Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона

(51) йЫй 93 НИПИИИЯ 3ОТЕКА ЕТ Е П К ПАТЕ овательский рощенкова вательский ндокринолоиверситета,ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(56) Кабак Я.М. Практикум погии, М,: Изд-во Московского1968, с. 150-155. Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных.Цель изобретения - упрощение способа определения активности фолликулостимулирующего гормона.Поставленная цель достигается тем, что в качестве биологического объекта используют культивируемые ооциты животных, а оценку биологической активности гормонов проводят по продолжительности времени и интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.П р и м е р, На мясокомбинате от только что убитых коров берут яичники в стадии фолликулярного роста. В стерильных условиях в лаборатории извлекают ооциты, размещают их в чашки Петри с питательной средой ТСс 20 % фетальной сыворотки примерно по 30 штук в каждую, Формируют(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ФОЛЛИКУЛОСТИМУЛИРУЮЩЕГО ГОРМОНА(57) Использование: ветеринария, в частности способы определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения; активность фолликулостимулирующего гормона определяют по его воздействию на биологические объекты, В качестве биологического обьекта используют ооциты животных, Оценку биологической активности гормона осуществляют по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.1 табл. пять групп. В одну чашку Петри гормональные препараты не добавляют. Эта группа ооцитов является контролем, Во вторую чашку Петри к стандартной питательной среде, нанесенной на дно в количестве 2-3 мл, добавляют 10 и кг/мл стандартного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), заведомо известной активности, а в три следующие чашки Петри с таким же количеством питательной среды вносят 5, 10 и 15 и кг/мл проверяемого гормонального препарата. Все чашки Петри помещают в одинаковые условия в эксикатор с максимальной влажностью при 5-процентном содержании углекислого газа, Эти условия позволяют поддерживать в эксикаторе рН равную 7,3 - 7,5. Культивирование ооцитов осуществляют в течение 30 ч в термостате с постоянной температурой 38,5 С. Затем с помощью цитогенетического анализа определяют стадии созревания ооцитов с подсчетом процента ооцитов на стадии1787034 Формула изоб ретения Оп еделено ооцитов на стадии Доза ФСГи кг/млВсего ооцитов в группе, штук Добавка к питательной среде мето азы 1 егене ации% штук штук Пе вая се ия опытов Контроль Стандартный ФСГ П роверяемый ФСГ 31 16,1 32 75,0 10 24 30 29 30 17 22 24 5 10 15 56,7 75,9 80,0 13,3 Вто ая се ия опь тов 30 16,6 Контроль Стандартный ФСГ Проверяемый ФСГ 10 34 26 76,4 5,8 33 30 30 51015 12 17 23 36,3 56,7 76,6 3,3 Составитель М.ДошкинаТехред М,Моргентал Корректор Л,Ливринц Редактор С.Кулакова Заказ 261 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 метофазы П, При 70 - 80 фактического наличия их в группе, дальнейшее культивирование прекращают, Ооциты могут быть оплодотворены семенем быка-производителя, Использование активного ФСГ обеспечивает созревание ооцитов самок крупного рогатого скота уже через 25 - 26 ч,Результаты 30-часового культивирования ооцитов приведены в таблице,Как видно из данных таблицы, в первой серии опытов доза 10,и кг/мл испытываемого ФСГ была эквивалентна такой же дозе стандартного ФСГ, а во второй серии опытов - проверяемый гормональный препарат был не менее активен. Лишь доза 15 ркг/мл соответствовала эквивалентному количеству в 10,и кг/мл стандартного Ф С Г,Таким образом, использование предложенного способа определения активности фолликулостимулирующего гормона позволяет в течение 25 - 30 ч с минимальными затратами труда и средств определить фактическую активность испытываемого гормонального препарата, При этом не нарушается биотехнологический процесс воспроизводства сельскохозяйственных 5 животных, Отпадает необходимость в выращивании инфантильных крыс или мышей, их инъецировании, взятия влагалищных мазковб забоя с последующей препаровкой и взвешивания их полового аппарата, 10 Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона, включаю щий оценку его физико-биологического. воздействия на биологические объекты, о тл и ча ю щи йс я тем,что, с цельюупрощения способа, в качестве биологического обьекта используют ооциты животных, а оценку 20 биологической активности гормона по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде,