Способ определения активности нейротоксической эстеразы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
(57) Изобретенибу определениясической эстера т сится кости нейжет быть спо тив рото исполь 1ени следоваи токси зовано для выявл проявления замед ческого действия соединений. Цел щение способа оп ско л токсиескихупроенного неи ов и осфороргани зобретения -ь шарев еделения активностисической эстераэы рмента неиротокпериферическойстигается тем,нта определяют ка.Эт ть фе лимфо крови челов что активно не только в Неа 1 сЬ,85. цитахизвестцитарн ромбоцитах, как это ранее, но и во всей взвеси (гранулоциты ИВНОСТИ ейк 1 мл. Получеруют в стеклбавляя 1,5-2в ЭДТА. звесь гомогениз ласти овано гомогенизаторе,добуфера трис-НС 1 но линиче о н роргани - упрощение ктивности ф ейкочения оцито каплеи ге доб авляют и помещаю при 37 С слои в пролейковзвесьс-буфером с/мин в течеиковзвеси количестет 8-10 млн. в ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ А НЕЙРОТОКСИЧЕСКОЙ ЭСТЕРАЗЫ Изобретение относится к едицины и может быть испо ля выявления раннего (до ого) проявления замедленн оксического действия фосф еских соединений. Цель изобретения пособа определения амента.Приме р. Дпя пол взвеси и осаждения зрит центрифужную пробирку с рина вносят 5 мл крови, 0,2 мл 102-ной желатины на 30 - 35 мин н термоста отсасывают надосадочный бирку и отмывают дважды центрифугированием с тр ЭДТА (рН 8,0 при 1000 о ние 1 О мин).В выделенной ле во клеток состанля Активность нейротоксической эсте- разы (НТЭ) в белой крови определяют следующим образом: к парным пробам, содержащим по 0,5 мл гомогената лей- ковзвеси, добавляют - в первую: 0,25 мл 10 М раствора параоксона и 0,25 мл 10 И.раствора мипафокса;во вторую: 0,25 мл 10 И раствора параоксона и 0,25 мл буфера без мипафокса. Обе пробы инкубируют в тече" ние 30 мин при 37 С, а затем добавляют по 1 мл субстратного раствора, содержащего по 0,5 мг/мл фенилвалерата, и продолжают инкубацию в течение 45-60 мин. После этого реакцию останавливают добавлением 17 -ного раствора додецилсульфата натрия в, буфере, содержащем 0,25 ммоль 4"ами1640650 ЙЕ . 1000А = ---- ,1,39Ьс Способ определения активности нейротоксической эстеразы крови путем спектрофотометрического измерения продукта гидролиза фенилвалерата, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью упрощения способа, определе- ние активности Фермента проводят во всей лейкоцитарной взвеси. 20 Показатель Лимфоциты Гранулоциты Вся лейкоци тарнаявзвесь Активностьфермента 23,1+3,97. от активности НТЭв лимфоци- тах 18,2+2,8 19,8+0,9; 100 78 85 Составитель В.ЗотовТехред С,Мигунова Корректор Л.Бескид Редактор Е.Хорина Заказ 1264 Тираж 418 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент". г.ужгород, ул. Гагарина,101 ноантипирина. Для появления окраски во все пробы добавляют по 0,5 мл 0,47-ного водного раствора КЕе(СН) . Через 15 мин пробы колориметрируют на двухлучевом спектрофотометре СФ(длина волны 510 нм, кювета 1 см). Контролем служит проба,содержащая оба инкубатора - параоксон и мип афокс, 10Активность Фермента (нмоль/мин кг) белка рассчитывают по формуле 15 где АЕ - разность экстинций замин;1,39 - коэффициент молярнойэкстинции, фенола;.Ь - количество белка, мг в1 мл пробы;1000 - коэффициент перевода активности в нмольс - оптический путь луча вспектрофотометрической 25кювете, см.Для стандартизации полученных результатов определяли белок. В таблице приведены данные активности нейротоксической экстеразы (нМ/минфмг белка) в лимфоцитах х с примесью тромбоцитов и моноцитов, гранулоцитах и всей популяции белой крови Х+ эх, иОВ эксперименте при введении курам и крысам афоса в дозах, вызывающих ингибирование экстеразы,наблюдалось однонаправленное изменение активности Фермента как в лимфоцитах периферической крови, так и во всей лейковзвеси, что позволяет использовать определение активности НТЗ во всей лейковэвеси для прогнозирования замедленного нейтротоксического действия Фосфорорганических соединений. ф о р м у л а изобретения
СмотретьЗаявка
4443076, 20.06.1988
ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГИГИЕНЫ И ТОКСИКОЛОГИИ ПЕСТИЦИДОВ, ПОЛИМЕРОВ И ПЛАСТИЧЕСКИХ МАСС
ЗИНЧЕНКО ДАЛИЛА ВАСИЛЬЕВНА, КОКШАРЕВА НАТАЛЬЯ ВЛАДИМИРОВНА, ТКАЧЕНКО ИРИНА ИВАНОВНА, КАГАН ЮРИЙ СОЛОМОНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/48
Метки: активности, нейротоксической, эстеразы
Опубликовано: 07.04.1991
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1640650-sposob-opredeleniya-aktivnosti-nejjrotoksicheskojj-ehsterazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности нейротоксической эстеразы</a>
Способ определения нарушения активности фибриногена плазмы крови
Номер патента: 1458824
Опубликовано: 15.02.1989
Авторы: Александров, Бобринская, Будякова, Кармолина
МПК: G01N 33/50
Метки: активности, крови, нарушения, плазмы, фибриногена
...раствора коммерческого препарата протаминсульфата, что соотносится как 9;1, Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь добавлением 1,29/-ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов получают тромбоэластограмму. Величина измеренной максимальной амплитуды 40 мм. По данным предлагаемого способа сделано заключение: функциональная активность фибриногена сохранена; несвертынаемость обусловлена избытком физиологического гепарина. По данным известного способа такого заключения сделать не удается, так как он не выявляет этих комплексны 1 с нарушений. Даны соответствующие рекомендации к проведению корригирующей терапии выявленных нарушенийИсход заболевания - больной переведен в профильное...
