Способ диагностики ревматоидного артрита

Номер патента: 1327006

Авторы: Коненков, Мусатов, Наумов, Прокофьев

ZIP архив

Текст

(19) 01)51) 4 С 01 И 33/533 ПИСАНИ ЕНИЯ У 28еской иммуноло Наумов,кофьев еС а 1. -р.272-276 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Институт клиничгии СО АМН СССР.1. КЬецщаг.о 1, 1984,(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РВВМАТОИДНОГО АРТРИТА(57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - повышениеточности диагностики. Клеточную взвесьинкубируют с раствором моноклональных антител к мономорфным детерминантам Н 1.А-ВК и обрабатывают кроличьейантисывороткой. После отмывания ицентрифугирования клеточную взвесьна стекле исследуют под микроскопомфотометром. Наличие клеток с интенсивностью свечения свыше 150 мА подтверждает диагноз ревматоидного артрита. За счет использования маркераколичественного уровня свечения клеток повышается достоверность диагностики.1327006 Ф о р м у л а изобретения Составитель В. Фролова Техред И.Попович Корректор Т. Колб Редактор М, Петрова Подписное Заказ 3382/40 Тираж 776 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицине,а именно к иммунологическим способамдиагностики заболеваний, в частностиревматоидного артрита (РА),Цель изобретения - повышение точности диагностики.,П р и м е р. Мононуклеарные клетки выделяют из 5 мл дефибринированной венозной крови центрифугированием на градиенте плотности фиколлверографина И=1,077 г/см), содержащем 0,057. азида натрия, при 400 ув течение 40 мин. После трех отмывоксредой 199 с последующим центрифугированием при 1000 об,/мин в течение5 мин клеточную взвесь (30 млн/мл)в объеме 0,05 мл (всего 1,5 млн,клеток) обрабатывают 17.-ным растворомпараформальдегида в фосфатном буфере. с рН 7,4 в течение 30 с. После этого вновь производят две отмывки,только уже эабуференным физиологическим раствором (ЗФР). После отмывок клеточную взвесь (1,5 млнклеток) в объеме 0,05 мл инкубируют сравным объемом (0,05 мл) раствора моноклональных антител ВЬ-РК (ГДР) кмономорфным детерминантам НЬА-РК.После 60 мин инкубации на шейкере(200 цикл/мин) и последующихдвух отмывок ЗФР клеточную взвесь обрабатывают кроличьей антисывороткой против глобулинов мыши, меченной ФИТЦ,в объеме 0,05 мл в течение 60 минна шейкере. После окончательных двухотмывок ЗФР с последующим центрифугйрованием при 1000 об,/мин в течение5 мин клеточную взвесь переносят напредметное стекло для учета результатов. Для моноклональных антителВЬ-РК конечное разведение составило1:40, а для кроличьей антисыворотки -1:4. Учет НЬА-ПК - позитивных клеток и измерение величины их свечения проводят на микроскопе-фотометре под масляной иммерсией гри увеличении 6,3 х 63 с использованием селективного для ФИТЦ блока фильтров 12.Идентифицируют 100 клеток по размерам и структуре в проходящем свете. Из числа клеток определяют клетки, которые обладают специфическим мембранным свечением или имеют флюоресцентные шапочки (в ультрафиолетовом режиме). Затем замеряют специфическое мембранное свечение единичного лим фоцита в течение 0,25 с. Свечениевсех 100 лимфоцитов отражают на ги-.стограмме распределения свечения клеток в диапазоне от 0 до 250 мА. Клетки с интенсивностью свечения свыше 150 мА говорят о наличии ревматоидного артрита, причем достаточно обнаружить хотя бы одну такую клетку.Положительный эффект достигается 25 за счет выявления неизвестного ранеедля ревматоидного артрита маркераколичественного уровня свечения клеток, что позволяет поставить верныйдиагноз с достоверностью, близкой 3 О к 1002,Способ диагностики ревмато 35идного артрита путем иммунофлуоресцентного определения НЬА-ПК антигенана лимфоцитах крови больного, о. тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности диагностики,определяют уровень свечения НЬА-РКантигена на лимфоцитах и при величинеего выше 150 мА диагностируют ревматоидный артрит,

Смотреть

Заявка

3957961, 26.07.1985

ИНСТИТУТ КЛИНИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИИ СО АМН СССР

КОНЕНКОВ ВЛАДИМИР ИОСИФОВИЧ, НАУМОВ ЮРИЙ НИКОЛАЕВИЧ, МУСАТОВ МИХАИЛ ИВАНОВИЧ, ПРОКОФЬЕВ ВИКТОР ФЕДОРОВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/533

Метки: артрита, диагностики, ревматоидного

Опубликовано: 30.07.1987

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1327006-sposob-diagnostiki-revmatoidnogo-artrita.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ диагностики ревматоидного артрита</a>

Похожие патенты