Способ выделения микроорганизмов

(21 ве- ием УОдЫНСОИН глеводо1 о С 16тому упя проце одныи радикал Благодаря эенсифицируетс щается и .инвылеления.держащих ГОСУДАРСТВЕН НОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР 9856/13(71) Всесоюзный научно-исследовательский йнститут биосинтеза белвых веществ и Всесоюзный научно"исследовательский. и проектный институт синтетических жирозаменитлей(54).(57) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ МИКРОГАНИЗМОВ, например дрожжей, из Изобретение относится к микробигической промышленности.Известен способ выделения микроорганизмов, например, дрожжей, изсодержащей углеводороды культуральной жидкости, полученной послеих выращивания, путем введения вжидкость поверхностно-активногощества с последующим сепарировансмеси,По предложенному способу выделения микроорганизмов в качестве поверхностно-активного вещества исполь",зуют сульфоуреид, имеющий следующуюформул 2держащей углеводороды культуральной жидкости, полученной после их выращивания, путем введения в жидкость поверхностно-активного вещества, с последующим сепарированием полученной смеси, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения и интенсификации процесса выделения. в .ка честве поверхностно-активного вещества используют сульфоуреид, имеющий следующую формулу:КЯОИНСОИН.де 1) - УглевоДоРоДный РаДикалС 1 о -С 18 В состав сульфоуреида входят следующие вещества, мас.3,Сульфонилмочевина 65-68Гидрохлорид мочевины 20-22Мочевина 12-13Углеводороды 0,6-0,8Внешний вид препарата - паста желотого цвета, удельный вес при 20 С1,13-1,16 г/см, рН 1-ного водногораствора 4,5-5,5.Способ выделения микроорганизмовсостоит в следующем,Дрожжи культивируют в аппаратахемкостью 30 л и 17 м с перемешиванием и аэрацией на водной минеральной среде, содержащей в качестве источника углерода нефтяные углеводороды.Водная питательная среда состоит из раствора солей, со5СоставительТехред М,Моргентал Корректор Т.Палийе Редактор Е. Гиринская Заказ 4571 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-. издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул . Гагарина, 101 3 32874 ионы аммония, Фосфора, калия и маг-ния, микроэлементы.Процессы осуществляют ецностагийным способом при температуре 28- 34 С, рН 3,5-7,0, аэрации 30- 100 об/об ч. В ферментер непрерывно подают питательную среду и в таком же количестве отбирают суспензию микробных клеток. Коэффициент раз О бавления среды 0,1-0,33 час , концентрация нефтепродуктов 10-254. В сборнике собирается суспензия микробных клеток, и через 10-20 мин. происходит расслоение суспензии на два слоя - нижний водный и верхний "дрожжевые сливки" (эмульсия микробных клеток в смесй топлива и воды), Нижний слой отработанной культуральной жидкости декантируют. При культивировании дрожжей с концентрацией топлива 10-254 отделяется 50-70 отработанной среды. Верхний слой содержит 150-200 г/л биомассы. К нему добавляют 104-ный водный раствор технического сульфоуреида, перемешивают и сепарируют,Условия разделения следующие: 28-80 С (оптимальная 45 С), рН 35- 7,0, концентрация сульфоуреида 0,1 в ЗО 0,4 мас,1. После сепарации получают биомассу, содержащую 25-303 сухого вещества, дизельное топливо и водную часть с непотребленными минеральными компонентами, продуктами метаболизма.П р и м е р, Непрерывный процесс культивирования дрожжей вида СапйЫа во.11 ешопйх осуществляют в ферментере емкостью 17 мз с эжекцион О ной системой аэрирования на водной питательной среде, содержащей в пересчете на 1 г абсолютно сухих дрож" жей 80 мг азота, 48 мг Р 20, 10 мг 54калия, 1 мг магния, 0,04 мг железа, 0,08 мг марганца, 0,09 мг цинка, 0,01 мг меди, Рзот подают в виде раствора аммиака, которым поддерживается одновременно рН среды, фосфор . в виде ортофосфорной кислоты (уд.вес.1,5-1,6), калий хлористый, магний и соли микроэлементов - сернокислые,Процесс ведут при рН 3,5-4,5, температуре 31-34 С и коэффициенте разбавления среды 0,1 часВ качестве источника углерода ис- . пользуют фракцию 240-350 С Мангышлак- ской нефти с содержанием комплексо- образующих углеводородов 304. Концентрация фракции в среде 104. Суспензию, выходящую из Ферментера;.с концентрацией 24 сухих веществ направляют в декантатор непрерывного дей- . ствия для отделения части водной питательной среды, Время пребывания в декантаторе 15 мин, количество отделенной водной фазы 503, Верхнюю часть ("дрожжевые сливки") с концентрацией сухого вещества 44.и концентрацией дизельного топлива 183 смешивают в аппарате с мешалкой с 0,23 сульфоуреида, нагревают до 50-55 С при рН 4,5 в течение 30 мин и направляют в сепаратор.Сепарацию проводят в одну стадию на трехколенном сепараторе. После сепарации получают прессованные дрожжи, содержащие 18,53 сухого вещества и 7 дизельного топлива. Эти дрожжи направляют на распылителвную сушилку. Содержание остаточного дизельного топлива в сухих дрожжах,.2,5 Ф, влаги 5 В. Сухие дрожжи после двукратной обработки смесью 106 этилового спирта с 90 экстракционного бензина (1:5) содержат .( 0,1 остаточных углеводородов.