Способ получения стрептокиназы

(й) И, Кл.з С 12 О 1 ЗД 208261728 32) 26,11.733) ГДР вщдаРстааакь Й аанщ СССР ва Аваам икаРатанчй и атартаЙ.Дата оп 72) Авторы изобретен Инострад Бэрвальд, Гюнтеари Религ, Карл.(ГФ р Майер, Роберт Хайкель,Людвиг Бекер, Вернер Кел фаус 4 йгер:ФЬльцка,11 1 Дитер ГердахН;: 4,4) СПОСОБ ПОЛУЧБИЯ СТРЕПТОКИИАЗИ Изобретение Относится к медицинской промьппленности, а именно к получешга препаратов,которые могут найти применение прн инфарктемиокарда, острых закупорках артерий конечностей, свежих тромбозах вен и эмболни легких,Известен способ получения стрептокиназы пу.теы выращивания продуцеята на среде содержагцей источники углерода, азота и минеральныесоли, с последующим выделением целевого продукта 111.1Однако этот способ не обеспечивает высокоговыхода целевого продукта,Цельюизобртенияляегсяповыщехода целевого продукта.Эта цель достигается тем, что в качестве ипродуцента используют штамм Зтгертососсиэет 1 ц 1 эив 11 э 1 тАЕЗ В 377 и выращивание осуществляют иа питательной среде, содержащей в качест.ве нстопщка азота дрожжевой автолизат иликукурузный экстракт с содержанием азота ро0,1-0,8% к объему питательной среды.Применяющийся в способе штамм Ятгертососсца еоц 1 Мей 11 э 3 МЕТ В 377 представляет собойграмоположительный микроорганизм, Форма клетки шаровидная (кокки), диаметр 0,8 - 1,О (0,6 - 1,2), После успешного деления клетки оста. ются склеенными друг с другом в виде жемчужного ожерелья, так что образутотся цепеобразные соединения. Длина цепей разная и зависит боль. щей частью от питательной средьь В предлагаемом способе цепь состоит нз 4-8 отдельных звеньев.Иа прочной питательной среде с кровью штамм растет небольшими колониял 1 и диаметром 1 - 2 мм. Они имеют крчглую форму, гладкие по краям н слегка вьптрслые. Оптимум роста идет при температуре 37 С. При росте на шггательной среде с кровью у штамма происходят характерные изменения, Вокруг колонии развивается прозрачный осадок, в котором растворены красные клет.ки крови (эритроциты),Способ поясняется следующими примерами.П р н и е р 1. Жидкую питательную среду, состояцтую из 20 г на 1 л панкреатического пептона нз мяса или рыбы, 5 г/л поваревтой соли, 2% говяжей сыворотки или дрожжевого автолизата с содержанием 0,2% азота, вместе с жидкой пита. тельной средой, запивают в колбу Эрлейнмейера Объемом 200 мл, стернлпзутот и с 10 мл суспензии.СТРЕПТОКОККЗ ЗКВИЗ 111(113 ИС (СТРЗЕ 1 ОКОКК ТРУПЬ(С( засевают в сИзцо 3 Отпчес(о;1 13 з(чоре 1(О 15 Зрепцо 1 Соли 1 ОС 3 те (пкда(иц В (ечси 1 ч п(зи37 С 0 М 31 ЭТОИ 1(ЕТВОИ ПрЕ 35 ВЗ;).г(Е(Ы(ОЛ Кл(ЬТу(3 ы пересеивают в аппарат(з с ме(палкой, содетгз 1 дие 2000 мл пптательцОй среы (3 т(3(зз 3( 11;З 3(взРИЕ С 1 Ьная КУ 3(ЬТ 1 РЗ ) 1 ЛИ В КЗ(ЕС(В С И 31 О 1",У 13,13применяют для с(снов(о 1 культу 1 ы, 113 Л(к(15( пл 131.тЕЛЬНаи СРЕДа СОСтОИт ИЭ ДРО(ОКЕ 1(ГО ЗцтОЛЦЗата С0,2/О соде 1)чла 1 Ия азота 3 тз(с 1(е 15 з 31 цч 3 ыь 1( (.О 3(я Оми КИТ РО.), КгНРО, С 11 ЗСООйз, Маг РСОт 9 О 4 РЕ О 3 (4(3) г:О( 133(1 г,ВЫрыщ(Вцц(Е КуЛЬтурЫ ВЕдут ОКО 1 О 18 (црПс28 С, При 37 С продо 3(юпе 31 ность культивиравзц(и составляет 7 ч,=та ВтОрая предВарптельизя к 1 льтурз можетс(ь(ть использова(а в качестве посевного материз 5(а дл 51 (оследуеще(й ОСНОВ 1 ьзй кул(туО 31,П р и м с р 2. Жцдктя питателы(зя средаОснозной культуры имеет следу 1 оьций состав т 3 л;Дро(окево(1 звтомзтпзат 15 - 120Солевой раствор КН, РО.( 2,50Кг НРО., ". 50СЙ СОСКа 3 Нг О1,00Д НСО 00Ы 98 О 7 НО 3,4(1ГеБО, (йн)г БОМЛС 1 г 4 НгО 3,02Глюкоза 10,003 ЗТСЫ Пг ОВ(Дтт Ст-Рцл(4 ЗЗЦИ(О СОЛЕВОГОЬ(ет.вора ц дрожжево 1 О авто(ц(ззта. После логобавляют стерилизова(п(ыц раствоо 1 люк азы.ДрожжеВОЙ автолизат фц 3 тьтриОт стерильно,После слива в ферме(пер засевают в коли.чествснном соотцоьцении 15100 3 бъеьоьтл часц(дпервой илц Второй предварительной ку 31 ху 1 ь(.Культуру доводят до температур,1 28; приПОМЕШИВЗИИ 1 Прц 1 С.3 - .00 ОЮМИц. г(11 и ллс(т-:-;(Вают ца уроВне 32 - 7,4,Продол 1 з(те 3(ы(зсть культцвц 15 ова(11(, (3 т- В.ЙЯет 20 - 24 ч три засеве с црщварцтел 31(ой 1,.-",;11. Г 1)(3 й 33 П(.3 Е 13(ВЗ И 13(Ь (С 133.(гО( 3 ",3 ЛО 3)Л 1 те 3 ь(3(;1 ч 3 с 3 , 3СО 3 П( 3 О Л 3.:3.СЛ НЗ/ 33