Способ количественного определения феноксиэтил-диметил-(2 окси3-ацетил-5-хлор)бензиламония 3-окси2-нафтоата

Ь О П И С А Н И Е и 1 59 О 666ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советсник Социалистических Республик(51) М. Кл. 6 01 Х 33/16 м заявкиприсоединен Государственный коми 3) Приоритет3) Опубликовано Совета Министров ССС ло делам изобретений 0,01,78. Бюллетень(088.8) открытии 45) Дата опубликования описания 01.02.78(71) Заявител нститут медицинскои паразитологии и тропичеим, Е. И. Марциновского 54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ -ф Е Н О КС И ЗТ ИЛ- Ы-М-Д И МЕТИЛ- (2-0 К С И-А ЦЕТ ИЛ -5-ХЛОР)-БЕНЗИЛАММОНИЯ 3-ОКСИ-НАфТОАТА зобретения является повышьности способа. Эта цель достигается тем,цию соединения определяютфлуоресценции катионной исоединения.Определение концентрациисти соединения проводят привозбуждающего света 390 немого - 478 нм, а анионнойволны возбуждающего светастрируемого - 490 нм. что концентрао собственной анионной части ой чаволны трир длине регикатионндлинеи регисасти при290 нм и пускание вешества контроля пускание стандарта Сб а 100% Изобретение относится к области медицины, а именно к способам определения антгельминтика в биологической жидкости - моче и тканях (печени, почках, мышце сердца, стенках тонкого и толстого кишечника, содержимом кишечника млекопитающих и тканях гельминтов) .Известен способ количественного определения четвертичных солей аммония в биологическом материале путем экстракции этанолом и последующего определения концентрации соединения в экстракте методом спектроскопии.Однако известный способ обладает низкой чувствительностью и недостаточной специфичностью.Целью и ение чувствител 2Пр имер 1. Опыт проводят на белых мышах средним весом - 20 г, зараженных для эксперимента Тг 1 с)тосерйа 1 пз пшг 1 з.Препарат вводят рег оз в виде суспензии в 5 1 % -пом крахмальном клейстере в дозах 1 гна 1 кг веса животного, Одновременно проводят три параллельных определения на трех белых мышах. В контрольном опыте используют мышей без проведения предварительно го лечения препаратом.Навеску -100 мг тканей гельмпнта илитканей органов мыши гомогенизируют и смывают 3 мл 0,002 н. этанольного раствора соляной кислоты, центрифугируют 2 мнн при 5 4000 об/мин. К 1 мл полученного раствора добавляют 1 мл 0,005 н, спиртового раствора КОН (раствор А).Измеряют интенсивность флуоресценцпираствора на спектрофотометре в кювете с тол- О шиной слоя 10 мм. Концентрацию катионнойчасти молекулы в микрограммах на 1 мг веса органов определяют при возбуждении 390 нм и испускании 478 нм и рассчитывают по формуле590666 3 С 35 ООа 100 Н 10 Составитель С. Малютина Техред Н. Рыбкина Корректор Н. федорова Редактор Н. Хубларова Заказ 3259/14 Изд, Мо 181 Тираж 1109 НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб. д. 4/5Подписное Типография, пр. Сапунова, 2 где С - концентрация стандартного раствора,мкг/мл;а навеска биологической ткани, мг;65- содержание катиона по молекуляр.ному весу препарата.К 1 мл раствора А добавляют 2 мл 2 н. водного раствора ХаОН. Определяют содержание оксинафтойной кислоты при длине волны возбуждения 290 нм и длине волны испускания 480 нм.Содержание кислоты в органах рассчитывают по формулеиспускание вещества контроляХиспускание стандарта3 С 35 ооа 100 ОО где С - концентрация стандарта, мкг/мл;а - навеска биологической ткани, мг;35- содержание кислоты в препарате помолекулярному весу.В качестве стандарта используют растворпрепарата в 0,002 н, спиртовом раствореНС 1 - 10 мкг/мл. Дальнейшее определениепроводят как описано выше.П р им е р 2. Мочу собирают сразу от трехиспользуемых в параллельном опыте мышей.Пипеткой отбирают 0,5 - 0,1 мл мочи мышейи доводят объем до 3 мл 0,002 н. растворомсоляной кислоты в 96-ном этиловом спирте.Дальнейшее определение проводят так же,как в предыдущем примере.Содержание катиона в микрограммах на1 мл мочи рассчитывают по формулеиспускание вещества контроляиспускание стандарта3 С 65 ООа 100 оо где а - количество взятой для опыта мочи, мл. Содержание оксинафтойной кислоты в микрограммах на 1 мл мочи рассчитывают по 5 формуле испускание вещества контроля испускание стандартагде а - количество мочи, мл.Предлагаемый способ обладает высокойчувствительностью, специфичностью и позво ляет определить препарат в биологическихобъектах при введении его рег оз в терапевтических дозах. 20 Формула изобретения 1. Способ количественного определения Ир-феноксиэтил-К-И-диметил- (2-окси-ацетил-хлор) -бензиламмония 3-окси-нафтоата в 25 биологическом материале путем экстракцииэтанолом и последующего определения концентрации соединения в экстракте методом спектроскопии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения его чувствительности, 30 концентрацию соединения определяют по собственной флуоресценции катионной и анионной части соединения.2. Способ по п. 1, отличающийся тем,что определение концентрации катионной ча сти соединения проводят при длине волнывозбуждающего света 390 нм и регистрируемого - 478 нм, а анионной части при длине волны возбуждающего света 290 нм и регистрируемого - 490 нм.