Способ получения суспензии для реконструкции мембран клеток печени

СОЮЗ СОЕЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 9) ( ) А 1 К 47/00 й 33/48 САНИЕ ИЗОБРЕТЕ ВТОРСКОМУ С ЕЛЬСТВ(46) 30,08.91. Бюл,(71) Научно-исследо эико-химической ме ий институт фитель ицин(53) 612 015(088.8) наева, Е,Д,СЭ.М.ХалилЮ,М.Лопухов, А.Н,АрипКаримов оИ,П.К ская чако Дами М.Ш(56) Сб, матсриэлолипопротеинсмиярапии эссенциэльнКельн, 1984, с, 23-3 оэиума Гиперктор риска и тео:фолипидами",эк фаыми ф ГОСУЛАРСТНЕН)ГЫИ КОМИТЕПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР Изобретение относится к медицине, и в частности, может быть использовано при создании лекарственного средства для лечения заболеваний печени.Цель изобретения - повышение репарирующего действия суспенэии,Цель достигается путем смешивания фосфатидилхолина хлопчатника (ФХхл) и детергента солодкоеого пенообразователя (СП) при соотношении компонентов 1:(0,1- 0,4) мас ч, с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком в режиме средней мощности в течение 6 - 10 мин.Способ осуществляют следующим образом.Готовят суспензию из ФХхл + СП. Для этого берут 1 мэс.ч, ФХхл, растворяют в органическом растворителе (бензол, метанол, хлороФорм), после чего растворитель(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУСПЕНЗИИ ДЛЯ РЕКОНСТРУКЦИИ МЕМБРАН КЛЕТОК ПЕЧЕНИ(57) Изобретение относится к медицине, предназначено для создания лекарственного средства для лечения заболеваний печени. Цель изобретения - повышение репарирующего действия суспензии путем смешивания фосфатидилхолина хлопчатника и детергента солодкового пенообраэователя при соотношении компонентов 1:(0,1-0;4) мгс.ч. Затем смесь обрабатывают ультра.вчком в оежиме средней мощности (180 Вт, частота 30 кГц) 6-10 мин при 10 С. Когда суспензия становится прозрачной воздействие ультразвуком прекращают. Суспзнзию используют для рсхонструкции мембран. упэриеают досуха и пэилива от зоднни г эствор, содержащий СП. Содержание СП составляе 0,1 -0,4 мэс.ч. нэ 1 мэс,ч, ФХхл, содержание ФХхл в 1 мл раствора 15 25 мг. Компоненты тщательно перемешивают до растворения ФХхл. Полученную мутную жидкость переносят в стакан для ультразвуковой обработки и воздействуют ультразвуком в режиме средней мощности(180 Вт, частота 30 кГц) в течение 6-10 мин при температуре не выо)е 10 С. Когда суспензия становится прозрачнои, воздействие ультразвуком заканчивают, Полученную таким образом суспенэию используют для реконструкции мембранп чего и 1 п ччо, 1 п ч 1 го поврежденные мембраны зндоплазматического ретикулума (1-3 кг белка микросом в 1 мл водного раствора, смеши вэют с суспензией ФХхл + СГ 1 (1 4 мг фос1673969 Формула изобретения Способ получения суспензии для реконструкции мембран клеток печени, включающий смешивание фосфатидилхолина и детергента в определенном соотношении, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения репарирующего действия суспенэии, используют фосфатидилхолин иэ хлопчатника, а в качестве детергента - солодковый пенообразователь при соотношении компонентов 1:0,1 - 0,4 соответственно с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком в режиме средней мощности в течение 6-10 мин,Составитель А. АгурееваТехред М.Моргентал Корректор Э, Лончакова Редактор А. Огар Заказ 2915 Тираж 403 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул Гагарина, 101 фолипида 1 мл водного раствора) и инкубируют при 4 С в течение 1 ч. 1 п Учо суспензию ФХхл 1- СП вводят крысам с токсическим гепатитом в дозе 20 мг фосфолипида на 100 г массы в течение 3 дн. 5 Реконструирующее действие суспензии оценивают по скорости инактивации цитохрома Рв интактных и поврежденных мембранах, В интактных мембранах время полуинактивации цитохрома Р10 составляет 30 мин. Использование суспензий, содержащих ФХхл + СП при соотношении компонентов 1:(0,1-0,4) мас.ч. с последующей обработкой ультразвуком в режиме средней мощности в течение 15 6-10 мин сопровождается увеличением времени полуинактивации гемопротеина с 4 - 5 мин в поврежденных мембранах до 21-27 мин после их инкубации суспензией ФХхл + СП, а в случае использо вания препарата "Эссенциале" оно составляет 6 мин.П р и м е р 1. Способ осуществляют аналогично описанному, но используют суспенэию ФХхл + СП при их соотношении 25 1:0,1 мас.чвремя озвучивания составляет 6 мин. При этом получают суспензию, обладающую репарирующим действием и вызывающую увеличение времени полуинактивации цитохрома Р - 450 до 21 мин в 30 поврежденных мембранах после их инкубации с суспензией ФХхл + СП по сравнению с 4-5 мин в мембранах без воздействия суспенэии.П р и м е р 2. Способ осуществляют 35 аналогично описанному, но используют суспензию ФХхл + СП при их соотношении 1:0,4 мас.ч, время озвучивания составляет 10 мин. При этом получают суспензию, обладающую репарирующим действием и вы зывающую увеличение времени полуинактивации цитохрома Рдо 24 мин в поврежденных мембранах после их инкубации с суспензией ФХхл+ СП по сравнению с 4-5 мин в мембранах без воздействия суспензии,П р и м е р 3. Проверка репарирующего действия суспенэии при оптимальном соотношении ФХхл и СП 1:0,25 мас,ч. и времени озвучивания 8 мин показывает, что в этом случае после инкубации поврежденных мембран с суспензией время полуинактивации цитохрома Рв них составляет 27 мин по сравнению с 4-5 мин в мембранах беэ воздействия суспенэии. Кроме того, введение такой суспенэии крысам с токсическим гелиотриновым гепатитом приводит к увеличению М-деметилазной и р-гидроксилаэной активности в 2 раза и времени полуинактивации цитохрома Р - 450 в 5 раэ в поврежденных мембранах эндоплазматического ретикулума печени крыс по сравнению с мембранами животных, не получавших суспенэии ФХхл + СП.