Способ определения глауцина

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИН ОМИТЕТ СССР ГЕНИЙ И Отй Ь 1 ТИйГОСУДАРСТВЕННЫПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ Ь1 цЦЕЛ НА ь веАВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(46) 15.08.84. Бюл. В 30 (72) М.Я. Ловкова, Г.Н, Буэук, Н.И. Климентьева и Н.И. Гринкевич (71) Ордена Ленина институт биохимии им. А.Н, Баха АН СССР, Витебский го-. сударственный медицинский институт и 1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институтим. И.М. Сеченова(56) 1. 0 ачдэ Р. Н 18 Ь-регГогпипсе 11 ццЫ сЬгогпагодгарЬдс дегегш 1 паг 1 оп ог 81 ацс 1 пе апд 1 гв щегаЬо 1 ьге, йеЬуйго 81 ацс 1 пе 1 п вдЕгоЬа 1 сц 1 Гцге. - 1. СЬгошагодг. 1980, р. 170- 174 . эс 59 С 01 Н 31/08; А 61 К 35/(54)(5) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛАпутем экстракции растительногосырья органическими растворителпри добавлении папаверина, о тч а ю щ и й с я тем, что, с цеповьппения точности способа, паприн вносят перед экстракцией вследуемый материал в отношении1:0,003-1:0,050.54 3ной бане, Оставшийся воднокислый раствор, содержащий сумму алкалоидов, охлаждают до комнатной температуры и отфильтровывают через стеклянный фильтр Р 4. Полученный фильтрат подщелачивают 257-ным аммиаком до рН 9-10 и экстрагируют хлороформом (20 мл3). Объединенные хлороформен" ные экстракты сушат безводным сульфатом натрия и растворитель отгоняют досуха на водяной бане. Остаток в зависимости от его количества растворяют в 0,1-5 мл этанола, 0,05- 0,1 мп полученного раствора подвергают двумерной ТСХ в смеси бензолхлороФорм-ацетон-метанол (4:4:1:3) 1-е направление и смеси толуол-ацетон-этанол-аммиак (10:10:1:0,5) - 2"е направление. Полученные хроматограммы проявляют реактивом Драгендорфа и аммиачным раствором тиосульфата натрияПроявленные зоны сорбции глауцина и папаверина элюируют смесью хпороформ-этанол-ацетон в соотношении 13:2;5. Растворитель из полученных элюатов отгоняют досуха на водяной бань, а остаток растворяют в 10 мл 27.-наго раствора НС 1 и измеряют оптическую плотность полученных растворов на СфА при 280 нм для глауцина и 283 нм для папаверина.Исходя из количеств внесенного в качестве внутреннего стандарта папа- верина и количества обнаруженных на хроматограмме глауцина и папаверина рассчитывают содержание первого алкалоида в навеске растительного материала.1Предлагаемый способ по сравнению с известным обеспечивает следующие преимущества: добавление внутреннего стандарта к экстрагенту позволяет учесть поправки на потери глауцина как в процессе выделения, так и в процессе количественного определения, что создает возможность его определения в малых навесках (10-200 мг) в образцах растительного материала, увеличивая точность в 10 раз. Кроме того, способ прост и может быть легко воспроизведен в лабораторных условиях, не требует использования сложного, дорогостоящего оборудования.ж 823 Подписное11083Изобретение относится к фармацевтической химии и биохимии вторичных соединений, в частности кисследованию и анализу алкалоидов,и может найти применение в биохимиии физиологии растений, лекарственномрастениеводстве, а также при контроле качества лекарственных препаратов,изготовляемых на основе алкалоидов.Известен способ определения глауцика путем экстракции. растительногосырья органическими растворителямипри добавлении папаверина Г 13.Однако этот способ разработандля определения алкалоидов в культу"ральной жидкости и не может быть использован для определения соединенийданного класса в растениях, поскольку в последнем случае перед разделением алкалоидов каким-либо споОсобом требуется дополнительная. очистка первичного экстракта, Крометого, прибавление внутреннего стандарта к уже выделенной сумме алкалоидов в указанном способе не позволяетучитывать ошибку определения,обусловленную колебаниями в полноте выделения суммы алкалоидов из культуральной жидкости.Цель изобретения - повышение точ 30ности способа.Поставленная цель достигаешьсятем, что согласно способу определения глауцина путем экстракции растительного сырья органическими растворителями при добавлении папаверина,папаверин вносят перед экстракциейв исследуемый материал в отношении1:0,003-1:0,050.Способ осуществляют следующимобразом,К точной навеске измельченнойтравы мачка желтого прибавляют определенное количество папаверина израсчета 1:0,003-1:0,050 растительного материала, заливают определенным объемом смеси хлороформа - этанола - аммиака в соотношении10: 10:1 (соотношение растительныйматериал - экстрагент 1: 10) и.50настаивают в течение 18 ч. Полученныйэкстракт отфильтровывают и смешиваютс равным объемом 57. водного растворауксусной кислоты. Из образовавшейсядвухфазной системы хлороформ и этанол отгоняют в токе воздуха на водя 55ВНИИПИ Заказ 5854/30 Тира