Способ получения антисыворотки против антигенной детерминанты 1-j рецептора т-супрессоров

(5 СВИДЕТЕЛЬСТ ОТОРСН субобластиК 1- г, мыши рибрюшинно имен кспе Она -с Черезэритроцитоют, готовятзенки и эубрюшинко редозе 10 10процедуру иным интервагпосле 7 иж гг дей берут кровьнуса в стервают 4 ч прсгустка, цепри 400 оют антисыво ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИСЫЕОРОТКИПРОТИВ АНТИГЕННОЙ ДЕТЕРМИНАНТЫ 1-,Х"РЕЦЕПТОРА Т-СУПРЕССОРОВ(57) Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине. Целью изобретения является повьппениеактивности антисыворотки против Тсупрессоров. Гибридам-реципиентам(ДВА/2 ХЗК)Р, вводили клетки селезенки мышей линии 5 К, предварительно Способ относится к э р тальной биологии и медицине. можетбыть использован в исследовании механизмов регуляции иммунитет Т уп-рессорами 1 п гг.чо и п ч о путемвысокоспецифического воз ствияна эти клетки.Целью изобретения является повышение активности антисыворотки против Т-супрессоров, позволяющее примекять ее в более высоких разведениях.П р и м е р, Гибриды-реципиенты (ДВА/2 ФЗК)1, получают, скрещивая самца ДВА/2 с тремя самками ЗК. Дляиммунизации используют гибридов Р обоего пола в возрасте 3 месяца.Мышам-донорам линии 5 К отличаю- . щимся от линии ЗК только по аллелю , 35=,Р стимулированных внутрибрюшиннымвведением иммуностимулирующей дозыэритроцитов барана. Такую процедуруповторяют б раэ с недельным интервалом. Через 10 дней после последнейимгунизации берут кровь, выделяютсыворотку и адсорбируют ее теми жеклетками селезенки мышей линии 5 К.Предложенный способ позволяет получить антисыворотку с резко усиленнои активностью и иммуномодулирующими свойствами дггя изучения механизмов регуляции иммунного ответа субпопулции иммунокомпетентных клетоксупрессорного ряда. Полученная актисыворотка активна в чрезвычайно мальгх дозах, а ее рабочее разведениев 5-10 раз превосходит имеющийсякоммерческий препарат. 21-7 (иьппи 5 К несут аллелькЗК - 1-1 ) вводят внутб 10 эритроцитов барана.9 неделю после введения в барана мьппей 5 К забива- , рсуспензию клеток селесуспензию вводят внутриципиентам (ДВА/2 хЗК) Р вклеток на мышь. Такую овторяютраэ с недельгом. Через 10 днейунизаций у реципиентовиэ ретроорбитального сиильных условиях, отстаи 0и 4 С до образованиянтрифугируют сыворотку 5 мин на холоде и получаротку,Формула изобретения Составитель П,Бонарцев Техред М.ХоданичКорректор Л,Пилипенко Редактор Л.Павлова Заказ 3330 Тираж 511 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 13035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 Для удаления антиидиотиннческих И аутоантител полученную антисыворотКу анти н 3 подвергали абсорбции. абсорбцию проводили в течение 45 мин при 4 С на смеси клеток селезенки,9лимфоузлов и тимуса мьппей.реципиентов (ДВА(2 ХЗК)Р предварительно занеделю до абсорбции получивших Внутрибрюшинно 6 10 эритроцитов баФана, т.е, прошедших туже обработку, то и мыши-доноры 5 К при получении итисыв-ротки. Для абсорбции 1 мл итисыворотки использовали 0,15 млотного осадка (400 я, 20 мин) клеок реципиента при периодическом пеемешивании. После проведения абсорби аллоантисыворотку освобождали от орбирующих клеток (400 и, 4 С,5 мин), разливали аликвотами по 00 мкл и хранили при -70 С до ис 1 тользования.Во всех исследованных тест-систек Мах антисыворотка анти 1-.1, полученная предлагаемья методом, отменяла суспензию иммунного ответа, действуя 0059 4высокоспецифично, была активна в чрезвычайно малых дозах, а ее рабочее разведение в 5-10 раэ превосходило имеющийся коммерческий препарат.5 Способ получения антисынороткикпротив антигеннгй детерминанты 1-3рецептора Т-супрессоров путем имму"ниэации мьппей-реципнентов клеткамиселезенки мьппеи линии 5 К с последующим выделением сыворотки крови,о т л и ч а ю щ и й.с я тем, что,с целью повышения активности антнсыворотки, в качестве реципиентов используют гибриды мышей (ДВА(2 мЗК)Га иммунизацию осуществляют клеткамиселезенки тех же мышей, предварительно стимулированных внутрибрюшинным введением иммуностимулирующейдозы зритроцитов барана, далее после выделения сыворотки ее абсорбиру-, 25 ют теми же клетками селезенки стимулированных мьппей линии 5 К.