Способ оценки тяжести вирусного гепатита

Союз Советскии Социалистических Республик(22) Заявлено 05,02,76(21)с присоединениел заявки2079918 Государственный коцит Соаета Миннстроа 6 СС по делам иэооретеннй и открытий) Дата опубликования оп 72) Авторы ,изобретения В, ф, Учайкпц и Э И,ца 1 ец 1 ао , дар 1 ецц йм. 1, И, 11 црогова рой Московский дицннский инстт 1 Заявитель ОСОБ О 11:1 К 11 ТЛ.1(1 СП11111 УС 1. О 11.:1 Л 1 .,эобретение отт сится к медицине и моо для оценки тякестцжелых форм вирусцог жет быть использо овация и прогноэир тя огепатита,Известен способ диагностики вирусногогепатита, эаключаюшийся в определенииактивности фермента фруктоэо-фосфат.=,альдолазы в сыворотке крови больных 11 ,Однако известный способ не обеспе ивает высокой специфичности анализа, атакже возможности более ранней диагностики заболевания и прогнозирования еготечения,С целью пов.ццения специфичности анализа, а также возможности более раннеидиагностики заболевания и прогнозированияего течения по ггредлагаел 1 ому способусыворотку крови обрабатывают цистеццом,затем добавлягот в пробу 250-500 " субстрата - глицил-фецилаланил-р цитроацплидаинкубируют смесь при комнатной температуре в течение 20-25 миц,Способ оценки тяжести вирусного гепатита осушествляют следуюшим образом.Определяют активность фермента-катепюллетень 25 (53) УДЫ 618 86-002 (088.8) сания 07,09.77 тьвалет истеццол, а заге., , бг,1 толглицил=феццлагатцл.-р- нитроацд л, гцу.бируют раствор с ттоследуюцпьопрело;си :,ел в сл;ест атспсцца . сгет офосометт)цческц. . убстряГ бевут в ,Оцчесге 2,-О 500 У ца робу, 11 цкубаццо цробь ведуто.,прц 37 С в течение 20 мпц.П р и . е р. 1; О." 5 . ц сыворотки в оцытцойцробцре Яобан,яот 0,05 лг расти 1 м цистеица (для актнваццц фермецта) в ацегатном битего 0,.1 М р 11 5,5 (растгоряютццстепц из расчета 17 лтг в 1 мл буфера)ц выдерживают 5 л.цц при комнатной температуре. Разводят сицтетцчесий субстрат -глигвл-фонитггцг-тцгроац,цгд в томже буфере из расчета 250 а" субстрата в0,75 мл буфера. Добавляют в опытцуюпробирку 0,75 мл раствора субстрата вбуфере. Доводят обьел до,1 мл чистымбуферол. В контрольную пробирку наливаютэ"е то же, только влгесто субстрата добавляют чистый буфер. Слотрят опытную пробирку против контрольной на спектрофотомеь 5 ре СФА прц длине голцы 110 ммк, За563964 тем опытную, и контрольную пробирки ставят в термостат при 37 С на 20 мин(опытным путем было установлено, что наибольшая активность фермента проявляетсяза это время). После инкубации вновь смотрят на СФА пробы, Из второго, большегочисла, вычитают первое. Полученную величину экстерн 61 и переводят в/мг по калибровочной кривой. Полученную величину умно.жяют на 4 (пересчет на 1 мл сыворотки).Получают то количествоп-нитроанипина, которое отшеппл катепсин С из 1 мл сывораза Легка в 3,5 раза Сре днь-тяжелая,5 желая и рования его тывают циси 250-500 К р-нитроомнатной ин,5 но 40 обретен м у 1.Ж,фЛ 5 6,7, ме Е. Н. Валуйс955,абораторное дело, 1 тод В, И. Товарницко ценки. тяжести виропределения активн пособ путе оного гепати фермен Составитель С. МалютинаТехред Н. Андрейчук Корректор Д. Мельнич дактор Л, Гончарова Заказ 1915/175Ц 1 677 Подписноеомитета Совета Министровизобретений и открытийаушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная,Использование предлагаемого способа определения активности катепсина С в сыворотке крови детей, больных вирусным г. патнтом, обеспечивает упрощение методики путем определения активности фермента в сыворотке крови; возможность ранней оценки степени тяжести патологического процес са в печени и своевременного назначения соответствующей терапии, 1 а также возможсть прогнозирования течения заболевания, что зпачительно помогает в лечении вирусного гепатита, особенно тяжелых его форм Тираж1 ИИПИ Государственногопо делам13035, Москва, Ж,ротки от субстрата - глицил-фенилаланил-р-нитроанилида за 20 мин инкубации. Калибровочную кривую строят по п-нитроанипину. У здоровых детей катепсин С в сыворотке крови не определяется (равен О,) При вирусном гепатите у детей, особенно при тя;келых его формах, активность катепсина С:в сыворотке крови достигает 12 х /мл.В табл. 1 показаны результатыновы щения активности катепсина С в острый период заболевания в зависимости от тя жести процесса,та в сыворотке крови спектрофотом ки, отличающийся тем, целью повышения специфичности ана а также возможности более ранней ностики заболевания и прогнози течения, сыворотку крови обраба теином, затем добавляют в пробу субстрата - глицил-фенилаланиланилида, инкубируют смесь при к температуре в течение 20-25 м Источники информации, принятыние при экспертизе: