285631

63 ОП ИСАИЗОБРЕТЕНИЯ Свез Советскил Социалистическиз РеспубликК ПАТЕНТУ Кл, 6 Ь, 16/03 явлено 07,111,1969 ( 1312143/2 Комитет оо делам изобретений и открытий при Совете Министров ССР(Япония)Иностранная фирмаКийова Хакко Когио Компани(Япония) саки Ямамото внтель мит СОВ ПОЛУЧЕНИЯ 1-ГЛУТАМИНОВОЙ КИ Зависимьш от патентаНастоящее изобретение относится к микробиологической промышленности и касается микробиологического способа получения -глутаминовой кислоты на углеводородных средах.Известен способ получения 1-глутамиповой кислоты культивированием штаммов Вге 11 Ьас 1 епцгп и СогупеЬас 1 епцгп в аэробных условиях в водной питательной среде, содержащей углеводороды в качестве основного источника углерода, в частности газообразные углеводоро ды, н-алканы, керосин и т. п. источники азота и неорганические соединения.При осуществлении предложенного способа используются штаммы ВгеиЬас 1 епшп рага 111- по 1 у 11 сцт АТСС 21195, ВгеиЬас(епцш Ьц 1 аш сцгп АТСС 21196, СогупеЬас 1 епцгп а 11 апцгп АТСС 21194, способные ассимировать газообразные углеводороды в качестве основного источника углерода и обеспечивать при этом высокий выход 1-глутампновой кислоты. 20Ниже приведены биологические характеристики предложенных штаммов.СогупеЬас 1 епцгп а 11 апцгп,Морфологические свойства. Короткие ;илочки, разветвленные клетки или клетки типа 25 прерывистой конденсации, Размер клеток 0,5(2,5 лтк. Неподвихкные. Спор не образуют. Грам - положительные. Неустойчивые к кислотам. Культуральные свойства, Агар-агар. Средний рост, круглые, гладкие, сплошные, выгнутые, желтовато-серые, блестящие и мутные. Косой агар. Средний рост, блестящие, нитевидные, желтовато-серые, без запаха. Питательный бульон. Рост слабый, умеренная мутность. Желатин. Рост ца поверхности слабый или отсутствует. Желатин не разжихкается.Физиологические свойства. Оптимальная температура 25 - 30 С (слабый рост при 35 С). Оптимальный рН 5,0 - 9,0 (нет роста прп р 11 4,0). Потребление кислорода, Аэробное. Лакмусовое молоко. Не меняется или щелочное. Сероводород. Образуется. Индол. Не образуется, Крахмал. Не разлагается. Из нитратов образуются нитрпты. Каталаза, Положительная, Получение аммиака. Положительное. Тест Вога -- Проскоуэра, Отрицательный, Потребление сахаров. Кислота образуется из глюкозы, фруктозы, маннозы, сахарозы, лактозы, мацнита и сорбита.Ассимиляция углеводородов. Ассимилирует пропав, н-бутан, н-додекац, н-тридекан, н-тетрадекац, н-пентадекан, и-гексадскац и н-гепта декан.ВгелЬас 1 сггцтп Ьц 1 ап 1 сцгп имеет те же морфологические свойства, за исключением размеров клеток (10,о - 3,0,як), те же фпзиолоп 1- ческие свойства, кроме следующих характери285631 40 Предмет изобретения 45 50 Составитель Г, Голева Техред Т. П. Курилко Редактор А. Б. Бер Корректор Г, С. Мухина Заказ 3796 3 Тираж 480 Подп 1 сноеЦНИР 1 П 11 Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Мш:истров ГССРМосква, Ж, Раугиская ваб., д. 45 Сапунова, 2 Типография,пр. стик. Получение аммиака. Отрицательное, Потребление сахаров. Кислота образуется из глюкозы, фруктозы, арабинозы, маннозы, сахарозы, ксилозы, маннита и сорбита. Ассимиляция углеводородов. Ассимилирует пропан, н-гутан, н-декан, н-ундекан, н-гептедеканы.Агар-агар, Обильный рост, колония круглая, гладкая, сплошная светло-коричневая, матовая, тусклая. Косой агар. Обильный рост, колония тусклая, светло-коричневая, без запаха, скользкая. Питательный бульон. Колония на поверхности дисковидная, почти прозрачная, осадка нет, Желатин. Рост лучше в верхней части, чем в нпхкней, желатин не разжижается.