Питательная среда для выращивания клубеньковых бактерий

О Л И-:-А"НИ ЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДВЯЛЬСТВУ Союз Советских Социалистнцеских Республик(и)687119 61) ид-в лнительное к а 8 21) 2606335/заЗаявлено 51) М. КлС 12 К рисоединением заявкисудерственный квинт ссср3) Приоритет во делец нзобретеннн н аткрытнй) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА КЛУБЕНЬКОВЫХ ДЛЯ ВЫР АКТ ЕРИИ ро пил,б-динитрофлан) при следую т М,й.ди но вносят прела .4.трифторметил шем соотношен ии компонентов, г/л: белой асоли роха 50-61015. 2.4,001 - 1,0 Остальное Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано нри выращивании клубеньковых бактерий ВЬгоЬцп аропсцп, например, производственного штамма 646,применяемого для изготовления бактериального удобрения ризоторфина, а также для проверки его качества в производственных условиях, и перспективных штаммов 614 а и 12,Известны различные питательные среды, используемые для выращивания азотфиксирую пих микроорганизмов 1.Известна также питательная среда - бобовый агар, содержащий отвар фасоли белой (или горо ха, сахар, агар-агар, воду, используемая для культивирования клубенъковых бактерий 21.Однако на таких питательных средах рост медленно. растущих клубеньковых бактерий, например НЬ,аропсцв штаммов 646.614 а и 12, недостаточный.ель изобретения - повьпнение выхода биомассы клубеньковых бактерий, например ВЬ. аропсшп штаммов 646, 614 а и 12..)то достигается тем, что в известную питательную среду - бобовый агар - дополнительП р и м е р, Проводят выращивание клу. беньковых бактерий НЬ. аропсцгп, иапримеэ, штаммов 646, 614 а и 12 на предлагаемой пита. тельной среде с добавлением трефлаиа и на известной питательной среде без трефлана.В состав известной питательной среды - бобовый агар, содержащей 50 г фасоли, 10 г са. хара, 5 г агара-агара и 1000 мл воды, ввсдят дополнительно препарат трефлан в количестве 0,001; 0,01; 0,1 и 1 г действующего вешества на 1 л рН питательных сред 6,8 - 7.Питательные среды разливают в пробирки по 10 мл и стерилизуют в автоклаве при 1 ат. мосфере в течение 30 мин.Развитие ВЬгоэаа 1 аропсцгп в чистой культуре Бобовый агар(контроль) 100 187 2770 1817 Бобовый агар + 0,001 гтрефлана на 1 л среды 1968 116,7 112,7 1385 108,3 3124 Бобовый агар + 0,01 г трефлана на 1 л среды 111,0 132 103,7 3076 1885 Бобовый агар + 01 гтрефлана нал среды 98,7 100,3 1171 100,4 2778 1825+ 1 гл среды Бобовый агар трефлана на 1 27,5 326 0 0 0 0 0.00 1-1,0 Ост ачь ное ЦНИИПИ Заказ 5674/26 Подписное Тираж 526 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 6819Проводят посев чистой культуры ВЬ.1 ароп 1- сот штаммов 646, 614 а и 12, а также провер.ку на качество бактериального удобрения риэоторфина (нитрагин), приготовленного на осно.ве производственного штамма 646Посев проводят глубинным способом, для чего 1 мп суспензии бактерий чистой культуры О разведения или суспензии бактериального препарата вносят в чашки Петри, заливают теп.лой средой из пробирок, осторожно при этом 10 Кроме того, колонии бактерий, выросших на З 5 предлагаемой питательной среде, крупнее, с более четким габитусом, что значительно обле чает их учет.Таким образом. введение в питательную среду препарата трефлана в количестве от 0,001 до40 0,1 г. действующего вещества на 1 л среды создает благоприятные условия для роста маложизненных клеток, требующих для своего развития дополнительных факторов роста, а концентра. ция 1 г среды является токсической для иссле дуемых бактерий.Выращивание ВЬ. 1 ароп 1 сцпз штамма 646 на предлагаемой среде позволяет обьективно оценить титр бактериального препарата ризоторфина и судить о его качестве. 50Формула изобретенияПитательная среда лля выращивания клубень. ковых бактерий, содержащая отвар из бобовых 4покачивач до застывания сре;щ. Лля проращивания культуры чашки помещают в термосгат прн т = 27-30 Г.На питательной среде, содержащей компонент трефлан, значительно активизируется рост бактериальных клеток ВЬ. 1 ароесот штаммов 646, 614 а и 12. Присутствие трефлана способствует увеличению численности клубеньковых бактерий от 3 до 16,7% по сравнению с контролем (см. таблицу) растений, агар-агар, сахар и воду, о т л и ч а ющ а я с я тем, что с целью повышения выхода биомассы бактерий, она содержит й,й-дипропил. .2,б-динитро 4-трифторметиланилнн при следую щем соотношении компонентов, г/л:Отвар фасоли белой(или гороха) 50-60 Сахар 1 О 11 Агар-агар 15-20 й,й-дипропил,6.динитро-трифторметиланилинВода Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1, Руководство по .практическим занятиям по микробиологии. Ч, МГУ, 974.2, Инструкция по определейию качества бактериальных удобрений М., 967, с,1 (прото. тип)