Штамм бактерий bacillus тнuringiеnsis var. кursтакi для получения лепидоцида

(5 ю)5 А 01 И 63/00ЗОБРЕТЕНИЯ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНВЕДОМСТВО СССР,й" ав ОПИСАНИ АВТОРСКОМУ С ЕЛЬСТВУ 1 2(21) 4902042/13, , . водство препарата лепидоцида для борьбы (22) 11.01,91 с вредителями сельскохозяйственных куль-(46) 30.12.92, Бюл. И 48 . тур и лесных насаждений. Сущность изобре- (71) Бердский завод биологических препара- тения; штамм бактерий Вас 111 о з тов йцг 1 п 91 епзз чаг, Кцгзтай получен методом (72) Н,И.Шашкина, Т,Ф.Ломовская, Ф;Н.Че- направленного мутагенеза на оСнове штамгодаев, Л.ИБурцева, А.И,Пахтуев и ма Васйигп 91 епз 1 з чагМгзйаИ Б.Депо- В.ВнШевцов нирован в коллекции ВКПМ под номером (56) Авторское свидетельство СССР . В. При культивировании на среде, со- М 665684, кл. А 01 й 63/02, 1977, . держащеймас,%:дрожжи 2,8;мука кукурузАвторское свидетельство СССР ная 2,0; мука соевая 0,8; аммоний М 769787, кл. А 01 й 63/00, 1979 фосфорнокислый 0,1; калий хлористый 0,1, в (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ ВАСШ 38 течение 30-34 ч получают культуральную ТНОЯ 1 йбЕИЯб ЧАЙ,КОЙЯТАК ДЛЯ ПОЛ- жидкость с титром спор 4,9-5,3 млрд сп/мл, УЧЕНИЯ ЛЕПИДОЦИДА - Культуральную жидкость затем концентри- (57) Использование: микробиологическая руют и сушат, Получают препарат с биолопромышленность и биотехнология, произ- гической активностью 22316 ЕА. 1 табл. БИзобретение относится к микробиоло- биологической активности и продуктивно. д гической промышленности и биотехнологии . сти, и может быть использовано в производствеПоставленная цель достигаетсяпутем препарата лепидоцида для борьбы.с вреди- . получения нового штамма Вас 1 озтелями сельскохозяйственных культур и Йиг 1 пд 1 епз 1 зчаг,1 огз 1 аИВКПМВ- про-, фь лесных насаждений. дуцента лепидоцида, "Известей штамм Вас,йцг 1 п 91 епз 1 з чаг, . Предлагаемый штамм получен методом СЛ 1 игз 1 аЫ Е. Однако штамм Енедостаточ-, направленного мутагенеза на основе штам-.ф но продуктивен и патогенен для вредных ма Вас,Фигпцепззчаг. Огзтай Би ханасекомых. Титр культуральный жидкости -: рактериауется следующими признаками. 3,0 млрд сп/мл, 1.К 50-0,16 %, Культурально-морфологические приИзвестен штамм Вас, йцг 1 п 91 епз 1 з чаг. знаки, МогзтаЮ 2-52, выбранный в качестве прото-. : Грамположительные пбдвижные палочтипа, Недостатком данного штамма являет- ки с закругленными концамй. В стационарся низкая биологическая активность 4500 ной фазе роста образуют овальные споры и ЕА, титр культуральной жидкости 4,6 млрд в одном спорангии два белковых включения сп/мл. , - кристаллы ромбовидной и квадратнойЦель изобретения - получение штамма . формы, Хорошо растет на МП средах.припродуценталепидоцидасвысокимуровнем 28-30 градусах и рН 6;8 - .7,3, На МПА натретьи сутки образует однороднь 1 е колониисеровато-бежевого цвета со слабо изрезанным краем, структура мелкозернистая, пастообразной консистенции. В МПБ ростумеренный, образует сплошную пленку, 5опадающую через 48 ч. На картофельномагаре и агаре Хоттингера обильный рост, на5 сут при 30"С колонии однородные, светлосерого цвета, пигмента не образуют.Антигенные свойства, 10Вегетативные клетки штамма В дают положительную реакцйю с агглютинирующей сывороткой серотипа НЗ (ЗаЗб).Антагонистические свойства.Антагонистические свойства не проявились по отношению к Вас, Фцгпдепзз чаг.сепсгоацз, Вас, тйцгпЫепзз чаг,даНегае, Вас, Йцгпдепз 3 чаг, сацсазцз,Вас. пзестцз, Ваз, зцЬсПз.Физиолого-бйохимические признаки. 20Усваивает с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, крахмал картофельный и кукурузный; не усваивает лактоэу, арабинозу,маннозу, сахарозу, На среде Кларка образует ацетилметилметилкарбинол, не образует 25лецитиназу на агаризованной среде, Обладает йротеазной и уреазной активностью,Отношение к источникам азота: восстанавливает нитраты, усваивает аммонийныеформы азота. 30. Хорошо растет при 28-30 С и рН 6,87,4: Отношение к кислороду, аэроб:Хранение,Хранить штамм рекомендуется в виделиофильновысушенной культуры в стеклянных запаянных ампулах,Чувствительность к фагам.Штамм Бустойчив к фагам М, И 77, Э;Продуктивность 40При культивировании на производственной среде следующего состава, мас.фД:дрожжи 2,8; мука кукурузная 2,0; мука соевая 0,8, аммоний фосфорнокислый однозамещенный 0,1; КС 0,1, штамм В45характеризуется синхронным спорообразованием и образует в 1 мл культуральнойжидкости 4,9 - 5,1 млрд сп/мл см,таблицу).Биологическая активность,Предлагаемый штамм характеризуется высоким уровнем биологической активности, При регламентных условиях культивирования биологическая активность сухого концентрата проверялась на гусеницах непарного шелкопряда 2 возраста. Учет гибели гусениц проводился на 6 сут.Биологическая активность сухого концентрата составляет 22330-22300 ЕА (см, таблицу).П р и м е р. Подготовка посевного материала, Исходную культуру. штамма ВазПцз Эцгпдепзз чаг, Кцгзтай Ввыращивают при температуре 28-30 С в течение 5-6 сут в пробирках на скошенной агаризованной среде следующего состава, мас.; мясйой бульон до 100; пептон 0,1; хлористый натрий 0,05; агар-агар 0,2; рН среды 7,0 - 7,2.Выросшую культуру петлей переносят с косяка в колбу емкостью 2 л, содержащую 300 мл среды следующего состава, мас,ф/,; дрожжи кормовые 0,30; мука кукурузная 0,15; рН среды 7,0-7,2,Засеянную колбу инкубируют на качалке при 220 - 300 об/мин в течение 24 ч при температуре 29-30 С до полного высыпайия спор и кристаллов, Затем передают в ферментер.Ферментацию осуществляют на среде следующего состава, мас,%: БВК 2,8; мука кукурузная 2; аммоний фосфорнокислый однозамещенный 0,2, хлористый калий 0,1; хлористый кальций 0,1, при следующих условиях; температура 28-30 С, аэрация в первые 3 ч роста 0,1 л/л/мин, в последующие часы роста 0,2 л/л/мин, непрерывное перемешивание, давление в ферментере 0,4- 0,5 ати, Время культивирования 30 - 34 ч.После окончания ферментации осуществляют концентрирование культуральной жидкости и сушку.Биологическая активность заявляемого штамма Ввь 1 ше, чем у прототипа, в 4-5 раз,Формула изобретения Штамм бактерий ВасПцз Фцгпдепззчаг, Мгз 1 а: ВКПМ Вдля получениялепидоцида.