Способ определения концентрации физиологически активных катионов в крови
Номер патента: 1097950
Опубликовано: 15.06.1984
Авторы: Банов, Воробьев, Голубев, Гуцол, Зайцев, Медведев, Пурин, Самсонов
МПК: G01N 33/48
Метки: активных, катионов, концентрации, крови, физиологически
...системуэлектродов каждый электрод снабжен 65 жидкой мембраной, при этом для определения ионов калия мембрана состоитиз 0,1-4,0-ного раствора калиевойсоли валиномицина в 1,2-дихлорэтане,для определения ионов натрия из 0,57,5-ного раствора натриевой солиграмицицина А в хлорбензоле, дляопределения ионов кальция из 4-18-ного раствора кальциевой соли изоамилового эфира гептилфосфоновой кислотыв толуоле, для определения ионов аммония из 0,5-12-ного раствора аммониевой соли тетранактина в 1, 2-дихлорэтаНе,Способ осуществляется следующимобразом.Высокоизбирательные жидкостныеионселективные электроды, компануютв виде блока и одновременно вводятанализируемую пробу крови. При этомэлектроды подключают в измерительнуюцепь с логарифмическим...
Способ количественного определения анионных поверхностно активных веществ в водных растворах
Номер патента: 1206698
Опубликовано: 23.01.1986
МПК: G01N 31/02
Метки: активных, анионных, веществ, водных, количественного, поверхностно, растворах
...основан на высаливании 10 АПАВ в форме осадка из водного раствора при введении в него низкомолекулярного электролита.Для этого анализируемая проба раствора разбавляется раствором 15 электролита до концентрации 0,00025- 0,0047, при которой микродисперсиял устойчива во времени. Полученная микродисперсия фотонефелометрируется с последующим определением концентра ции его по калибровочному графику, построенному с использованием стандартного раствора АПАВ.Способ осуществляют следующим образом.В пробирку вносят 0,1 - 5 мл анализируемого водного раствора АПАВ, затем доводят до 20 мл раствором электролита предпочтительно с концентрацией более 37. Содержимое пробирки тщательно перемешивают встряхиванием в течение 10 - 15 с. Полученную устойчивую...
Способ определения активности холинэстеразы в крови и устройство для его осуществления
Номер патента: 1668949
Опубликовано: 07.08.1991
Авторы: Апухтин, Горохов, Мазин, Порхунова, Самокиш
МПК: G01N 33/68
Метки: активности, крови, холинэстеразы
...на переключателях П 2 К.Устройство работает следующим образом,Для измерения активности холинэстеразы в крови человека приготовляют реакционную смесь, содержагцую З,О 10М трис-буфера рН 8,0 и 1,2 10 М БАС-С (4,4-Бис-(1-гидро к си-х ло р,6-ди сул ьфо-нафтилазо)дифенилдисульфид динатриевая соль, трехводная). Эту смесь е объеме 5 мл помещают в медицинский флакон, затем в нее вводят 0,05 мл цельной крови человека и перемешивают смесь встряхиванием. Кю вету устанавливают в измерительный блок 1, в реакционную смесь добавляют 5 10М раствор дитиохолинового эфира пробке вой кислоты в объеме 1 мл посредством автоматически управляемого дозатора А,работающего в режиме разового дозирования,5 При нажатии кнопки "Пуск на панелиприбора...
Способ определения активных красителей в крови
Номер патента: 1697005
Опубликовано: 07.12.1991
Авторы: Дедюкина, Зайцева, Землянова, Хрущев
МПК: G01N 33/48
Метки: активных, красителей, крови
...ыйл график - эталон,Кзлибоовочный график строится следуощим образом, Пробь крови контрольных жиВотных Объемом 1 мл экстрзгируют 2 мл диметилформямида, содержащего различные концентрации активных красителей ярко-красного бС и черного К с последующим кипячением в течение 1 мин. Велок удаляют центрифугирование при 8000 об/клин, а пробы упзривзют до объема О,Ь мл. На пластинку с широкопористым силика, елем нанося предварительно обрабоянные пробы крови, содержащие красители активный ярко-красньй бС и черный К В различных концентрациях, Пластин:у помещают В хромзтографическую систему изобутило. Вый спирт - диметилформзмид - вода в объ" емном соотношении 11:3;1, Процесс элюирОВзния ззнимяет, ч, Затем с грояграфик зависимости площздл...
Предыдущий патент: Способ лечения заболеваний легких, сопровождающихся повреждением сурфактанта
Следующий патент: Способ прогнозирования течения мозгового инсульта
Случайный патент: 179368