Способ идентификации

ГлюкозаАгар-агарДистиллированнаявода стально ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) Авторское свидетельство СССР У 988865, кл, С 12 Ю 1/00, 1981.Методические рекомендации по лабораторной диагностике кишечного иерсиниоза. Иркутск, 1979, с21.(54)(57) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ 1 ЕК 81 И 1 А РЯЕБРОТЦВЕКСШ.0813 путем посева исследуемой культуры на питательную среду с последующим инкубиорованием при 37 С и учетом выросших колоний, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа и повышения его точности, исследуемую культуру параллельно инкубируют при 18-26 С, при этом оба посева0осуществляют на питательную среду, содержащую, г/л:сСердечно-мозговаяоснова при рН ;, 1-7,3, затем с выросшимиС культурами проводят реакцию агглюти нации эритроцитов барана в присутствии 0,5-1,5 Е Р-маннозы и идентифицируУют 1 егз 1 па рзепдогцЬегси 1 озз Со при наличии роста при 37 С и агглютинации эритроцитов.Составитель Г.СмирноваТехред О.Ващишина Корректор М Демчик Редактор Н.Яцола Заказ 7232/27 Тираж 524 ПодписноеВНЙИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается идентификации 1 егвп 1 а рвецйогцЬегсц 1 озхв.Цель изобретения - упрощение и lповышение точности способа.П р и м е р 1. Клетки 1.рвецйогцЬегсц 1 овхз штамм 43/111 и 1.епгегосо 1 гдса штамм 10702 засевают петлей на секторы двух чашек с сердечно-мозговым агаром, содержащим, г/мп: сердечно-мозговая основа 30, глюкоза 0,5, агар-агар 10, дистиллированная вода остальное, рН 7,1, Одну чашку инкубируют при 37 С, другую при 18 С. Через 18 ч.культивирования ставят реакцию гемагглютинации. На дно чашки Петри для предотвращения растекания восковым карандашом наносят несколько взаимо- пересекающихся штрихов. Пипеткой вносят 1-2 капли 37-ной взвеси эритроцитов барана, содержащей 0,57 Р-маннозы. В капле эритроцитов осторожно растирают петлю исследуемой культуры. Чашку осторожно покачивают, Положительный результат - наличие маннозореэистентного температурно-зависимого гемагглютинина - характеризуется появлением через 30-60 с хлопьев склеенных эритроцитов. При отрицательном результате взвесь остается гомогенной.Клетки 1.рвецйойцЬегсц 1 овв образуют манноэорезистентный гемагглютио нин только после выращивания при 37 С. Клетки 1.епСегосо 11 хса подобного склеивания эритроцитов не вызывают:П р и м е р 2. Клетки 1,рвецйогцЬегсц 1 овхв 43/1 Ц и 1. епсегосо 13. - гса 10702 штрихом засевают на сектора двух чашек с сердечно-мозговым 1 93170 2агаром, содержащим, г/л: сердечномозговая основа 35, глюкоза 1, агарагар 15, дистиллированная вода остальное, рН 7,2. Одну чашку инкубио5 руют при 22 С, другую при 37 С.Реакцию агглютинации эритроцитовбарана ставят в присутствии 1 ЖЭ -манноэы. Далее опыт проводят как в примере 1.10 П р и м е р 3. Клетки 1.рвецйогцЬегсц 1 ов 1 в 43/111 и 1, епйегосо 1- гса 10702 штрихом засевают на сектора двух чашек с сердечно-мозговымагаром, состава, г/л: сердечно-моз говая основа 40, глюкоза 1,5, агарагар 20, дистиллированная вода остальное, рН 7,3. Одну чашку инкубируют при 26 С, другую при 37 С. Реакцию агглютинации эритроцитов бара на ставят в присутствии 1,57 Э-маннозы. Далее опыт проводят как в примере 1. При исследовании набора 66штаммов псевдотуберкулезного микроба1-Ч 1 серотипов и 76 штаммов возбуди теля кишечного иерсиниоза различногопроисхождения и давности выделенияобнаружено, что все исследованныеклетки 1.рвецооГцЬегсц 1 овв образуюттемпературно-зависимый маннозорезистентный гемагглютинин (вызываютсклеивание эритроцитов после культиовирования только при 37 С, но не при18-26 С), 76 штаммов возбудителя.кишечного иерсиниоза не образовываютгемагглютинина ни при одной иэ температур культивирования.По сравнению с известным предлагаемый способ не требует использова-,ния тест-культуры и антибиотиков, 40 присутствие последних в среде приводит к получению ложноположительныхрезультатов.