Штамм парамиксовируса кур, используемый для приготовления диагностических препаратов

союз совгтскихСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1752 ЗОБ Т ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) А 1 ехапс 1 ег О.З. Ач 1 ап рагагп 1 хочгоз. -ТЬе четег 1 пагу Вц 11 ес 1 п, 1980, М 9, ч. 50., р,737-752,1.1 рЮпс МЯЫЬеаптег Е. АМ 1 деп 1 сгеас 1 опзЫрзЬевчееп ач 1 ап рагатухочгцзез. -10 оапт 1 тат 1 че сйагастегст 1 сз Вазед оп Наеааддцбпатоп апб Йеогагп 1 п 1 с 3 азе 1 пЫЬ т 1 ор 1 езтз. -АгсЫчез о 1 ч 1 го оду, 1986, М 89, рю 89-11,Изобретение относится к вирусологии иможет быть использовано для получения диагностикума парамиксовирусов.Известны данные об изоляции парамиксовирусов от различных видов домашних идиких птиц.В результате экологического изучениядиких птиц было выявлено, что штамм вирусов Юкейпа( пара чиксовирус 2-го серотипа)является антигенно вариабельным,Однако отсутствуют сведения об изоляции от домашних птиц дрейф-вариантов ви- .руса Юкейпа, отличающихся от прототипныхштаммов по антигенным характеристикам,структурных белков. .Цель изобретения - получение штаммавируса Юкейпа Курица/Алма-Ата/71/87,обладающего специфической иммуногенностью, позволяющей использовать его дляприготовления диагностических препаратов при идентификации вновь выделенныхпарамиксовирусов птиц. м)5 С 12 й 7/00, А 61 К 39/14(54) ШТАММ ПАРАМИКСОВИРУСА КУР, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ (57) Использование, вирусология, для получения диагностикума парамиксовирусов, Сущность изобретения, предложен штамм парамиксовируса птиц, который представляет собой дрейф-вариант вируса Юкейпа.Предложенный штамм может быть использован в качестве модели при изучении дрей. фовых процессов у вирусов группы Юкейпа, а также как диагностический препарат при диагностике инфекций, вызванных вирусом этого серотипа. 1 табл. Предлагаемйй штамм Курица/Алма- Я Ата/71/87 представляет собой вирус, родственный в антигенном отношении штамму Курица/СССР/1/86. Новый штамм выделен от кур в сентябре 1987 г, при вирусологическом с обследовании домашних птиц Алма-Атинской области Казахской ССР и хранится в коллекции Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР(депозит ГКВ М 2230).Антигенную структуру штамма изучали в РТГА с использованием набора референссывороток к парамиксовирусам 1-9 серотипов, а также к вирусам гриппа с гемагглютининами подтипов Н 1-Н 13 и нейраминидазой В 1-9. Результаты, представленные в таблице показывают, что штамм Курица/АлмаАта/71/87 проявил частичное, но не полное антигенное родство с эталонным вирусом Курица/СССР/1/86.Активность репродукции, Выделенный от кур вирус Курица/Алма-Ата/71/87 репродуцируется в системе куриного эмбрионаЭ 1752765 Патогенные свойства. Штамм Курица/Алма-Ата/71/87 не проявляет патогенности для однодневных цыплят при интраназальном, внутрибрюшинном и интрацеребрэльном заражении.Штамм, выделенный от кур, предназначен для производства парамиксовирусного антигена, который может быть использован при серологической диагностике, С этой целью штамм размножают путем заражеП р и м е ч а н и е. С референс-сывороткам к вирусам, содержащим гемэгглютиниН 1 - .Н 13, получены отрицательные результаты,при оптимальной (37 С) и повышенной (41С) температурах до инфекционного титра6-8 д ЭИД 5 о/0,2 мл. Штамм обладает высокой гемагглютинирующей (титр гемагглютинэции 1/256 - 1/5.12) и иммуногеннойактивностью.Гемагглютинирующая активность. Вирус обладает широким спектром агглютинации эритроцитов. Он одинаково хорошоагглютинирует эритроциты кур, уток, морской свинки, крысы и мыши, но не взаимодействует с эритроцитами барана, свиньи,лошади и крупного рогатого скота.. Терморезистентность (Т 56-признак)Вирус, выделенный от кур, и прототипныйштамм Курица/СССР/1/86 обладают темперэтурочувствительным гликопротеидомНй (Т 56 - 5 мин).Ингибиторочувствительность, Исследуемый штамм проявляет чувствительность ктермолабильным ингибиторам сыворотоккролика и мыши и термостабильным ингибиторам сыворотки морской свинки, но был резистентен по отношению к сывороточнымингибиторам барана, свиньи, уток, кур, крысы,Адсорбционно-элюирующая активность.Представленный штамм, также, как и эталонКурица/СССР/1/86, обладает слабой эдсорбирующей активностью по отношению к формалинизированным эритроцитам кур. ния 9-10-дневных куриных эмбрионов в эллвнтоисную полостьДиагностическую иммунную сывороткуполучают на кроликах породы шиншилла 5 или на белых крысах. В качестве антигенадля иммунизации используют вирус, сконцентрированный центрифугированием при 24 об/мин в течение 2 ч. Титры гемагглютинации составляют 1/10000 - 1/20000.10 Схема иммунизации, Первую иммунизацию проводят подкожно в область шейных и подколенных лимфатических узлов путем 15 - 20 точечных инъекций концентрированного антигена (100 мкг) в смеси с полным 15 адъювантом Фрейнда. Через 3 нед проводили повторную иммунизацию животных подкожно (с адъювантом) и внутривенно (без адьюванта) равным количеством антигена.Кровь у животных берут из краевой вены уха 20 через 7 дней после второй иммунизации.Иммунную сыворотку освобождают от неспецифических ингибиторов обработкой отечественным препаратом нейтраминидазы из нехолерного вибриона, Титр иммун ной сыворотки заявляемого штамма в РТГАс гомологичным антигеном составлял 1/20 480-1/40 960, с гетерологичными антигенами парамиксовирусов 1 - 4, 6-9 серотипов - реакции отрицательны.30 Таким образом, предлагаемый штаммпарамиксовируса Курица/Алма-Атэ/71/87, выделенный от кур, и приготовленные на его основе диагностические препараты могут быть применены в вирусологической 35 практике для идентификации вновь изолированных штаммов парамиксовирусов и обнаружения антител в сыворотках различного происхождения.формула изобретения 40 Штамм парамиксовируса кур ГВК %2230,используемый для приготовления диагностических препаратов: