф 50, 15в пробирках. Через 2 ч инкубациипри 37 С проводят учет реакции. Установлено, что из 5 культур однаагглютинироналась на 3 креста .Для идентификации по биохимическимсвойствам агглютинирующую культуру20пересевают. При окончательном учете реакции агглютинации других агглютинабельных штаммов не выявлено,Возбудитель заболевания идентифицирован как Рг. в 1 гаЫ 11 з.С контрольной целью получают 2-уюсыворотку больного. В этот же деньставят реакцию агглютинации выделенного Рг. щ 1 гаЬз.Хаев н парных сыворотках в разведении от 1:25 до 1:б 400 30и 4 остальных аутоштаммон в разведении 1:25,Пробирки инкубируют 2 ч при 37 Св термостате и 20 ч при комнатнойтемпературе. Окончательный учет вы явил двухкратное нарастание титра антител к Рг. в 1 гаМ 11 з (максимальный титр 1;100) и отсутствие антител к остальным бактериям.Предлагаемый способ сокращает расход времени на постановку реакции агглютинации в 4 раза и срок ответа на 5-15 дней, повышает бактериологическое подтверждение инфекций, выявляет возбудитель независимо от видовой, родовой принадлежности. Способ выявления условно-патогенных возбудителей кишечной инфекциипутем посева испражнений на плотныепитательные среды с последующим отбором и пересевом выросших колоний,постановкой реакции агглютинациивыделенных аутоштаммов с сывороткойбольного и идентификацией возбудителя, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью ускорения и повышениячувствительности способа, отбираютпять различных по типу колоний, ареакцию агглютинации каждого аутоштамма ставят с одной сывороткойбольного, взятой н разведении 1;50,причем для идентификации берут агглютинирующиеся штаммы.Источники информации, принятыево ннимание при экспертизе1. Методические рекомендации1 1Комплексные методы диагностикиострых кишечных инфекций, Алма-Ата,1975,