Способ получения иммуноглобулина для внутривенного введения со сниженной антикомплементарной активностью
Формула | Описание | Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Формула
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНА ДЛЯ ВНУТРИВЕННОГО ВВЕДЕНИЯ СО СНИЖЕННОЙ АНТИКОМПЛЕМЕНТАРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ путем обработки плазмы крови человека фракционирующими агентами с последующей очисткой и лиофилизацией, отличающийся тем, что, с целью сокращения длительности процесса и повышения качества целевого продукта за счет получения его в мономерной интактной форме, в качестве фракционирующего агента применяют каприлат натрия в концентрации 6 - 7%, а очистку проводят хроматографией на ДЕАЕ-целлюлозе в концентрации 10 - 14 г/г белка с дополнительной обработкой аэросилом А-380 в концентрации 0,21 - 0,36 г/г белка.
Описание
Цель изобретения - сокращение длительности процесса и повышение качества целевого продукта за счет получения его в мономерной интактной форме.
Указанная цель достигается тем, что в способе получения иммуноглобулина для внутривенного введения путем фракционирования плазмы крови человека с последующей ионообменной хроматографией на ДЕАЕ - целлюлозе, согласно изобретению в качестве фракционирующего агента используют каприлат натрия в концентрации 6-7% , а ДЕАЕ - целлюлозу - в концентрации 10-14 г/г белка с последующей обработкой аэросилом А-380 в концентрации 0,21-0,36 г/г белка.
В таблице дан сопоставительный анализ предлагаемого и известного способов.
Как видно из таблицы, положительный эффект предлагаемого способа заключается: во-первых, в сокращении сроков изготовления целевого продукта по сравнению со способом прототипа в 4 раза; во-вторых, в получении мономерной интактной формы целевого продукта без фрагментов и агрегатов. В то же время антикомплементарная активность целевого продукта такая же низкая, как в прототипе, несмотря на то, что молекула иммуноглобулина G не фрагментирована в отличие от прототипа. Определение антикомплементарной активности в препаратах иммуноглобулина G, полученных в пределах оптимальных параметров предложенного способа, показала, что ее уровень остается низким, варьируя от 10 до 15 мг белка/2 СH50, что соответствует действующим требованиям, предъявляемым к внутривенным препаратам иммуноглобулина (Требования ВОЗ).
П р и м е р. К 0,5 л плазмы крови человека при комнатной температуре добавляют 1,0 л ацетатного буфера (0,06 М, рН 4,0), коррегируют рН смеси до значения 4,8 с помощью 1,0 н. НСl. Затем капельно в смесь при постоянном перемешивании добавляют 250 мл 6,5%-ного раствора каприлата натрия, приготовленного на ацетатном буфере рН 4,8; выдерживают смесь без перемешивания в течение 60 мин при комнатной температуре и центрифугируют в режиме 3 тыс. об/мин в течение 30 мин. Повторное осаждение балластных белков проводят в указанном режиме после коррекции рН 1,0 н. раствором НСl до значения 5,7. Надосадок декантируют и диализуют против ацетатного буфера (0,015 М, рН 5,7) в течение 10 ч, затем обрабатывают диализат суспензией ДЕАЕ-целлюлозы в ацетатном буфере (0,015 М, рН 5,7), которую добавляют в соотношении 12,0 г влажного веса/г белка. Полученную смесь перемешивают в течение 60 мин при комнатной температуре, центрифугируют при 3 тыс. об/мин в течение 30 мин. В полученном надосадке устанавливают рН 7,2 с помощью 1,0 н. NaOH, а затем концентрируют белок в растворе до 7%. К концентрированному раствору белка иммуногло- булина добавляют аэросил А-380 из расчета 0,29 г сухого веса/г белка. После экспозиции смеси в течение 60 мин при постоянном перемешивании и комнатной температуре проводят ее центрифугирование при 3 тыс. об/мин в течение 30 мин. Конечный образец иммуноглобулина имеет концентрацию белка 5,0
1,0%, рН 7,2, уровень антикомплементарной активности - 0,11 СH50/мг белка, молекулярный состав: димеры менее 0,5%, фрагменты менее 0,5%, мономеры не менее 99%. Данные сопоставительного анализа изобретения с прототипом с использованием граничных значений параметров режима представлены в таблице.Таким образом получение иммуноглобулина по изобретению позволяет получить иммуноглобулин для внутривенного введения со сниженной антикомплементарной активностью в мономерной интактной форме в более короткий срок.
Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения иммуноглобулина для внутривенного введения. Цель изобретения - сокращение длительности процесса и повышение качества целевого продукта за счет получения его в мономерной интактной форме. Для этого в качестве фракционирующих агентов применяют каприлат натрия в концентрации 6 - 7%, ДЕ АЕ-целлюлозу, в концентрации 10 - 14 г/г белка с дополнительной обработкой аэросилом А-380 в концентрации 0,21 - 0,36 г/г белка. 1 табл.
