Способ выделения ацетилхолинэстеразы из тканимозга
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
267815 ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Соеетских СоциалистическихРеспублик Зависимое от авт. свидетельстваКл. 301 т, 2/04 Заявлено 20,Х 1.1968 ( 1290831/31-16)с присоединением заявкиПриоритетОпубликовано 02.17.1970. Бюллетень13Дата опубликования описания 24 Х 11,1970 МПК А 611 Комитет по делам изобретений и открытий при Сосете йлииистрсе СССРЗаявитель Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М, Сеченова СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ ИЗ ТКАНИ МОЗГАИзобретение относится к области биохимии.Известен способ выделения ацетилхолинэстеразы из лиофильно высушенного порошка ткани мозга с помощью детергента, например, путем обработки бутанолом с последующей экстракцией фосфатным буфером. Однао получаемые при этом препараты обладают сравнительно невысокой стабильностью ц ак- явностью.Целью настоящего изобретения является повышение эффективности извлечения фермента и получение активных стабильных препаратов.Для достижения этой цели при выделении ацетилхолинэстеразы из лиофильно высушечного порошка ткани мозга с помощью детергента лиофильно высушенный порошок обрабатывают смесью детергента с растворителем жиров, например октанола с гексаном, в отношении 1: 1.Согласно предложенному способу сырую ткань мозга теплокровных животных (хвостатые ядра бычьего мозга и мозга кошки) или хладнокровных животных (рыб, моллюсков отделяют от остатков других тканей, измельчают, гомогенизируют в небольшом объеме воды, доводят рН до 8 аммиаком и лиофильно сушат, Сухой порошок обрабатывают 20-кратным количеством смеси детергента и растворителя жиров, например октанола с гексаном, в течение 15 мин, дают отстояться и сливают верхний слой. Затем обрабатывают повторно 10-кратным количеством смеси раст ворителей, вновь отстаивают ц сливают верхний слой, а осадок трижды промывают гексаном, Остаток сушат в вакууме, экстрагцруют водой или 0,01-м фосфатным буфером (рН 7,8) ц центрцфугцруют. Ацетцлхолцнэ стераза переходит в раствор в количестве 60 -700,Растворы препарата, полученные цз тканимозга теплокровных животных, неустойчивы в кислой среде, ц поэтому цз нцх необходимо 15 удалить балластные белки путем фракццонирования сульфатом аммония прц рН 6,5 - 6,8.Прц концентрации сульфата аммония 25",/, выпадают балластные белки, а прц 5000 в осадок переходит ацетцлхолцнэстераза.20 Этот осадок отделяют центрцфугцрованцем ирастворяют в дистиллированной воде. Прц использовании растворов, полученных из мозговой ткани хладнокровных животных, балластные белки отделяют сначала добав ленпем соляной кислоты до рН 4,5, а затемсульфата аммония до концентрации 60%.Ацетилхолинэстераза выпадает в осадок прц концентрации сульфата аммония 80%.Полученные водные растворы ферментов, Зо освобожденных от балластных белков, обраЗаказ 1787/5 Тираж 480 ПодписноеЦ 1-1 ИИПИ Комитета ло делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 батывают аммиаком до рН 7,8, центрифугируют, и прозрачные растворы обессоливают на молекулярных ситах или диализом, После стериального фильтрования растворы разливают в ампулы или лиофильно высушивают,Предмет изобретения Способ выделения ацетилхолинэстеразы изткани мозга с помощью детергента, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности извлечения фермента и получения активных стабильных препаратов, лиофильно 5 высушенный порошок ткани мозга обрабатывают смесью детергента с растворителем жиров, например октанола с гексаном, в отношении 1: 1.
СмотретьЗаявка
1290831
Институт эволюционной физиологии, биохимии И. М. Сеченова
МПК / Метки
МПК: A61K 38/43
Метки: ацетилхолинэстеразы, выделения, тканимозга
Опубликовано: 01.01.1970
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-267815-sposob-vydeleniya-acetilkholinehsterazy-iz-tkanimozga.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения ацетилхолинэстеразы из тканимозга</a>
Предыдущий патент: Способ получения хлорйфйлло-каротйновой пасты
Следующий патент: Способ получения масляного концентрата каротина
Случайный патент: Проходная термическая печь с пламенной завесой