Способ определения активности протеолитическихферментов
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 190851
Авторы: Всесоюзный, Полыгалина, Рухл, Спиртовой
Текст
19 О 851 ОПИСАНИЕ Союз Советскит Социалистическит РеспублинВТОРСИОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Загисимое от авт. свидетельства ЪвЗаявлено 01,Х.1965 (ЛЪ 1035112/28-13)с присоединением заявкиПриоритет л. 6 а, 2210 Комитет по аелам зооретений и отнрытий при Совете Министров СССР",зоб ретения Пол ыгалииа П. Рухлядева и сесоюзный научно-исследовательский институт ферментной и спиртовой промышленностиЗаявитсль ОЛИТИЧЕСКИХ ЕНИЯ АКТИВНОСТИ П ФЕРМЕНТОВСПОСОБ ОП ля бактериальных П 0 188епаратов и - 14,528 епапата в принятых ктпвностьдиницах; Известны способы определения активностипротеолитических ферментов по степени гидролиза белка. Так, согласно одному из них,на белковый субстрат действуют растворомферментного препарата, после чего определяют оптическую плотность раствора гидролизата по интенсивности окрашивания присутствуюгцего там тирозина с реактивом Фолина.По найденному значению оптической плотности судят о степени гидролиза белка,Предлагаемый способ по сравнению с извстными дает более точные результаты определения, он проще и быстрее.Сущность его заключается в том, что обактивности протеолитических ферментов судят по общему количеству продуктов гидролиза белка, определяемому на интерферометре по разности показателей преломления между гидролизатом и контрольным раствором1 эталоном). Оба раствора перед определенисм разности их показателей преломления освобождают от непрогидролизованного белкаодним из известных способов, например, путем осаждения раствором трихлоруксуснойкислоты с последующей фильтрацией, 25Предлагаемый способ заключается в следующем,На 1%-пый раствор белкового субстрата,например казеина, действуют фгрментнымраствором (в соотношении 2: 1) в течение 30 3 лшн прп 30 С. Затем к реакционной жидкости добавляют 4%-ный раствор трнхлоруксусной кислоты для инактивации фермента и осаждения непрогидролизованного белка. Одновременно ставят контрольный опыт, для чего исследуемый ферментный раствор пнактивируют 4%-ным раствором трихлоруксусной кислоты и приливают 1%-ный раствор субстрата, при соблюдении количественного соотношения, указанного выше.Оба раствора выдерживают при 30=С в течение 15 лшн для обеспечения полноты осаждения белка, после чего фильтруют. В прозрачном фильтрате определяют разность преломления исследуемого и контрольного растворов на интерферометре, По полученному значению разности показателей преломления (Ьп) судят о протеолитической активности фермента, подставляя это значение в следу-, ющее уравнение:для грибных препаратов0,1702 1 и - 10,2133Заказ 196/4 Тираж 535 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, д. 2 и - количество взятого для протеолиза препарата в г;Ли - разность показателей преломления;0,1702; 10,213; 0,1881; 14,528 - постоянные коэффициенты, найденные экспериментальнымм путем. Предмет изобретенияСпособ определения активности протеолитических ферментов по степени гидролиза белка, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения и ускорения процесса, степень гидролиза белка определяют по общему количеству прогидролизованных продуктов, устанавливаемому на интерферометре 5 по разности показателей преломления междугидролизатом и контрольным раствором (эталоном), при этом оба раствора перед определением разности их показателей преломления освобождают от непрогидролизованного бел ка одним из известных способов, напримерпутем осаждения раствором трихлоруксусной кислоты с последующей фильтрацией.
СмотретьЗаявка
1035112
А. П. Рухл дева, Г. В. Полыгалина, Всесоюзный научно исследовательский институт ферментной, спиртовой промышленности
МПК / Метки
МПК: C12Q 1/38
Метки: активности, протеолитическихферментов
Опубликовано: 01.01.1967
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-190851-sposob-opredeleniya-aktivnosti-proteoliticheskikhfermentov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности протеолитическихферментов</a>
Предыдущий патент: Штамм плесневого гриба aspergillus usam1i-394
Следующий патент: Чежгягческая •§»ь”: атгка
Случайный патент: Фильтр-отсекатель ствола скважины