Рисунки
Заявка
4761544/14, 22.11.1989
Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова
Кузьмичев В. А, Сарафанова Л. Н, Крохина М. А, Гусенова Ф. М, Позина И. М, Мигунов В. Н, Русанов В. М
МПК / Метки
МПК: A61K 38/16, A61K 39/395
Метки: активностью, антикомплементарной, введения, внутривенного, иммуноглобулина, сниженной
Опубликовано: 20.03.1995
Код ссылки
<a href="https://patents.su/0-1693751-sposob-polucheniya-immunoglobulina-dlya-vnutrivennogo-vvedeniya-so-snizhennojj-antikomplementarnojj-aktivnostyu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения иммуноглобулина для внутривенного введения со сниженной антикомплементарной активностью</a>
Способ определения концентрации, рн, скорости
Номер патента: 180403
Опубликовано: 01.01.1966
Автор: Самойленко
МПК: G01N 27/416
Метки: концентрации, рн, скорости
...которой зависит от концентрации и рН растьоров, а направление от того, какая среда цсследуется - кислая цли щелочная, Чем больше концентрация кислоты (илц щелочи), тем больше (или меньше) величина постоянной составляющей. я составляющая зависит также 05 тока раствора по отношению и Чем больше скорость движения тем оольше постоянная составУстановка состоит цз источника переменноГО цап 1 зяжецц 51 1 с стр 01;с твом ст 1 бц.ц 1 заццц переменного тока, миллцамперметра переменного тока 2, мцкроамперметра 3, батареи 5 электролцтцчсскцх конденсаторов 4 ц двух хци чески пасснных электродов 5 и 6. Прц и:- мерениц кош;сцтрациц кислоты цлц щелочи в растворе а т 1 кже тцтровапцц ц,10 щадь электродов должна быть равной. Прц измерении 0 состава...
Способ выделения белка и липидов из гидробионтов и продуктов их переработки
Номер патента: 873498
Опубликовано: 15.08.1987
Авторы: Вайнерман, Дамшкалн, Кулакова, Рогожин
МПК: A23J 1/04
Метки: белка, выделения, гидробионтов, липидов, переработки, продуктов
...вещество. Из органической фазы удаляют растворитель и получают 0,5 кг липидов криля.П р и м е р 3. Проводят по примеру 2, отличие в том, что в качестве неорганической соли используют двузамещенный фосфат натрия. Пасту смешивают с раствором, содержащим воду,пропанол и соль, в таком соотношении, чтобы концентрация пропанола составляла 50, соли 3 и воды 433 к массе смеси. Обработку проводят так же, как в примере 1. ПолучаюТ 7 кг порошка белка криля и 0,5 кг липидов криля.П р и м е р 4. Проводят по примеру 2, отличие в там, что в качестве неорганической соли берут углекислый калий, а содержание воды, пропанола и углекислого калия в смеси. доводят соответственно до 59, 27 и ЗЕ. Обработку.проводят так же, как в примере 1. После сушки...
Устройство для измерения рн в продуктах
Номер патента: 1755164
Опубликовано: 15.08.1992
Авторы: Ильиных, Кобелянова, Кудряшов, Потипаева
МПК: G01N 27/333
Метки: продуктах
...в виде пробирки, а навнешней 25 режущего наконечника 4, имеющего видповерхности расположены плоские лезвия, пробирки, осуществляется путем протекамежду которыми выполнены щелевые от- ния ее через продольные щелевые отверверстия, .:,:стия 10, расположенные между плоскимиСущественными признаками данного лезвиями 9 на цилиндрической части 8.изобретения являются выполнение внут После заполнения внутренней полусфериренней полости режущего наконечника в ческой части 7 тканевой жидкостью(эксудавиде пробирки, а на внешней поверхности том) наконечника 4 прбизводят измерениерасположены плоские лезвия, между кото- рН мяса чувствительным элементом индикарыми выполнены щелевые отверстия для торного электрода 3 и отчет по шкале присбора жидкости,...
Способ определения суммарной концентрации горючих компонентов в продуктах сгорания
Номер патента: 1822960
Опубликовано: 23.06.1993
Авторы: Беседин, Богомяков, Гамалей, Зиновьев, Мяленко, Фиалков
МПК: G01N 25/50
Метки: горючих, компонентов, концентрации, продуктах, сгорания, суммарной
...смесь. Затем полученную горючую смесь прокачивают с постоянной скоростью через реактор, в котором поддерживается постоянная температура. В реакторе проходит реакция медленного окисления смеси, Интенсивность хемииониэации контролируется по величине потенциала. возникающего на пассивном зонде, помещенном в реакционную зону. Для выявления связи между содержанием горючих компонентов в продуктах сгорания и потенциалом зонда необходимо поддерживать постоянными соотношение продуктов сгорания и окислителя в смеси, а также скорость прокачки смеси через реактор. Соотношение между продуктами сгорания и окислителем. скорость прокачки смеси определяются экспериментально в зависимости от конкретных условий. При температуре реакционной зоны в...
Способ измерения ионной концентрации рн и ен
Номер патента: 221843
Опубликовано: 01.01.1968
Автор: Тищенко
МПК: G01N 27/22, G01V 3/24
Метки: ионной, концентрации
...емкость которого модулируется входным сигналом датчика, погруженного в исследуемый раствор. Полученную разностную частоту сравнивают с частотой звукового генератора, получая частоту вторичных биений, которые являются носителем информации об изменении рН и ЕН, например в скважине. Девиация часг .1 Стоты определяется по формуле Л=2 С,1по формуле= - ; ЛС - вел2 л 1 1,.С,приращения емкости контура р - т-перехода С 0. Частотный разбаланс (девиация частоты) одного автогечератора прямо пропорционален емкости р - л-переходов диодов, включенных в колебательный контур, которая, в свою очередь прямо пропорциональна ионной концентрации или окислительно-восстановнтельному потенциалу стандартного или исследуемого раствора.При разностной частоте Р=0 -...
Предыдущий патент: Измерительное устройство к балансировочному станку
Следующий патент: Способ получения рессорного листа
Случайный патент: Планетарная передача для вращения в противоположные стороны соосных воздушных винтов