Способ получения вещества, снижающего уровень липидов и холестерина в крови

О П И С А Н И Е (11) 4504)5ИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз Советских Социалистических Республик(33)Опублико ет осударствениык комит Совета Министров СССРпо делам изобретений(53) УДК 615,739(088 Бюллетень Ме исания 07.05.7 о 15.11.7 Дата опубликования открытии) Авторы изобретени Иност а, Мотое и фумия ранцыси Кадзихара,ки Огаваония)ная фирмал, Компани, Лония) Тосихиро Хама каси 1) Заявител Иностран асьвтика(54) СПОСОБ ПОЛ УЧ ЕН ИЯ ВЕЩЕСТВА, СН ИЖАЮЩЕГО УРОВЕНЬ ЛИПИДОВ И ХОЛЕСТЕРИНА В КРОВИ2 цине, в веществ я вещ хол ест атуре нчто о из автодиал проду осажд астИзобретение относится к меди ч ности к биологически активным ам.Предложен способ получен и ества, снижающего уровень липидов и ерина в крови, ранее в патентной литер е описанный, заключающийся в том, рганы животных подвергают автолизу, лизата удаляют белки и соли путем иза и осаждения и выделяют целевой кт из концентрированного раствора ением органическим растворителем.Вещество, полученное предложенным способом, представляет собой белый или слегка желтоватый порошок, легко растворимый в воде, но нерастворимый в метаноле, этаполе, ацетоне, бензоле и диэтиловом эфире, Оно обладает положительной реакцией при испытании по нингидриновому способу, способу Фолин-Лори, способу Элсона-Моргана и фенолсерному способу М. Дюбуа, реакция отрицательна на способ Фиске-Сюббероу, дифениламиновый спосоо и орцинольный способ. Интенсивность окрашивания, полученного при нингидроновой реакции, понижается, если вещество подвергают гидролизу в кислой или щелочной среде, в то же время окрашивание неинтенсивное, если указанное вещество подвергают гидролизу в присутствии протеазы.Вещество, полученное описываемым способом, обладает термостойкостью, Даже при нагревании 10% -ного водного раствора вещества при 100 С в течение 30 мин его фармакологическая активность совсем пе уменьшается.Однако гидролнз в присутствии кислоты, щелочи и протеазы приводит к потере всех фармакологических свойств. Кроме того, прпмепе ние депротеинизирующего средства, напримерхлористого натрия, сульфата аммония, трихлоруксусной кислоты, надхлорной кислоты и других не приводит к осаждению вещества.Описываемое вещество снижает содержаниелипидов (всех липидов, всего холсстерина и свободных алифатических карбоновых кислот) в крови и сохраняет активность липазы липопротеинов в крови, что приводит к явно выраженному антилипемическому действию.20 Пример 1. 70 г легких кролика измельчают с помощью гомогенизатора при добавлспии 35 мл дистиллированной воды и смесь выдерживают в термостате при 25 С в течение 24 ч, что приводит к автолизу. Автолизован ную смесь подщелачивают до рИ 9,0 добавлением раствора едкого натра и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч. За450415 10 Таблица 1 о х 1. о азлк оо ох ь кХ 1 хо хОЮ фбо ххО щ о ооЩэхоО х ккяКхахФ хОкка цхо ф хПодопы гные крысы15 НормальныеС экспериментально вызванной Гиперлипемией (контроль)С экспериментально вызванной гиперлипемией, после введения описываемоговещества 37 186 0,090 0,120 0,82 0,10 5 5150 10 0,095 0,77 Предмет изобретения Составитель С. ЩеневаТехред М, Семенов Редактор Л, Тюрина Корректоры: Н, Лебедева и А, ВасильеваЗаказ 106014 Изд. М 1221 Тираж 506 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 тем жидкость центрифугируют со скоростью 5000 об/мин для разделения и получают 45 мл верхнего слоя жидкости. Этот верхний слой подвергают диализу в течение 15 и с применением целлюлозной трубки. Диализ проводят дистиллированной водой, подаваемой снаружи трубки, В результате получают 4 б мл недиализированной жидкости. К жидкости добавляют 35 г сульфата аммония и полученную смесь перемешивают примерно в течение 4 и, Затем проводят центрифугировапие со скоростью 3000 об/мпн и получают 37 мл верхнего слоя жидкости, Полученный верхнин слой жидкости снова подвергают дпализу в течение 15 ч с применением такой же целлюлозной трубки, как было указано выше, дистиллированной водой, подаваемой снаружи трубки, Полученную недиализированную жидкость затем концентрируют до 1 мл при 40 С под вакуумом. К концентрированной жидкости добавляют 20 мл ацетона и образующийся осадок отфильтровывают с получением 42 мг кристаллов.Истинная вязкость полученного продукта (т составляет 0,1213 единиц при 25 С при использовании воды в качестве растворителя.Анализ ИК-спектра для продукта показывает следующие пики поглощения; 3300 см - , 2950 см см см в , 1215 см ви 1025 см-.Для испытаний применяют самцов крыс в возрасте 9 недель, весом примерно 200 г, по 10 крыс в каждой группе. Результаты испытаний приведены в таблице, где показано, что по отношению к крысам с гиперлипемией, вызванной внутривенным введением 20 мг Тритона 1339 (поверхностно-активное вещество, используемое для экспериментального получения гиперлипемии у животных) на 100 г веса, при введении крысам внутрибрюшинно О,6 мг описываемого вещества на 100 г веса, проявилось ярко выраженное антилипемичсское действие и повышение активности липазы липопротеина, по сравнению с контрольными крысами, которым вводили физиологический солевой раствор.В таблице приведено содержание липидов в крови и активность липазы липопротеина в крови,ф Активность дана в единицах С. А. (фактор активности, определяемый по просветлению). Способ получения вещества, снижающегоуровень липидов и холестерина в крови, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что органы животных подвергают автолизу, из автолизата удаляют белки и соли путем диализа и осаждения и выделяют целевой продукт из концентриро ванного раствора осаждением органическимрастворителем,