Способ получения лектина

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУбЛИК 51)4 А 61 К ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ИДЕТ ЕПЬСТВУ АВТОРСНО СУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТ(71). Киевский государственный университет им.Т.Г,Шевченко(56) А 11 еп А,К., ЯеоЬег 8 ег А.,Зпагоп Я., 7 Ье рцгНсаИоп, сошроагоп апй аресИсИу ой чЬеасяегш а 881 ийхмп. - ТЬе ВосЬепаса 1Зоцгпа 1, 1983, ч.131, ю 1, р.155162.(57) Изобретение относится к медицине и биологии, касается способа получения лектина из растительного сырья,в качестве которого используют надземную часть коланхое БлосФельда.Экстракцию сырья ведут 29-31 Х-нымэтиловым спиртом. Затем проводятосаждение центрифугированием при6000 я 78-823-ным этиловым спиртоми очистку на аффинном,сорбенте. Вкачестве элюента используют 0,08 О, 12 н. уксусную кислоту или О, 1 О, 18 М р-р ЯаС 1.1438800 Формула изобретения Способ получения лектина путем измельчения растительного сырья, экстракции, осаждения целевого продукта, очистки и сушки, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа и сокращения времени процесса, в качестве источника сырья используют надземную часть каланхое Блоссфельда (Ка 1 апсЬое Ыоззйе 1 Иапа т,Рое 11 п), экстракцию ведут 29-317.- ным этиловым спиртом, осаждение осуществляют 78-827.-ным этиловым спиртом, а очистку проводят на аффинном сорбенте используя в качестве элюента 0,08-0,12 н. уксусную кислоту или О, 1-0, 18 М раствор хлористого натрия. Составитель Е.ЗоринТехред Л,Сердюкова Корректор С.Шекмар Редактор А,Шандор Заказ 5992/9 Тираж 655 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, И, Раушская наб., д. 4/5а ьеПроизводственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицине и биологии и касается способа получения лектина из растительного сырья.Целью изобретейия является упро 5 щение способа и сокращение времени процесса.П р и и е р ,1 кг надземной части каланхое Блоссфельда измельчают, отжимают сок, Фильтруют его через 10 бумажный Фильтр при комнатной температуре. Фильтрат охлаждают до 4 С и добавляют охлажденный до 4 С 967- ный этиловый спирт до конечной концентрации спирта 307. и оставляют нао1 ч при 4 С. Через.1 ч смесь центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 4 С в течение 10 мин при 6000 я. К надосадочному 307.-ному спиртовому раствору добавляют охОлажденный до 4 С 967.-ный этиловый спирт до получения 80/-ного насыщения и выдерживают 1 ч при 4 С. Затем центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 4 С в течение 25 5 мин при 6000 я. Осадок собирают и растворяют в минимальном (до 50 мл) количестве охлажденной до 4 С дистиллированной воды.Растворенный осадок диализируют З 0 против охлажденной до 4 С дистиллированной воды в течение 2 ч. Затем центрифугируют в рефрижераторной ценотрифуге при 4 С в течение 20 мин при 6000 я. Надосадочный раствор собирают и извлекают из него лектин следующим образом.Колонку (Зх 15. см) наполняют аффинным сорбентом (овогелем) при 4 С, промывают водой, охлажденной до 4 С. Промывку колонки ведут до тех пор, пока оптическая плотность вытекающей жидкости при 280 нм не снизятся до О, 10.Раствор лактина после последнего центрифугирования пропускают через колонку с аффинным сорбентом при 4 С,после чего колонку промывают охлажоденнси до 4 С дистиллированной водой до тех пор, пока оптическая плотность вытекающей жидкости при 280 нм не снизится до О, 15. Затем через колонку пропускают О, 10 н., раствор уксусной кислоты или О, 15 М раствор хлористого натрия в 0,1 М ацетатном буфере при комнатной температуре и собирают фракции, содержащие лектин. Наличие лектина во фракциях определяют с помощью реакции эритроагглютинации либо по оптической плотности раствора на спектрофотометре, Собранные Фракции, содержащие лектин, сливают вместе и диализируют против дистиллированной воды в течение 2 ч,опри 4 С, затеи лиофильно высушивают. Выход готового продукта составляет 103 мг при элюции лектина уксусной кислотой и 99 мг при элюции лектина раствором хлористого натрия. Способ состоит из 13-ти стадий. Продолжительность процесса 15,5 ч. Известный способ включает 2 1-у стадию, его продолжительность 51 ч.