Штамм бактерий bacillus тнuringiеnsis для изготовления энтомопатогенного препарата

)5 А 01 й 63/00, С 12 й 1/ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТВЕДОМСТВО СССР(ГОСПАТЕНТ СССР) 1 ф")фиЙ,идг.в.т.фф- , ф ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ тивного провввЪ(71) Институт зоологии АН КазССР (72) А.М,Дубицкий, У.Б.Узденов, В,Н.Давыдов, Н.Э,Березина, Т.С,Кобец, Тина-тин До- олеткельдиева и Г.В,Семенченко (56) Авторское свидетельство СССР . М 1135024, кл, А 01 И 63/00, 1980; . (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ ВАСШ)3 ТН 181 МИЕКЙЯ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННОГО ПРЕПАРАТА (57) Использование: микробиологическая промышленность, производство энтомопаИзобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой новый штамм бактерий, который может быть использован для производства препарата, применяемого для борьбы с кровососущими комарами и саранчовыми,Для борьбы с вредителями сельского и лесного хозяйства широко примейяют штаммы Вас 1 из Йигп 91 епз 1 э. Известны штаммы В. Йцгпд 1 епзз, обладающие ларвицидными свойствами для личинок кровососущих комаров..Однако среди большого числа вредных насекомых, поражаемых всеми известными штаммами В. йогпдепз 1 з нет представителей прямокрылых - саранчи, вредоносное значение которых нет необходимости доказывать.Прототипом предлагаемого изобретения может служить штамм В. йвгпд 1 епзз (Н) М 71, являющийся основой для изготовления препарата бактокулицида, эффектогенных препаратов для борьбы с кровососущими комарами и саранчовыми и касается нового штамма бактерий для производства вышеуказанных препаратов. Сущность изобретения: штамм бактерий Васцз йигад 1 епэ 1 з выделен из погибшей личинки комара Со 1 ех р 1 р 1 епз, депонирован в ВКМ генетики под М В. Для изготовления препарата штамм выращивают на среде (мас,7 ь): кормовые дрожжи 2; пептон 5; кукурузная мука 1; хлористый натрий 0,5; однозамещенный фосфорнокислый калий 0,1; вода до 100;4, при 28 С в течение 28-30 ч, титр спор после культивирования 2,3 109 спор/мл. тив личинок кровососущих комаров.Однако этот штамм действует только на одну группу. насекомых.Целью изобретения является штамм В, 1 Ьогпд 1 епзз,обладающий высокой энтомо цидной активностью по отношению к крово- О сосущим комарам и к таким злостным фь. вредителям сельского хозяйства как саран- ф, човые, бдШтамм Л,БКвыделен в 1988 г, из ф, погибшей личинки комара СШех рр 1 епз.Штамм Васоз йцгпд 1 епз 1 з ЛБКдепонирован в коллекции Центрального музея промышленных микроорганизмов ВНИИ генетика под номером Ви характеризуется следующими морфологическими и физиолого-биохимическими свойствами.Вегетативные клетки палочковидной формы, подвижные, одиночные или в цепочках, размером (3,0-5,5) х (0,8-1,2), перитрихи, споры овальные, размером (1,2 - 1,7) х1794434 По физиологическим свойствам отличается от В, йшгп 9 епээ Нтем, что усваивает салицин и эскулин, не образуетпигмент, По инсектицидной активности от 5 личается тем, что заявляемый штамм действует не только на личинок кровососущихкомаров, но и на саранчовых.П р и м е р. Штамм В, йвгп 9 епээЛБКкультивировали на с;реде следую 10 щего состава; кормовые дрожжи 2 (мас,/,);пептон 5; кукурузная мука 1; КаС 0,5;К 2 НРО 40,1, вода до 1000 мл, Конечная реакция среды рН,2,В качестве посевного материала ис 15 пользовали водную суспензию споровой 3 дневной культуры, которую вносили в 0,5 лколбы; содержащие 50 мл среды, Культивировали на круговой качалке при 220 об/мини+ 28 С в течение 28 - 30 ч. Титр спор, под 20 считанный с помощью камеры Горяева, находился в пределах 2,3 10 спор/мл.Отношение к источникам азота. Использует аммонийные и нитратные формы азота,Нитраты восстанавливает. Усваивает азотные соединения, входящие в состав кукурузного экстракта, мясной воды, пептона.Условия хранения - в виде лиофильновысушенной культуры в запаянных ампулах,Патогенность для личинок комаров изу 30 чалась на-стадии Сцех ррепэ, Аедеэаецрту, АпорЬееэ втерЬепэ. В 100 мл водыпомещали 25 личинок и вносили суспензиюклеток и спор испытуемого штамма, Результаты гибели отмечали через 24 и 48 ч,35 Патогенность штамма для саранчи проверялась на насекомых И стадии, помещенных в проволочные садки по 5 особей,Листья растений обрабатывали суспензиейклеток и спор бактериальной культуры и40 скармливали саранче. Затем обрабатывали,подкармливали необработанными растени-.ями, Наблюдения проводили в течение 7суток,Штамм, выбранный в качестве прототи 45 па, эффективен только против личинок комаров, Предлагаемый штамм вызываетгибель и личинок комаров и саранчи. 50 Формула изобретенияШтамм бактерий Васиэ1 Ьцгп 9 епзэ ВКПМ Вдля55 х(0,7-1,1), спорангии не расширяют. При споруляции образуются параспоральные включения различной формы - ромбовидные, кубические, неправильные четырехгранники. Преобладают .кристаллы ромбовидной формы.Хорошо растет на мясопептонном агаре МПА), рыбопептонном агаре(РПА) и других питательных средах с добавлением пептона и дрожжевого или кукурузного экстракта; На РПА образует матово-белые плоские колонии с изрезанными краями пастообразной консистенции. На рыбопептонном агаре образует пленку. Факультативный анаэроб, На желточной среде, ломтиках картофеля и среде с добавлением БВК пигмент не образует, Растет на РПА с добавлением 7% МаС. Оптимальная температура роста 28-30 С.Штамм продуцирует каталазу, гидролизует казеин, крахмал, тирозин и разжижает желатину. Уреазополокительный, Образует ацетилметилкарбинол и лецитиназу. Усваивает эскулин, салицин, глюкозу с образованием кислоты без газа. Не образует кислоты и газа из мальтозы, целлобиозы, маннозы, лактозы, галактозы, рамнозы, сахарозы.Сероводород и индол не образует.Не агглютинируется типовыми антисыворотками 27 серотипов В. Йогпцепээ, полученными из Института Пастера (Париж).Не чувствителен к пенициллину, полимиксину, чувствителен к эритромицину, стрептомицину, мономицину, неомицину, левомицитину,Вызывает 100гибель личинок комаров Аебеэ аецурт, Сиех ррепэ, АпорЬееэ зтерйепэ при использовании суспензии бактериальной культуры в концентрации 2,3 10 спор/мл. Вызывает 100/, гибель саранчи СЬогтЫрриз аргсагаэ, СйогсЫрриэ ФсйгоОз при использовании суспензии бактериальной культуры в концентрации 10 спор/мл. изготовления энтомопатоген ногопрепарата,