Способ определения чнсла аминокислотных остатков в молекулах белков
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
ОПИСАН ИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУЗОЗ 5 б 9 Союз Советских Социалистических Республикс присоединением зая Приоритет Комитет по деламизобретений и открытДата опубликования описания 14 Х 11.19 Авторыизобретения и А. Н. Никити емче 3 аявител ПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧИСЛА АМИНОКИСЛОТНЫХ ОСТАТКОВ В МОЛЕКУЛАХ БЕЛКОВконстанту скоТ = ехр наодя Здесь .ная ПлаЛ 5 - энтурации,люминесц, й - число Лвог па; 1 - газовая альпия и энтропияЖ.о - разность енции девать риро постояннная, ХН, ции дена- максимум и нативадро и постоя актива между ванного 1 пК(Т)опка. В координатах юго Изобретение относится к физико-химическим способам исследования биологических объектов и моакет, в частности, применяться для определения молекулярного веса белка и наблюдения за изменениями конформации белка,Известен способ определения числа аминокислотных остатков в молекулах белков, заключающийся в том, что белки гидролизуют растворами минеральных кислот в течение 12 - 120 час с последующим хроматографированием полученных гидромезатов. Известный способ длителен и трудоемок.С целью упрощения анализа, предлагается способ, заключающийся в том, что децатурируют белок мочевиной, измеряют зависимости смещения максимума его спектра люминесценции от времени при разных температурах, по найденным из этих измерений константам скорости, измерив степень спираль- ности, вычисляют энтальпию активации денатурации и, зная энтальпию, определяют искомое число.Определение числа аминокислотных остатков в молекуле белка проводят следующим образом; белок химотрипсин помещают в образцовую кювету в обычной схеме наблюдения люминесценции с фотоэлектрической регистрацией и действуют на него денатурирующим агентом - 6 М раствором мочевины, разрывающим внутримолекулярные водородные связи в структурированнои, спирализованной части молекулы и приводящими к образованих межмолек лярных внених связей с этим агентом, Затем измеряют смещение максимума спектра люминесценции белка во времени при нескольких фиксированных температурах. Денатурация - конформационный переход, соответствующий реакции первого порядка, поэтому смещение ЛХ(т) максимума спектра люминесценции пропорционально концентрации денатурированного белка, т. е.А 1 Р) Ц (1 - кти) (1)(3) Составитель Бердник Редактор В. ф. Смирягина Техред А, А, Камышникова Корректоры: Н, В. Воробьева и Е, В, Исакова.аказ 1750/1 Изд,728 Тираж 473 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 ределяют тангенс угла наклона прямой, равный ХН, которая в случае химотрипсина ЛНЯТ (Зная среднюю энтальпию Лд разрыва внутримолекулярной водородной связи, например, в глобулярных белках (Ад=1,4 ккал,поль находят число разорванных свя- зей Определяют степень спирального белка т 1, которая, по данным оптического вращения, для химотрипсина составляет 15%, и, учитывая, что на какдый аминокислотный остаток приходятся две водородные связи, находят число аминокислотных остатков и Единица в формуле (3) появляется за счет несвязанного концевого остатка.Определив число аминокислотных остатков и зная их средний молекулярный вес, находят средний вес М химотрипсина, Найденное таким образом число аминокислотных остатков в точности совпадает с действительным числом их в химотрипсине, определенным известными методами, а молекулярный вес, по данным разных авторов, 15000 - 25000; 21000 - 25000; 22500 - 23000. 10295298301,5303,5306 Способ определения числа аминокислотныхостатков в молекулах белков, отличающийся 20 тем, что с целью упрощения анализа, белковый раствор обрабатывают мочевиной, с помощью люминисцентного метода определяют количество денатурированного белка, измеряют степень спиральности нативного белка, 25 и по полученным данным судят о числе аминокислотных остатков в молекуле исследуемого белка.
СмотретьЗаявка
1232164
В. В. Демченко, А. Н. Никитин
МПК / Метки
МПК: G01N 21/64, G01N 33/52
Метки: аминокислотных, белков, молекулах, остатков, чнсла
Опубликовано: 01.01.1971
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-303569-sposob-opredeleniya-chnsla-aminokislotnykh-ostatkov-v-molekulakh-belkov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения чнсла аминокислотных остатков в молекулах белков</a>
Предыдущий патент: Установка для исследования структуры металлов
Следующий патент: Способ атомно-абсорбционного анализа
Случайный патент: Рабочий орган роторного экскаватора