Способ определения концентрации витамина во
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
О П И С А Н И Е 11 432192ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВЙДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советска Социалистических Республик:(51) Ч. Кл. С 121 с 1/00 Государственный комитет Совета Кинистров СССР па делам ивооретений открытий(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ВИТАМИНА В;. Известен способ определения концентрации витамина Впутем диффузии раствора в агаризованную среду с витаминно-зависимым штаммом с последующим выявлением зон роста тест-культуры и замером их диаметра.Используемые в указанных способах вита- минно-зависимые штаммы не позволяют определить концентрацию витамина Вв достаточно короткий срок.По предлагаемому способу для ускорения хода определения концентрации витамина В 12 питательную среду засевают ауксотрофным штаммом Ако 1 оЬас 1 ег зц 1 з.Для повышения четкости и увеличения точности определения зоны роста окрашивают красной кровяной солью и железоаммиачными квасцами.Культуру А. зц 1 з выращивают на косяках мясопептонного агара и хранят в холодильнике при 4 С. Пересевают культуру 1 - 2 раза в месяц на свежие косяки и выдерживают 24 час при 37 С. Для опыта используют культуру, выращенную на мясопептонном бульоне на качалках при 37 С. Выросшую культуру центрифугируют в течение О - 5 мин при 3000 об/мин и суспендируют в 0,85%-ном физиологическом растворе (109 клеток на 1 мл). Культурой можно пользоваться в течение 7 дней при хранении ее в холодильнике при 4 С. В качестве растворителя образцов и стандартного раствора витамина Вд используют1% -ный раствор лимоннокислого натрия.Стандартный раствор содержит 0,05 мг/л ви 5 тамина В 1.Для выполнения определения в чашку Петри вносят 20 мл расплавленной агаризованнойсреды (0,8 г КНРО 4; 0,8 г К,НРО 4, 3,0 г цитрата аммония и 7,5 агар-агара на 500 мл10 водопроводной воды, рН - 7,0 - 7,2), засеянной из расчета 5 10 клеток намл при 48 С.При помощи пробочного сверла вырезают6 лунок, в две из которых вносят стандартныйраствор, а в остальные такое же количество15 капель испытываемого раствора, Исследуютне менее двух разведений испытываемогораствора, при этом концентрацию каждого следующего раствора берут в два разаменьшей. На каждое разведение берут не20 менее трех чашек. После четырехчасовойинкубации при 37 С среду в чашках обрабатывают 2%-ным раствором краснойкровяной соли, промывают спиртом, обрабатывают 1%-ным раствором железоаммиачных25 квасцов, промывают водой и замеряют зоныроста под фонарем. Сульфгидрильные группы,образующиеся в присутствии витамина В,восстанавливают трехвалентное железо вдвухвалентное, которое дает с красной кровя 30 ной солью синее окрашивание,Корректор Е. Миронова Редактор Л. Василькова Заказ 2955/14 Изд. Ио 1736 Тираж 456 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 Расчет концентрации витамина В. производят по таблицам В. С. Дмитриевой.Концентрация витамина В в исследуемом растворе должна быть в пределах 0,02 - 0,8 мг/л.Предмет изобретения 1, Способ определения концентрации витамина В,з путем диффузии раствора в агаризованную среду с витаминно-зависимым штаммом с последующим выявлением зон роста тест-культуры и замером их диаметра, отл ич а ю щи й с я тем, что, с целью ускорения хода определения, питательную среду засевают 5 ауксотро 5 ным штаммом Аго 1 оЬас 1 ег зц 1 з,2. Способ по п. 1, отличающийся тем,что, с целью повышения четкости и точности определения, зоны роста окрашивают красной кровяной солью и железоаммиачными квас цами.
СмотретьЗаявка
901441, 22.05.1964
И. С. Родынюк, Н. А. Круглое, Д. Ф. Петров, Ю. В. Рапопорт
МПК / Метки
МПК: C12Q 1/06
Метки: витамина, концентрации
Опубликовано: 15.06.1974
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-432192-sposob-opredeleniya-koncentracii-vitamina-vo.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения концентрации витамина во</a>
Предыдущий патент: Установка для осветления вин и тому подобных продуктов в потоке
Следующий патент: Способ постановки серологических реакций
Случайный патент: Способ определения скоростиультразвука