Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза

Оято ,,41фут,ф,Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик щ 69 ОО 7 О 61) Дополнительное к ает. сеид-еу22) Заявлено 01.1277 (21) 2552895/28 с присоединением заявки Нов23) Приоритет -осударственный комнтет СССР по делам изобретенмй и открытий12 К 1/О УДК 57 8 . 8 . 09 3,1(088.8) Опубликовано 053. 0.79 бюллетень ЙВ 37 Дата опубликования описания 08.10,7(У 2) Авторы ИЭ 06 ЭФТЮНИЯ О.В. Бухарин, Е,И, Бритвина, Е.П. Володина и Я.И. енбургский государственный медицинский институт) Заявитвл БИОЛОГИЧЕСКОЙ А КТИВ НОСТЕИ ДОЛИ ГИПОФИЗА СПОСОБ ОПРЕДЕЛГОРМОНОВ покулцЬс. езультаты опытов приведены в та орбаФ Изобретение относится к области медицины, а именно к лекарственным препаратам.Известен способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза с использованием экспериментальных животных 11 . Однако известный способ является сложным (большое количество операций) и не обеспечивает высокой точности результатов, так как они зависят в значи" тельной мере от индивидуальной чувствительности организма подопытных животных.Цель изобретения - упрощение способа.Эта цель достигается тем, что исследуемый гормон смешивают с тест- культурой Вас 111 цз зцЫ 111 э, смесь выдерживают при температуре 35-40 ф С в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.П р и м е р . Проводят лаборат ные испытания предлагаемого спосо стандартизации гормонов задней доли гипофиэа. Ставят четыре опыта, в каж дом из которых к 1 мл окситоцина (5 ед, стандартного образца) добавляют 1 мп суспензии бактериальной тест- ьтуры сенной палочки (Вас 11- 1 цэ з 111 в), выращенной на питатель .ной.среде - мясо-пептонном агаре (рН - 7,2) и оттитрованной по оптическому стандарту мутности. Смеси по мещают в термостат и выдерживают при температуре 37 С в течение 1, 5, 10 и 15 мин. После этого осуществляют мерный высев смесей на чашки с питательной средой - мясо-пептонным агаром. Оценку биологической активности гормонов производят по их антимикроб ному эффекту следующим образом: чере 24 ч экспозиции чашек в термостате 2 О при 37 С визуально определяют наличие проросших колоний тест-культуры- сенной палочки700 "б 00 колоний То же 0 0 10 3-0 колоний15 Разреженный рост 0 0 0 Формула изобретения Составитель С, МалютинаРедактор Л. Ушакова Техред Н,Бабурка Корректор М, Селехман Тираж 526 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж"35, Раушская наб., д. 4/5 Заказ 5912/24 филиал ППП Патент, г, Ужгород, улПроектная, 4 Как видно из таблицы, для оксито- цина микробная нагрузка составляет 10 микробных единиц., При этом при контакте бактериальной тест-культуры с окситоцином в течение 1 мин наблюдается сплошной рост колоний, 5 мин - насчитывают 600-700 колоний, 10 мин - 0-3 колоний, 15 мин - отсутствие колоний. Таким образом, оптимальное время контакта для этой микробной нагрузки (10 клеток) 10-15 мин. Для микробной нагрузки 10 клеток анти 9микробный эффект окситоцина выявляет- З 0 ся через 5-10 мин контакта культуры с гормоном.Аналогичным способом определяют акживность других. гормонов задней доли гипофиэа - вазопрессина и пи- . 35 туитрина. Микробная нагрузка для них составляет 10 -10 микробных единиц.Использование предлагаемого способа опрЕделения биологической ак- . тивности гормонов задней доли гипо физа позволяет повысить точность стандартизации за счет использования тест-культуры, выращенной из одной бактериальной клотки, что дает возможность исключить. разброс данных иэ-за различной чувствительности организма подопытных животных к гормонам. Определение биологической активности гормонов задней доли гипофиэа по предлагаемому способу по сравнению с известным проще, так как способ имеет меньшее количество операций и позволяет исключить использование подопытных лабораторных животных. Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью упрсщения способа, исследуемый гормон смешивают с тест- культурой Вас 111 цэ зцЬС 111 з , смесь выдерживают при температуре 35-40 С в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССР9 331795, кл. А 61 К 17/06, 1974.