Сорбент для связывания тироксина

Номер патента: 1281005

Авторы: Аввакумов, Ахрем, Ермоленко, Свиридов, Стрельченок

Формула

Сорбент формулы
П-O-CH2- -CH2-NH-(CH2)n- -NH-Б
где П - остаток агарозы, целлюлозы или сефадекса;
Б - тироксинсвязывающий белок;
n = 2 или 3,
для связывания тироксина.

Описание

Изобретение относится к области медицины, в частности клинической биохимии.
Цель изобретения - создание нового сорбента, специфически связывающего тироксин, на основе тироксинсвязывающего белка человека. Поставленная цель достигается синтезом сорбента, представляющего собойтироксинсвязывающий белок, присоединенный через остаток аминокислоты и остаток эпихлоргидрина к полисахаридному носителю. В качестве исходного сырья используется недорогая и доступная сыворотка ретроплацентарной крови человека. Биоспецифический сорбент имеет следующую общую формулу:
П-O-CH2- -CH2-NH-(CH2)n- -NH-белок где П - остаток агарозы, целлюлозы или сефадекса,
n = 2 или 3.
Биоспецифический сорбент получают по схеме:
П-OH П-O-CH2- CH
П-O-CH2- -CH2-NH-(CH2)n- -OH
П-O-CH2- -CH2-NH-(CH2)n- -O-N

Полученный по этой схеме аффинный сорбент содержит от 0,01 до 1 мг белка в 1 мл сорбента в зависимости от количества белка, взятого в реакцию, имеет емкость связывания тироксина до 90% от емкости нативного (неиммобилизованного) белка и характеризуется высокой устойчивостью при хранении. В проводимых ниже примерах аффинный сорбент характеризуется весовым количеством иммобилизованного белка и величиной максимального связывания Вмакс, характеризующей емкость сорбента по отношению к тироксину.
П р и м е р 1. Растворяют 1 мг тироксинсвязывающего белка в 10 мл 0,1 М раствора NaHCO3 и охлаждают до 4 - 6оС.
На пористом стеклянном фильтре промывают двумя порциями охлажденной до 4 - 6оС 0,001 М соляной кислоты (по 30 мл) 10 мл геля активированной матрицы, приготовленной на основе сефарозы 4В с применением -амино- масляной кислоты (содержание активных групп: 7,2 мкмоль в 1 мл сорбента). Матрицу переносят в раствор белка и перемешивают в течение 2 ч при 4-6оС. Полученный сорбент промывают 50 мл 0,1 М раствора NaHCO3. Непрореагировавшие активные группы блокируют перемешиванием сорбента при комнатной температуре с 0,1 М трис-HCl буфером рН 8,0 в течение 1 ч.
Определено: 1 мл сорбента содержит 0,078 мг тироксинсвязывающего белка. Вмакс = 14,0 мкг тироксина на 1 мг иммобилизованного белка, что составляет 90% Вмакс нативного белка в растворе.
П р и м е р 2. Иммобилизацию белка проводят, как описано в примере 1, но в качестве активированной матрицы используют сорбент, приготовленный на основе целлюлозы (содержание активных групп: 3,1 мкмоль в 1 мл сорбента).
Определено: 1 мл сорбента содержит 0,040 мг белка. Вмакс = 12,4 мкг тироксина на 1 мг иммобилизованного белка, что составляет 80% от Вмакс нативного белка в растворе.
П р и м е р 3. Иммобилизацию белка проводят, как описано в примере 1, но в качестве активной матрицы используют сорбент, приготовленный на основе сефадекса G-200 и -аланина (содержание активных групп: 2,8 мкмоль в 1 мл сорбента).
Определено: 1 мл сорбента содержит 0,065 мг белка, Вмакс = 13,2 мкг тироксина на 1 мг иммобилизованного белка, что составляет 86% от Вмакс нативного белка. (56) Рекламный проспект медицинских радиодиагностических наборов типа "Immophase" фирмы "Corning Medical" США. Издатель: Corning Glass Works, Medfield, Mass. 02052, USA.
Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения - создание нового сорбента, специфически связывающего тироксин. В качестве исходного сырья используют сыворотку ретроплацентарной крови человека. Растворяют 1 мг тироксинсвязывающего белка в 10 мл раствора NaHCO3 и охлаждают до 4 - 6С. На пористом стеклянном фильтре промывают двумя порциями охлажденной соляной кислоты 10 мл геля активированной матрицы. Матрицу переносят в раствор белка и перемешивают в течение 2 ч. Полученный сорбент промывают раствором NaHCO3. Непрореагировавшие активные группы блокируют перемешиванием сорбента с трис-HCl буфером.

Заявка

3028917/14, 02.11.1981

Институт биоорганической химии АН БССР

Ахрем А. А, Стрельченок О. А, Свиридов О. В, Ермоленко М. Н, Аввакумов Г. В

МПК / Метки

МПК: C01G 1/02, G01N 33/50

Метки: связывания, сорбент, тироксина

Опубликовано: 30.01.1994

Код ссылки

<a href="https://patents.su/0-1281005-sorbent-dlya-svyazyvaniya-tiroksina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Сорбент для связывания тироксина</a>

Похожие патенты