Способ получения терефталевой кислоты

дссВ 1 В 11 тфвттИО- т 4 аблиот уг,; ОП И И 11 4195 О 9ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(51) М. Кл С Г 1 РИСОСДИПСИИС 3251 ВК 1 осударственныи комитетСовета Министров СССРпо делам изобретенийи открытий 2) Ириоригст 3) УДК 547.584.0(72) Авторыизобретения Е. Л, Головлев, Л. А. Головлева, Г. К, Скрябин, В, Н Л, В, Андреев, 3. И. Финкельштейн и В. И. Кру Институт биохимии и физиологии микроорганизмовулакко СССР аявитель 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТгРЕФТАЛГВОИ КИСЛО 2 ясо20 51 СРС оиСО ониох 1 х,8 скрив РИЫС сОС, НО сада Изобретение относится к способам получения тсрсфталсвой кислоты микробиоло; ичсским путем.Известен способ получения терсфталсвой кислоты Окислснисм и(силола хрохОВО 1 кис лотой, щслочнык растг 1 орох 1 псрх 12 пганата калия или кислородом воздхха под давлением при высокой температуре. Услови 5 Окисления жесткис и нередко при окислении образуются побочные продукты. 10С целью упрощения процесса прсдлоткси способ получения тсрсфталсвой кислоть И 5 тсмикробиологической трансформации 1-кс лола с помощью активной культуры из рода .чосагс 112, которая проводит прямОс окисление 15 и-ксилола в тсрсфталсвую кислоту.Характсристика штамма Хосагс 1 а рсс 1 св 1 А Культуральиыс своиства.На обычных питательных средах ( пспто 1 шый агар, сусло-агар, миисральиа да с глюкозой) даст солонин розово-ох го цвета, гладкие, блестящие, вьшуклысМорфологические свойства.Размер клеток при росте на мясо-псит бульоне у 24-часовой культуры 0,15 - 10 р. Клетки иалочковидныс, слегка и ленные, с неровными контурами, ангул формы ярко выражены, ветвление ред. отчетливое. На 2 - 3 сутки культура ра ется на кокковидиые фрагменты диаметром 0,5- 1,0 .Физио ого-биохихические свойства.Аэроб растет при температуре 15 - 37 С, оптимум около 28 С, в диапазоне рН 5 - 9.Ооладаст 21 тИпОй саталазиой активностью.ТВин - 40 гидролиЗст.Жслтину нс разжижает, крах 12 л, клстчатку, казсии ис пдролизуст, иитраты рсдуцируст.Ассимилирует без кислотообразоваиия следующие углеводы: гл 1 окозу, галактозу, ксилозм, аробииозм, сахарозм, мальтозм, трсгалозу, лактозу, рас 11 Ч)ииозу, машшт, сорбит.Ассимилирует глицерин, этанол, ацетат, пропионат, бутират, сукцинат, цитрат, н-алканы: с ноиаиа по гептадскан, олефин, додецен, изопарафии, сквалан.).с ассимилирует пальмитат, бснзоат, салицилат, ИИ 1 сотинат. фсиол, пирокатсхии, рсзорцин, нафталин, мстил-ииридшы.В качестве источников азота усваивает нитиит 13 аты, 25110 ин 1,с соли, к 0 свину, аспарапш, псптои, гидролизат казсина. На среде без источника азота нс растет.Ио своим морфологичсским и физиологобиохимичсски.1 1 ризнака.5 Култ 1 ра Олизса к виду .хосагс 112 1 оЗсгиа (бгау928), ио отличается тем, что колонии ис слизистые, клетки несколько:,1 сльчс, растет при 37, фенол не419509 Предмет изобретения Составитель Г. Лавриненко Редактор Л. Емельянова Техред 3. Тараненко Корректор Н. УчакинаЗаказ 1863 10 Изд. ЛЪ 386 Тираж 506 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 использует, трансформирует п-ксилол в соокислительных условиях до терефталевой кислоты.Данную культуру выращивают на средах, содержащих источники углерода (углеводороды), азота и минеральные соли. Процесс осуществляется при атмосферном давлении, при температуре 28 - 30. Окисление идет строго специфически и без образования побочных продуктов.П р и мер 1, Культуру 1 х(осагйа зр. шт, 1 А поддерживают на сусло-агаре, выращивают в течение двух суток и суспензию выросшей культуры засевают в конические колбы на 800 мл с жидкой средой Л, разлитой по 160 мл. Состав среды (г,гл):2,0КН,РО 4 0,1 К 2 НРО 4 1,0 МфО, 7 НО 0,5 МаС 1 0,1Вода дистиллированная до 1 л,гексадекан добавляется дробно 3 дня в количестве 10 г/л.Через 24 час после инокулирования в среду вносят 0,6 г гг-ксилола, через сутки еще 0,6 г и через сутки еще раз 0,6 г а-ксилола. Процесс трансфорниации прослеживают с помощью хроматографии. Окисление прекращают на пятые сутки, Для выделения терефталевой кислоты культуральную жидкость, освобожденную от клеток, подкисляют соляной кислотой, упаривают досуха в вакууме на роторном испарителе, Сухой остаток промывают смесью эфира и холодного метанола для удаления парафина и других эфиро- и спирторас творимых веществ и метилируют диазометаном в смеси эфир: метанол (1: 1). Образовавшийся метиловый эфир терефталевой кислоты экстрагируют эфиром и гидролизуют кипячением в 1 н. растворе КаОН, Гидролизат под.10 кисляют концентрированной соляной кислотойдо кислой реакции на бумагу конго. Выделившуюся терефталевую кислоту отсасывают на воронке Бюхнера и сублимируют.Терефталевая кислота была идентифициро вана как непосредственно в культуральнойжидкости, так и после ее выделения. Идентификацию проводили методом газовой хрома тографии, а также тонкослойной хроматографией на силикагеле и окиси алюминия.20 УФ-спектры выделенной кислоты и чистогогродажного препарата были полностью идентичны (1.,ах 240 - 241 гггр в растворителе: аммиак - изопропиловый спирт 6: 1, вовах 242 - 243 пгр в диоксане).25 Спосоо получения терефтал свой кислотыокислением п-ксилола, о т л и ч а ю щ и й с я 30 тем, что с целью упрощения процесса, окисление ведут с помощью микроорганизмов рода Хосагйа.