Штамм pseudomonas acruginosa серотип 6 n 40, используемый для изготовления псевдомонозного антигена

Штамм Pseudomonas acruginosa серотип 6 N 40 (коллекция Всесоюзного государственного научно-исследовательского института ветеринарных препаратов), используемый для изготовления псевдомонозного антигена.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к получению штаммов, используемых при изготовлении препаратов для профилактики и лечения псевдомоноза животных.
Псевдомоноз пушных зверей, в том числе норок, острое инфекционное заболевание проявляется энзоотически, сопровождается геморрагическим воспалением, отеком легких, что чаще всего ведет к гибели животных. В настоящее время это заболевание зарегистрировано в странах, занимающихся клеточным разведением пушных зверей.
Возбудитель псевдомоноза обладает серотиповой вариабильностью. Данные эпизоотологических наблюдений и результаты типирования культур возбудителя псевдомоноза, выделенных от норок в разных регионах страны, показывают, что зарегистрированы преимущественно четыре серотипа возбудителя псевдомоноза, а именно 5, 6, 8 и 11 (по схеме Навs).
В настоящее время известны штаммы Pseudomonas aeruginosa используемые для изготовления иммунных препаратов для профилактики и лечения псевдомоноза человека.
Известен также штамм Pseudomonаs aeruginosa N 202 серотипа 6, используемый для изготовления моновалентной вакцины против псевдомоноза норок.
Однако производственный штамм возбудителя псевдомоноза N 202 серотипа 6 имеет нестабильные вирулентные свойства.
Целью изобретения является получение штамма Pseudomonas aeruginosa серотипа 6 N 40, обладающего стабильными свойствами вида, используемого для изготовления псевдомонозного антигена при получении гипериммунной сыворотки и вакцины.
Штамм Pseudomonas aeruginosa N 40 (лабораторный N 381-n) получен путем целенаправленной селекции из исходного полевого штамма 381. Штамм хранится в коллекции микроорганизмов лаборатории контроля и стандартизации препаратов, применяемых в аэрозольном состоянии, Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов.
Штамм Pseudomonas aeruginosa серотип 6 N 40 характеризуется следующими свойствами.
Морфологические свойства. Грамотрицательные палочки со слегка закругленными концами 0,6-0,8 ммк длины и 0,5-0,6 ммк ширины расположены в хранившихся культурах поодиночке, в свежепассированных встречаются в виде коротких цепочек, подвижные, спор и капсул не образуют.
Культурально-биохимические свойства. Хорошо растет на обычных (МПБ и МПА) и специальных (бульон и агар Хоттингера и Мартена) питательных средах. На плотных питательных средах растет в виде круглых с сероватым оттенком колоний, вокруг которых образуется желто-зеленая зона за счет выхода в питательную среду пигмента пиоцианина. Культура штамма растет при 4-41^оС. Температура 37-38^оС является оптимальной.
При культивировании на жидких питательных средах культура вызывает образование поверхностной пленки серо-белого цвета, продуцирует пигмент пиоцианин, за счет которого среда через 24-36 ч культивирования приобретает культивирования приобретает желто-зеленую окраску.
Культура штамма обладает гемолитической, желатиназной, каталазной, лецитиназной активностью, ферментирует без образования газа глюкозу, пептонизирует молоко.
Потребность в кислороде. Строгий аэроб.
Антигенные и серологические свойства. Культура штамма имеет жгутиковые Н и соматические О антигены. При идентификации с сыворотками по классификации Хабс относится к серотипу 6. Иммунологическим фактором, определяющим серотип, является термостабильный антиген микробной клетки.
Вирулентные свойства. Культура штамма Pseudomonas aeruginosa серотипа 6 N 40 обладает стабильными вирулентными свойствами. 50%-ная летательная доза (ЛД₅₀) суточной суспензии агаровой культуры составляет: для нелинейных белых мышей массой 14-16 г 100-125 млн. микробных клеток; для морских свинок массой 220-250 г 500-800 млн. микробных клеток, для тхорзофреток и норок 3-9 месячного возраста 1,25-1,75 млрд. микробных клеток.
Иммуногенные свойства. При внутримышечном способе введения инактивированная 0,3% -ным раствором формалина суточная суспензия агаровой культуры предохраняет от контрольного заражения 50% подопытных животных: морских свинок массой 300-350 г. иммунизированных в дозе 63 млн. микробных клеток; тхорзофреток и норок 3-9 месячного возраста, иммунизированных в дозах 0,125-0,250 млрд. микробных клеток.
Превентивные свойства гипериммунных сывороток, полученных к штамму Pseudomonas aeruginosa серотип 6 N 40. Гипериммунные сыворотки крови волов-продуцентов, полученные как к моновалентному антигену штамма Ps. aeruginosa серотип 6 N 40, так и при использовании его в ассоциации с другими серотипами штаммов возбудителя псевдомоноза достигают титра 1:3200-6400. Защитный титр при контрольном заражении составляет 1:400.
По сравнению с исходным штаммом Ps. aeruginosa N 381 предлагаемый штамм Pseudomonas aеruginosa N 40 имеет следующие отличия (см. таблицу).
Штамм Pseudomonas aeruginosa серотип 6 N 40 может быть использован в ветеринарной практике для изготовления моновалентной и поливалентной сыворотки против псевдомоноза сельскохозяйственных животных и пушных зверей, в том числе и норок, а также моновалентной и поливалентной вакцины для профилактики псевдомоноза норок и других сельскохозяйст- венных животных.
Штамм апробирован в лаборатории контроля и стандартизации препаратов, применяемых в аэрозольном состоянии, Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветпрепаратов при получении моновалентной и поливалентной гипериммунной сыворотки, моновалентной и поливалентной вакцины.