ВгечЬас 1 епшп рагаП 1 по 1 у 11 цгп имеет те же морфологические свойства (размер клеток 0,5 - 2,5 - 3,0 лск), те же физиологические свойства, что и В. Ьи 1 ап 1 сцгп, за исключением следующих характеристик, Утилизация сахаров. Кислота образуется из глюкозы, фруктозы,сахарозы, лактозы, маннита и сорбпта. Ассимиляция углеводородов. Ассимилирует пропан, н-бутан, к-ундекан, н-гептадекап, Культуральные свойства. Агар-агар. Обильный рост, колония круглая, гладкая, сплошная, выгнутая, светло-розовая, блестящая и матовая. Косой агар, Обильный рост, культура нитевидная, блестящая, желтовато-серая, без запаха, слизистая, Питательный бульон, Рост на поверхности слабый, умеренная мутность. Желатин, Р;.ст па:.о е,хностп сл.-.бый илп отсутствует, желатин не разжижается.Штаммы хранятся в американской коллекции культур.В качестве источника углерода используются газообразные углеводороды: этан, пропан, изопропан, н-бутан, вгор-бутан, изобутан, трет- бутан; жидкие углеводороды С; - С,; и-пентан, к-октан, н-декан, н-додекан, к-гексадекан, изопентан, изооктан; циклопарафины: циклогексан, циклооктан; олефины: пентен, гексен, октен, октен; циклоолефины: циклогексан; ароматические углеводороды: бензол, изомеры ксилола; смеси углеводородов; керосин, легкие и тяжелые масла, парафинистая нефть.В среду мокно добавлять дополнительные источники углерода, например сахара, низко- молекулярные спирты и кислоты. Источники азота могут быть неорганическими (соли аммония) и органическими (кукурузпая барда, дрожжевой экстракт и т. п,). К неорганическим соединениям относятся сульфат магния,5 10 15 20 25 30 35 фосфат натрия, кислый и средний фосфаты калия, сульфат железа, хлориды марганца, кальция, натрия, сульфат цинка. Процесс ферментации ведут при 20 - 50 С и рН 4 - 9. Если используют газообразные углеводороды, их подают в среду в смеси с воздухом или кислородом, Для увеличения скорости ферментации в среду можно добавлять небольшие количес 1 ва пеутилизируемых углеводородов или поверхностно-активных веществ.Выделение-глутаминовой кислоты из культуральной жидкости проводят любым известным способом.П р и м е р 1. Посевную культуру штамм СогупеЬас 1. айапшп АТСС 21194 выращивают в аэробных условиях при встряхивании в течение 24 час па среде следующего состава, в/о: 0,5 мясного хлористого натрия; 0,2 сорбита; 0,25 дрожжевого экстракта; рН 7,2. Полу- ценной культурой засевают предварительно стерилизованную среду ферментации, в которую входят 0,05% КНгРО; 0,05% ЕагРО 12 НгО; 0,01 /о Мд 0, 0,001 вв МпЯО 4 НгО;0,00 ов ЕеЯО 7 НгО; 0,001% Хп.О 7 НгО;0,001% СаС 1 г 2 НгО; 10 у/л НвВОз 10 г/.г ХагМоО, 2 НгО; 50 у/л СцЯО 5 НгО; 1 О у/л СоС 1 г 2 НгО; 50 у/л Х 1 С 1 г.6 НгО; 0,05% кукурузной барды; 1,5% (М 1-1)гБО рН 5,2.Среду аэрируют смесью и-бутана с воздухом в соотношении 1:1 по объему. Ферментац;по ведут в 5-литровом фепментепе при 30 С, скорости перемешивания 600 об,лин, под" че,азовой смеси 1 л/хл/,1 п,",. Через 96 чстс накапливается 18 лг/л /-глутаминовой кислоты.П р и м е р 2. Процесс ведут так же, как в примере 1, только с культурой В. Ьц 1 ап 1 сцгп АТСС 21196. Получат 15 лг/л Е-глутаминовой кислоты. Способ получения /-глутаминовой кислоты культивированием штаммов Вгеу 1 Ьас 1 ег 1 цп; и СогупеЬас 1 епцгп в аэробных условиях в водной питательной среде, содержащей углеводороды, например газообразные, в качестве основного источника углерода, источники азот а и неорганические соединения, отлиааощийся тем, что, с целью повышения выхода продукта используют штаммы СогупеЬас 1 ег 1 цгп а 11 апшп АТСС 21194, ВгеиЬас 1 ег 1 цгп рагац 1 по 1 у 11 сшп АТСС 21195, ВгеиЬас(ег 1 цгп Ьц 1 ап 1 сшп АТСС21196.