Способ определения степени тяжести гемофилии а

СОНээ СОВЕ ТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1704(п)5 0 01 й 33/5 АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ К АВТО(54) СПОСОБ ОПРЕ ТЯЖЕСТИ ГЕМОФИ (57) Изобретение от именно к гематологи определения степен Целью изобретения точности определен ставленной цели о цию дезоксирибону плазме крови и при мкг/мл и меньше. о пень тяжести заболе равном 8,1 мкг/мл и желую степень забол ляет повысить досто М 1аучно-ис гии и пе аучно-ис гии и пе ледовательскии еливания крови ледовательский еливания крови ов и Н,А.федоС.А.Ма о гематологии./Под ред.: Медицина, 1985, т. 2, с,М фосфатного буфера, содержащего 1,3 йаС и 25 мкл раствора бисбензимида с концентрацией 60 мкг/мл. Затем в кювету вносят 3 раза по 20 мкл супернатанта исследуемой плазмы и производят измерение флуоресценции. В эту же кювету вносят 3 раза по 20 мкл раствора ДНК (внутренний стандарт) с концентрацией 20 мкг/мл, ДНК, используемую в качестве внутреннего стандарта, предварительно прогревают в кипящей водяной бане в течечие 5 мин. Концентрацию ДНК в супернатанте рассчитывают по формуле:В ХГХБА ХО супернатан Х - концентрация ДНК в те мкг/мл;А - объем супернатанта, добавляемого в кювету, мкл;Г - концентрация стандартного раство ра ДНК. мкг/мл; ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР. институт гематолои Центральный нинститут гематоло(56) РуководствоА.И.Воробьева - М233-242,Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и касается способов определения степени тяжести гемофилии А.Целью изобретения является повышеособа.ществляют следующим о ние точности спСпособ осу браэом.После клинико-лабораторного обследования больного с целью повышения точности определения степени тяжести гемофилии А дополнительно определяют концентрацию дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в плазме крови. К 0,4-0,5 мл плазмы крови добавляют равный объем 20-ного раствора ГчаО, перемешивают и помещают в кипящую водяную баню, Затем охлаждают и центрифугируют. Концентрацию ДНК в супернатанте определяют по флуоресценции комплекса ДНК - бисбензимид при длине волны возбуждения 365 нм и эмиссии 470 нм. 8 кювету вносят 2,5 мл 0,05 ДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ЛИИ Аносится к медицине, в и. и касается способов и тяжести гемофилии А,является повышение ия, Для достижения попределяют концентраклеиновой кислоты в ее уровне, равном 7,4 пределяют легкую стввания, а при ее уровне, более, определяют тяевания, Способ позвоверйость определения.1704081 Составитель 3 ЦыгановТехред М.Моргентал Корректор С.Шевкун Редактор О,Христа Заказ 60 Тираж Подписное ВНИИПИ Гг;судлрственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул.Гагарина 101 Б - уровень флуоресценции сувернатанта, усл. ед;В - обьем добавляемого в кювету раствора ДНК, используемого в качестве внутреннего стандарта, мкл; 5Д - уровень флуоресценции раствора после добавления внутреннего стандарта, усл. ед.Производят перерасчет концентрации ДНК в 1 мл плазмы крови, При концентра ции ДНК в плазме крови, равной 7,4 мкг/мл и меньше, определяют легкую степень тяжести заболевания, а при концентрации ДНК в плазме крови, равной 8,1 мкг/мл и более, определяют тяжелую степень забо левания. П р и м е р 1. Больной С, 24 г, Поступил в клинику по поводу гемофилии А с деформирующими остеоартрозами обоих колен ных суставов и гемартрозом левого локтевого сустава, Ранее неоднократно лечился в связи с гемартрозами различной локализации. При поступлении жаловался на боли в суставах и ограничения движений. 25 При лабораторном обследовании обнаружена относительно высокая активность фактора УШ (47 Ц, При обследовании по предлагаемому способу концентрация ДНК в плазме крови составляла 8,1 мкг/мл, что ЭО соответствует тяжелой степени заболевания, Полученные данные подтвердили результаты клинико-лабораторного обследования,П р и м е р 2. Больной Г, 21 г. Поступил в клинику с синовиобурситом правого коленного сустава. При поступлении жаловался на умеренные боли в правом коленном суставе при ходьбе. Правый колленный сустав отечен и немного увеличен. Активность фактора УШ, что соответствует тяжелой степени заболевания, Однако при обследовании по предлагаемому способу концентрация ДНК в плазме крови составляла 7,4 мкг/мл, что соответствует легкой степени тяжести заболевания. Полученные данные позволили уточнить степень тяжести заболевания,Определение концентрации ДНК в плазме крови позволяет повысить достоверность определения степени тяжести гемофилии А.Формула изобретения Способ определения степени тяжести гемофилии А путем клинико-лабораторного обследования, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа. дополнительно определяют концентрацию дезоксирибонуклеиновой кислоты в плазме крови и при ее величине, равной 7,4 мкг/мл и менее, определяют легкую степень тяжести заболевания, а при величине 8,1 мкг/мл и более определяют тяжелую степень заболевания,